| 摘要 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12页 |
| 第一章 绪论 | 第13-40页 |
| 1.1 核酸分子检测技术的发展与应用 | 第13-26页 |
| 1.1.1 PCR技术的发展概述 | 第13-17页 |
| 1.1.2 微流控技术在dPCR的发展与应用 | 第17-26页 |
| 1.2 单细胞全基因组研究技术发展 | 第26-37页 |
| 1.2.1 单细胞的研究意义 | 第26-29页 |
| 1.2.2 单细胞全基因组扩增方法 | 第29-37页 |
| 1.3 本论文的研究设计 | 第37-40页 |
| 第二章 基于离心力驱动的微液滴生成新方法 | 第40-57页 |
| 2.1 引言 | 第40-43页 |
| 2.2 实验材料 | 第43页 |
| 2.3 实验方法 | 第43-49页 |
| 2.3.1 掩膜板的设计与制作 | 第43-44页 |
| 2.3.2 SU-8模具制作 | 第44-46页 |
| 2.3.3 PDMS芯片制作 | 第46-47页 |
| 2.3.4 基于离心式芯片的液滴生成过程 | 第47-48页 |
| 2.3.5 液滴大小的影响因素考察及不同直径液滴生成 | 第48-49页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第49-56页 |
| 2.4.1 芯片的制作结果 | 第49-50页 |
| 2.4.2 基于离心式芯片的液滴生成效果 | 第50-51页 |
| 2.4.3 芯片中液滴稳定性验证结果 | 第51-53页 |
| 2.4.4 离心转速与通道几何结构对液滴直径的影响结果 | 第53-56页 |
| 2.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 第三章 基于离心式微液滴芯片的单分子核酸检测 | 第57-71页 |
| 3.1 引言 | 第57-58页 |
| 3.2 实验材料 | 第58-59页 |
| 3.3 实验方法 | 第59-62页 |
| 3.3.1 芯片制作 | 第59-60页 |
| 3.3.2 PCR反应体系配置 | 第60-61页 |
| 3.3.3 PCR反应体系的液滴生成与芯片密封 | 第61-62页 |
| 3.3.4 芯片上的液滴PCR | 第62页 |
| 3.3.5 液滴荧光成像与数据分析 | 第62页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第62-69页 |
| 3.4.1 PCR反应体系在芯片上的液滴生成结果 | 第62-63页 |
| 3.4.2 PCR变温条件下液滴在芯片中的稳定性考察结果 | 第63-64页 |
| 3.4.3 芯片上液滴PCR数据处理与分析 | 第64-66页 |
| 3.4.4 ddPCR与Q-PCR对比 | 第66-67页 |
| 3.4.5 变体积液滴芯片设计 | 第67-69页 |
| 3.5 本章小结 | 第69-71页 |
| 第四章 离心式微液滴芯片在单细胞全基因组扩增中的应用 | 第71-85页 |
| 4.1 引言 | 第71-72页 |
| 4.2 实验材料 | 第72-73页 |
| 4.3 实验方法 | 第73-78页 |
| 4.3.1 芯片制作与处理 | 第73-74页 |
| 4.3.2 单细胞挑取、裂解及扩增体系配置 | 第74-75页 |
| 4.3.3 标准MDA与液滴内MDA的单细胞全基因组扩增 | 第75-76页 |
| 4.3.4 液滴破乳回收 | 第76页 |
| 4.3.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第76页 |
| 4.3.6 扩增产物测序 | 第76-78页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第78-83页 |
| 4.4.1 液滴内单细胞全基因组扩增动力学过程表征 | 第78-79页 |
| 4.4.2 液滴内单细胞全基因组扩增背景DNA污染表征 | 第79-80页 |
| 4.4.3 液滴内单细胞全基因组扩增的琼脂糖凝胶电泳表征 | 第80页 |
| 4.4.4 测序质量评估及覆盖度对比分析 | 第80-82页 |
| 4.4.5 液滴内单细胞全基因组MDA与传统MDA扩增偏差对比 | 第82-83页 |
| 4.5 本章小结 | 第83-85页 |
| 第五章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-97页 |
| 作者攻读硕士期间发表论文 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
