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纤维堆囊菌So9733-1纤维素酶复合体的蛋白质组学分析与酶基因的克隆、表征

目录第1-8页
摘要第8-12页
Abstract第12-17页
缩略词表第17-20页
第一章 文献综述第20-45页
   ·粘细菌简介第20-23页
     ·粘细菌的分类及特征第20-21页
     ·纤维堆囊菌的基本性质第21-23页
   ·多糖类物质降解酶第23-39页
     ·纤维素酶简介第23-30页
     ·淀粉酶简介第30-33页
     ·木聚糖酶简介第33-35页
     ·多糖降解酶基因的克隆和表达第35-39页
   ·蛋白质组学研究第39-44页
     ·蛋白质组学的研究内容第39页
     ·蛋白质组学相关技术第39-44页
   ·本论文工作开展思路和研究内容第44-45页
第二章 纤维堆囊菌So9733-1纤维素酶复合体组成的蛋白质组解析第45-65页
   ·实验材料与试剂第45-49页
     ·菌株第45-46页
     ·培养基第46页
     ·仪器第46-47页
     ·试剂及溶液第47-49页
   ·实验方法第49-57页
     ·纤维素酶复合体样品制备第49-51页
     ·双向电泳第51-54页
     ·MALDI-TOF-MS检测第54-56页
     ·LC-MS/MS检测第56页
     ·鸟枪法蛋白质组分析第56-57页
   ·实验结果和分析第57-63页
     ·So9733-1纤维素酶复合体的双向凝胶电泳第57-60页
     ·纤维素酶复合体的MALDI-TOF-MS分析第60-61页
     ·纤维素酶复合体的LC-MS/MS分析第61-62页
     ·纤维素酶复合体的鸟枪法蛋白质组学分析第62-63页
   ·小结第63-65页
第三章 纤维堆囊菌So9733-1纤维素酶基因celA的克隆和表征第65-89页
   ·材料与方法第65-79页
     ·菌株和质粒第65-66页
     ·实验试剂和溶液配制第66-67页
     ·培养基和溶液第67页
     ·主要仪器设备第67-68页
     ·纤维堆囊菌So9733-1基因组DNA的提取第68-69页
     ·目的基因的核心序列的克隆第69-73页
     ·Tail-PCR方法克隆核心片断侧翼序列第73-74页
     ·目的基因的生物信息学分析第74-75页
     ·在大肠杆菌中表达目的基因第75-77页
     ·重组蛋白的纯化第77-78页
     ·重组蛋白的酶学性质表征第78-79页
   ·结果与讨论第79-87页
     ·纤维素酶基因celA的克隆第79-81页
     ·纤维素酶基因celA的生物信息学分析第81-82页
     ·纤维素酶CelA在大肠杆菌中的表达和纯化第82-85页
     ·纤维素酶CelA的酶学性质表征第85-87页
   ·小结第87-89页
第四章 纤维堆囊菌So9733-1淀粉酶基因amyA的克隆和表征第89-103页
   ·材料与方法第89-94页
     ·菌株和质粒第89页
     ·实验试剂和溶液配制第89-90页
     ·培养基和溶液第90页
     ·淀粉酶基因核心序列的克隆第90-91页
     ·Tail-PCR方法克隆核心片断侧翼序列第91页
     ·目的基因的生物信息学分析第91-92页
     ·在大肠杆菌中的表达目的基因第92-93页
     ·重组蛋白的纯化第93页
     ·重组蛋白的酶学性质表征第93-94页
   ·结果与讨论第94-101页
     ·淀粉酶基因的克隆第94-95页
     ·淀粉酶基因的生物信息学分析第95-97页
     ·AmyA蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化第97-99页
     ·淀粉酶AmyA的酶学性质表征第99-101页
   ·小结第101-103页
第五章 纤维堆囊菌So9733-1适冷木聚糖酶xynA的克隆和表征第103-126页
   ·材料与方法第103-111页
     ·菌株和质粒第103-104页
     ·实验试剂和溶液配制第104页
     ·培养基第104页
     ·主要仪器设备第104-105页
     ·Tail-PCR方法克隆适冷木聚糖酶基因xynA第105页
     ·适冷木聚糖酶基因xynA的生物信息学分析第105-106页
     ·在大肠杆菌中表达适冷木聚糖酶基因xynA第106-107页
     ·重组蛋白XynA的镍柱纯化第107页
     ·重组蛋白的酶学性质分析第107-109页
     ·重组蛋白XynA多克隆抗体的制备第109-110页
     ·免疫印迹第110-111页
   ·结果与讨论第111-125页
     ·适冷木聚糖酶基因xynA的克隆第111-112页
     ·适冷木聚糖酶基因xynA的生物信息学分析第112-115页
     ·适冷木聚糖酶基因xynA在大肠杆菌中的表达和纯化第115-117页
     ·适冷木聚糖酶XynA的酶学性质表征第117-123页
     ·木聚糖酶XynA的适冷机制的初步探讨第123页
     ·木聚糖酶XynA的多克隆抗体制备与免疫印迹检测第123-125页
   ·小结第125-126页
总结与展望第126-129页
附录第129-145页
参考文献第145-154页
致谢第154-155页
在读博士期间发表的论文第155-156页
学位论文评阅及答辩情况表第156页

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