| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语及符号 | 第10-11页 |
| 绪论 | 第11-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-35页 |
| 1 猪肺炎支原体的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1 病原学 | 第13页 |
| 1.2 猪肺炎支原体的致病机理 | 第13-14页 |
| 2 猪肺炎支原体的主要抗原蛋白 | 第14-18页 |
| 2.1 黏附因子 | 第15-17页 |
| 2.2 膜蛋白 | 第17-18页 |
| 2.3 细胞质蛋白 | 第18页 |
| 3 猪肺炎支原体的检测技术 | 第18-21页 |
| 3.1 临床与病理剖检 | 第19页 |
| 3.2 PCR诊断技术 | 第19-20页 |
| 3.3 血清学检测 | 第20-21页 |
| 4 胶体金免疫层析技术 | 第21-26页 |
| 4.1 胶体金发展历程 | 第21页 |
| 4.2 胶体金的特性和制备 | 第21-22页 |
| 4.3 免疫胶体金的制备及层析原理 | 第22-24页 |
| 4.4 免疫胶体金层析技术在动物疾病诊断上的应用 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-35页 |
| 第二篇 研究内容 | 第35-75页 |
| 第一章 免疫胶体金的制备 | 第35-53页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| 1.1 重组大肠杆菌及单抗 | 第35页 |
| 1.2 主要材料和试剂 | 第35页 |
| 1.3 主要仪器 | 第35-36页 |
| 2 方法 | 第36-43页 |
| 2.1 P97R1蛋白的表达纯化 | 第36-37页 |
| 2.2 P46蛋白的表达纯化 | 第37-39页 |
| 2.3 胶体金的制备 | 第39页 |
| 2.4 免疫胶体金的制备 | 第39-43页 |
| 3 实验结果 | 第43-48页 |
| 3.1 重组大肠杆菌的表达及纯化结果检测 | 第43-44页 |
| 3.2 重组蛋白的抗原性分析 | 第44-45页 |
| 3.3 胶体金溶液的鉴定 | 第45-46页 |
| 3.4 免疫胶体金最适标记条件的确定 | 第46-48页 |
| 4 分析与讨论 | 第48-50页 |
| 4.1 抗原蛋白的表达和纯化 | 第48页 |
| 4.2 胶体金的制备 | 第48-49页 |
| 4.3 免疫胶体金的制备 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 第二章 猪肺炎支原体血清抗体胶体金免疫层析检测方法的建立 | 第53-63页 |
| 1 材料 | 第53页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第53页 |
| 1.2 主要仪器 | 第53页 |
| 2 方法 | 第53-56页 |
| 2.1 阴阳性标准品的确定 | 第53-54页 |
| 2.2 试纸条的组装 | 第54页 |
| 2.3 层析模式的确定 | 第54-55页 |
| 2.4 免疫胶体金试纸条的优化 | 第55-56页 |
| 2.5 免疫胶体金试纸条的性能测试 | 第56页 |
| 2.6 临床血清样品检测 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-60页 |
| 3.1 标准品的确定 | 第56页 |
| 3.2 层析模式的确定 | 第56-57页 |
| 3.3 试纸条优化结果 | 第57-58页 |
| 3.4 免疫胶体金试纸条的性能测试 | 第58-60页 |
| 3.5 临床应用 | 第60页 |
| 4 分析与讨论 | 第60-62页 |
| 4.1 层析模式的确定 | 第60页 |
| 4.2 检测线与质控线浓度的优化 | 第60-61页 |
| 4.3 硝酸纤维素膜(NC膜)的选择 | 第61页 |
| 4.4 试纸条处理液的选择 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 第三章 猪肺炎支原体黏膜抗体免疫胶体金层析检测方法的建立 | 第63-75页 |
| 1 材料 | 第63页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第63页 |
| 1.2 主要仪器 | 第63页 |
| 2 方法 | 第63-66页 |
| 2.1 试纸条的组装 | 第63-64页 |
| 2.2 层析模式的确定 | 第64页 |
| 2.3 免疫胶体金试纸条的优化 | 第64-65页 |
| 2.4 免疫胶体金试纸条的性能测试 | 第65页 |
| 2.5 临床鼻拭子样品检测 | 第65-66页 |
| 3 结果 | 第66-69页 |
| 3.1 层析模式的确定 | 第66页 |
| 3.2 试纸条优化结果 | 第66-67页 |
| 3.3 免疫胶体金试纸条的性能测试 | 第67-69页 |
| 3.4 临床应用 | 第69页 |
| 4 分析与讨论 | 第69-73页 |
| 4.1 黏膜抗体的检测 | 第69页 |
| 4.2 层析模式的确定 | 第69-70页 |
| 4.3 特异性检测问题分析 | 第70页 |
| 4.4 假阳性问题的分析 | 第70-71页 |
| 4.5 胶体金免疫层析技术的优势 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-75页 |
| 结论与展望 | 第75-77页 |
| 附录: 常用试剂的配制 | 第77-83页 |
| 致谢 | 第83页 |