摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词表 | 第8-13页 |
第一章 文献综述 卵母细胞减数分裂纺锤体组装机制的研究进展 | 第13-23页 |
1 卵母细胞减数分裂纺锤体微管起源 | 第13-17页 |
1.1 RanGTP途径 | 第14页 |
1.2 CPC途径 | 第14-15页 |
1.3 Augmin途径 | 第15-16页 |
1.4 其他成核途径 | 第16-17页 |
2 卵母细胞减数分裂纺锤体微管组装 | 第17-20页 |
2.1 纺锤体微管构成 | 第17页 |
2.2 纺锤体双极化 | 第17-19页 |
2.3 纺锤体极的形成 | 第19-20页 |
3 局部mRNA的翻译在纺锤体形成中的作用 | 第20-21页 |
4 展望 | 第21-23页 |
第二章 实验研究 Clathrin Heavy Chain1在绵羊卵母细胞减数分裂成熟及早期胚胎发育过程中的作用 | 第23-46页 |
1 引言 | 第23-24页 |
2 实验材料 | 第24-27页 |
2.1 实验动物 | 第24页 |
2.2 主要药品与试剂 | 第24-25页 |
2.3 抗体 | 第25页 |
2.4 主要仪器设备 | 第25-26页 |
2.5 主要实验耗材 | 第26-27页 |
3 实验方法 | 第27-33页 |
3.1 绵羊卵母细胞的采集 | 第27页 |
3.2 绵羊卵丘细胞的去除 | 第27页 |
3.3 绵羊卵母细胞的孤雌激活 | 第27-28页 |
3.4 早期胚胎的培养 | 第28页 |
3.5 药物处理 | 第28-29页 |
3.6 冷处理(cold treatment) | 第29页 |
3.7 CLTC morpholino(MO)显微注射 | 第29-30页 |
3.8 免疫荧光染色 | 第30页 |
3.9 免疫印迹(Western Blot) | 第30-31页 |
3.10 数据统计分析 | 第31-33页 |
4 结果 | 第33-43页 |
4.1 CLTC在绵羊卵母细胞减数分裂成熟和早期胚胎发育过程的表达与定位 | 第33-35页 |
4.1.1 CLTC在绵羊卵母细胞减数分裂成熟中的表达 | 第33页 |
4.1.2 CLTC在绵羊卵母细胞减数分裂成熟中的定位 | 第33-34页 |
4.1.3 CLTC在绵羊早期胚胎发育过程中的表达定位 | 第34-35页 |
4.2 使用药物破坏纺锤体结构后CLTC的定位和表达 | 第35-37页 |
4.2.1 Nocodazole处理绵羊卵母细胞后对CLTC亚细胞定位和表达量的影响 | 第35-36页 |
4.2.2 Taxol处理绵羊卵母细胞后对CLTC亚细胞定位和表达量的影响 | 第36-37页 |
4.3 冷处理后和恢复后CLTC的表达和定位 | 第37-39页 |
4.4 CLTC的敲减对绵羊卵母细胞减数分裂的影响 | 第39-42页 |
4.4.1 CLTC MO的敲减效率验证 | 第39-40页 |
4.4.2 CLTC MO敲减干扰了绵羊卵母细胞成熟 | 第40页 |
4.4.3 CLTC MO敲减后导致卵母细胞纺锤体组装和染色体排列异常 | 第40-42页 |
4.5 CLTC MO敲减干扰了绵羊早期胚胎发育 | 第42-43页 |
5 讨论 | 第43-45页 |
6 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-59页 |
附录 | 第59-65页 |
致谢 | 第65-67页 |