| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-38页 |
| 第一章 嗜水气单胞菌毒力因子研究进展 | 第11-22页 |
| 1 病原学 | 第11页 |
| 2 嗜水气单胞菌的毒力因子 | 第11-15页 |
| 2.1 黏附因子 | 第12-14页 |
| 2.2 胞外产物 | 第14页 |
| 2.3 分泌系统 | 第14-15页 |
| 2.4 铁离子获取系统 | 第15页 |
| 2.5 群体感应系统 | 第15页 |
| 3 小结 | 第15-17页 |
| 参考文献 | 第17-22页 |
| 第二章 原生动物与细菌的相互关系 | 第22-38页 |
| 1 自由生活原生动物 | 第22-24页 |
| 1.1 自由生活原生动物的定义及其形态学 | 第22-23页 |
| 1.2 自由生活原生动物在生态学中的重要性 | 第23-24页 |
| 1.3 自由生活原生动物在自然环境和人类生存环境中的分布 | 第24页 |
| 2 常见的与细菌互作的原生动物 | 第24-25页 |
| 2.1 棘阿米巴 | 第25页 |
| 2.2 四膜虫 | 第25页 |
| 3 细菌在原生动物中的生活史 | 第25-26页 |
| 4 环境和生物因素影响原生动物内细菌存活 | 第26-27页 |
| 5 细菌与原生动物之间的相互作用 | 第27-30页 |
| 5.1 自由生活原生动物成为细菌的环境“储存器” | 第27页 |
| 5.2 环境中细菌通过自由生活原生动物传播 | 第27-28页 |
| 5.3 自由生活原生动物是细菌的传播载体或“特洛伊木马” | 第28页 |
| 5.4 细菌毒力增强 | 第28页 |
| 5.5 原生动物胞内细菌受到保护 | 第28-30页 |
| 参考文献 | 第30-38页 |
| 第二篇 试验研究 | 第38-94页 |
| 第三章 嗜水气单胞菌不同毒力菌株与四膜虫共培养过程中的相互作用 | 第38-52页 |
| 1 材料与方法 | 第39-41页 |
| 1.1 试验菌株、虫株、实验动物 | 第39页 |
| 1.2 培养基、试剂及仪器 | 第39-40页 |
| 1.3 嗜水气单胞菌对斑马鱼毒力测定 | 第40页 |
| 1.4 虫菌共培养对嗜水气单胞菌群体生长的影响 | 第40-41页 |
| 1.5 虫菌共培养对四膜虫群体生长的影响 | 第41页 |
| 1.6 细菌上清对四膜虫群体生长的影响 | 第41页 |
| 1.7 统计学分析 | 第41页 |
| 2 结果 | 第41-47页 |
| 2.1 嗜水气单胞菌LD_(50)测定 | 第41-42页 |
| 2.2 虫菌共培养对嗜水气单胞菌群体生长的影响 | 第42-45页 |
| 2.3 虫菌共培养对四膜虫群体生长的影响 | 第45-46页 |
| 2.4 细菌上清对四膜虫群体生长的影响 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 第四章 四膜虫捕食对嗜水气单胞菌不同毒力菌株虫体内存活的影响 | 第52-64页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| 1.1 试验菌株、虫株及其来源 | 第53页 |
| 1.2 培养基、试剂及仪器 | 第53-54页 |
| 1.3 绿色荧光蛋白标记嗜水气单胞菌 | 第54页 |
| 1.4 四膜虫与Ah~(GFP)共培养 | 第54-55页 |
| 1.5 四膜虫中细菌细胞活性检测 | 第55页 |
| 1.6 透射电镜观察 | 第55页 |
| 2 结果 | 第55-58页 |
| 2.1 绿色荧光蛋白标记嗜水气单胞菌 | 第55-56页 |
| 2.2 四膜虫捕食嗜水气单胞菌 | 第56-57页 |
| 2.3 细菌在四膜虫中的命运 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 第五章 SCOTS筛选嗜水气单胞菌暴露在四膜虫环境中的差异转录基因 | 第64-94页 |
| 1 材料与方法 | 第65-76页 |
| 1.1 试验菌株、虫株及其来源 | 第65页 |
| 1.2 工具酶和试剂 | 第65-66页 |
| 1.3 主要仪器 | 第66页 |
| 1.4 引物设计 | 第66-67页 |
| 1.5 嗜水气单胞菌NJ-35基因组DNA的提取 | 第67-68页 |
| 1.6 生物素标记嗜水气单胞菌NJ-35基因组 | 第68页 |
| 1.7 嗜水气单胞菌NJ-35 16S rDNA和23S rDNA的扩增 | 第68-69页 |
| 1.8 嗜水气单胞菌NJ-35 rDNA的扩增产物连接pMD19-T vector | 第69页 |
| 1.9 超声破碎生物素标记的NJ-35基因组DNA和rDNA重组质粒 | 第69页 |
| 1.10 四膜虫捕食嗜水气单胞菌NJ-35样品的采集 | 第69-70页 |
| 1.11 总RNA的提取 | 第70-71页 |
| 1.12 合成双链cDNA | 第71-72页 |
| 1.13 双扩增和回收链cDNA | 第72页 |
| 1.14 选择性捕获转录序列(SCOTS) | 第72-75页 |
| 1.15 PCR鉴定SCOTS克隆 | 第75页 |
| 1.16 斑点杂交筛选阳性克隆 | 第75-76页 |
| 1.17 阳性SCOTS克隆的测序和分析 | 第76页 |
| 1.18 实时定量PCR验证差异表达的基因 | 第76页 |
| 2 结果 | 第76-86页 |
| 2.1 嗜水气单胞菌NJ-35基因组的提取 | 第76-77页 |
| 2.2 嗜水气单胞菌NJ-35 rDNA的扩增及克隆载体的构建 | 第77页 |
| 2.3 嗜水气单胞菌NJ-35基因组DNA及rDNA重组质粒的破碎 | 第77-78页 |
| 2.4 双链cDNA的PCR扩增 | 第78-79页 |
| 2.5 SCOTS结果 | 第79-80页 |
| 2.6 差异转录基因的克隆 | 第80-81页 |
| 2.7 斑点杂交筛选 | 第81页 |
| 2.8 差异转录基因的Real-time RT-PCR验证 | 第81-82页 |
| 2.9 差异转录基因的分类和功能注释 | 第82-86页 |
| 3 讨论 | 第86-89页 |
| 参考文献 | 第89-94页 |
| 全文总结 | 第94-96页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
