目录 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-12页 |
Abstract | 第12-17页 |
缩略词表 | 第17-20页 |
第一章 文献综述 | 第20-45页 |
·粘细菌简介 | 第20-23页 |
·粘细菌的分类及特征 | 第20-21页 |
·纤维堆囊菌的基本性质 | 第21-23页 |
·多糖类物质降解酶 | 第23-39页 |
·纤维素酶简介 | 第23-30页 |
·淀粉酶简介 | 第30-33页 |
·木聚糖酶简介 | 第33-35页 |
·多糖降解酶基因的克隆和表达 | 第35-39页 |
·蛋白质组学研究 | 第39-44页 |
·蛋白质组学的研究内容 | 第39页 |
·蛋白质组学相关技术 | 第39-44页 |
·本论文工作开展思路和研究内容 | 第44-45页 |
第二章 纤维堆囊菌So9733-1纤维素酶复合体组成的蛋白质组解析 | 第45-65页 |
·实验材料与试剂 | 第45-49页 |
·菌株 | 第45-46页 |
·培养基 | 第46页 |
·仪器 | 第46-47页 |
·试剂及溶液 | 第47-49页 |
·实验方法 | 第49-57页 |
·纤维素酶复合体样品制备 | 第49-51页 |
·双向电泳 | 第51-54页 |
·MALDI-TOF-MS检测 | 第54-56页 |
·LC-MS/MS检测 | 第56页 |
·鸟枪法蛋白质组分析 | 第56-57页 |
·实验结果和分析 | 第57-63页 |
·So9733-1纤维素酶复合体的双向凝胶电泳 | 第57-60页 |
·纤维素酶复合体的MALDI-TOF-MS分析 | 第60-61页 |
·纤维素酶复合体的LC-MS/MS分析 | 第61-62页 |
·纤维素酶复合体的鸟枪法蛋白质组学分析 | 第62-63页 |
·小结 | 第63-65页 |
第三章 纤维堆囊菌So9733-1纤维素酶基因celA的克隆和表征 | 第65-89页 |
·材料与方法 | 第65-79页 |
·菌株和质粒 | 第65-66页 |
·实验试剂和溶液配制 | 第66-67页 |
·培养基和溶液 | 第67页 |
·主要仪器设备 | 第67-68页 |
·纤维堆囊菌So9733-1基因组DNA的提取 | 第68-69页 |
·目的基因的核心序列的克隆 | 第69-73页 |
·Tail-PCR方法克隆核心片断侧翼序列 | 第73-74页 |
·目的基因的生物信息学分析 | 第74-75页 |
·在大肠杆菌中表达目的基因 | 第75-77页 |
·重组蛋白的纯化 | 第77-78页 |
·重组蛋白的酶学性质表征 | 第78-79页 |
·结果与讨论 | 第79-87页 |
·纤维素酶基因celA的克隆 | 第79-81页 |
·纤维素酶基因celA的生物信息学分析 | 第81-82页 |
·纤维素酶CelA在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第82-85页 |
·纤维素酶CelA的酶学性质表征 | 第85-87页 |
·小结 | 第87-89页 |
第四章 纤维堆囊菌So9733-1淀粉酶基因amyA的克隆和表征 | 第89-103页 |
·材料与方法 | 第89-94页 |
·菌株和质粒 | 第89页 |
·实验试剂和溶液配制 | 第89-90页 |
·培养基和溶液 | 第90页 |
·淀粉酶基因核心序列的克隆 | 第90-91页 |
·Tail-PCR方法克隆核心片断侧翼序列 | 第91页 |
·目的基因的生物信息学分析 | 第91-92页 |
·在大肠杆菌中的表达目的基因 | 第92-93页 |
·重组蛋白的纯化 | 第93页 |
·重组蛋白的酶学性质表征 | 第93-94页 |
·结果与讨论 | 第94-101页 |
·淀粉酶基因的克隆 | 第94-95页 |
·淀粉酶基因的生物信息学分析 | 第95-97页 |
·AmyA蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第97-99页 |
·淀粉酶AmyA的酶学性质表征 | 第99-101页 |
·小结 | 第101-103页 |
第五章 纤维堆囊菌So9733-1适冷木聚糖酶xynA的克隆和表征 | 第103-126页 |
·材料与方法 | 第103-111页 |
·菌株和质粒 | 第103-104页 |
·实验试剂和溶液配制 | 第104页 |
·培养基 | 第104页 |
·主要仪器设备 | 第104-105页 |
·Tail-PCR方法克隆适冷木聚糖酶基因xynA | 第105页 |
·适冷木聚糖酶基因xynA的生物信息学分析 | 第105-106页 |
·在大肠杆菌中表达适冷木聚糖酶基因xynA | 第106-107页 |
·重组蛋白XynA的镍柱纯化 | 第107页 |
·重组蛋白的酶学性质分析 | 第107-109页 |
·重组蛋白XynA多克隆抗体的制备 | 第109-110页 |
·免疫印迹 | 第110-111页 |
·结果与讨论 | 第111-125页 |
·适冷木聚糖酶基因xynA的克隆 | 第111-112页 |
·适冷木聚糖酶基因xynA的生物信息学分析 | 第112-115页 |
·适冷木聚糖酶基因xynA在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第115-117页 |
·适冷木聚糖酶XynA的酶学性质表征 | 第117-123页 |
·木聚糖酶XynA的适冷机制的初步探讨 | 第123页 |
·木聚糖酶XynA的多克隆抗体制备与免疫印迹检测 | 第123-125页 |
·小结 | 第125-126页 |
总结与展望 | 第126-129页 |
附录 | 第129-145页 |
参考文献 | 第145-154页 |
致谢 | 第154-155页 |
在读博士期间发表的论文 | 第155-156页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第156页 |