| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-25页 |
| 1.1 基因组编辑技术 | 第11-18页 |
| 1.1.1 锌指核酸酶技术 | 第12-14页 |
| 1.1.2 转录激化效应核酸酶技术 | 第14-16页 |
| 1.1.3 成簇的规律间隔短回文重复序列 | 第16-18页 |
| 1.2 同源重组 | 第18-20页 |
| 1.3 非同源末端连接 | 第20-21页 |
| 1.4 条件致死基因在促进同源重组中的应用情况 | 第21-23页 |
| 1.4.1 codA基因 | 第22-23页 |
| 1.4.2 upp基因 | 第23页 |
| 1.5 研究目的、意义及技术路线 | 第23-25页 |
| 第2章 codA致死体系在莱茵衣藻中的构建及应用 | 第25-61页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-30页 |
| 2.1.1 实验藻株与菌株 | 第25-26页 |
| 2.1.2 实验仪器与试剂 | 第26-28页 |
| 2.1.3 常用培养基 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-41页 |
| 2.2.1 codA基因的改造合成 | 第30页 |
| 2.2.2 pJ1D-crcodA表达载体的构建 | 第30-35页 |
| 2.2.3 upp基因的改造合成 | 第35页 |
| 2.2.4 pDb124-crcodAupp表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 2.2.5 莱茵衣藻的转化 | 第36-37页 |
| 2.2.6 转基因衣藻筛选及分子水平分析 | 第37-41页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第41-58页 |
| 2.3.1 crcodA基因的改造合成 | 第41-44页 |
| 2.3.2 pJ1D-crcodA表达载体的构建 | 第44-45页 |
| 2.3.3 upp基因的改造合成 | 第45-47页 |
| 2.3.4 pDb-crcodAupp表达载体的构建 | 第47-49页 |
| 2.3.5 莱茵衣藻的转化 | 第49-50页 |
| 2.3.6 转基因衣藻筛选及分子水平分析 | 第50-58页 |
| 2.4 本章小结与讨论 | 第58-61页 |
| 第3章 dKU80,dKU70藻株的验证及同源重组载体的构建 | 第61-79页 |
| 3.1 实验材料 | 第61-62页 |
| 3.1.1 实验藻株 | 第61页 |
| 3.1.2 培养基及试剂 | 第61-62页 |
| 3.2 实验方法 | 第62-67页 |
| 3.2.1 crKu80,crKu70基因的生物信息学分析 | 第62页 |
| 3.2.2 衣藻突变库的筛选 | 第62页 |
| 3.2.3 dKU藻的纯化及基因水平分析 | 第62-64页 |
| 3.2.4 同源重组载体的构建 | 第64-66页 |
| 3.2.5 同源重组藻的转化及筛选 | 第66-67页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第67-77页 |
| 3.3.1 crKu80,crKu70基因的生物信息学分析 | 第67页 |
| 3.3.2 衣藻突变库的筛选 | 第67-68页 |
| 3.3.3 dKU80,dKU70藻的纯化及基因水平分析 | 第68-72页 |
| 3.3.4 同源重组载体的构建 | 第72-75页 |
| 3.3.5 同源重组藻的转化及筛选 | 第75-77页 |
| 3.4 本章小结与讨论 | 第77-79页 |
| 第4章 总结与展望 | 第79-81页 |
| 4.1 总结 | 第79-80页 |
| 4.2 创新点 | 第80页 |
| 4.3 展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 附录 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
