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青鳉(Oryzias latipes)类胰岛素生长因子Ⅰ型受体(igf1ra & igf1rb)的克隆和表达研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 引言第11-18页
    1.类胰岛素生长因子概述第11页
    2.类胰岛素生长因子信号系统的组成第11-14页
        2.1 类胰岛素生长因子配体第11-12页
        2.2 类胰岛素生长因子受体第12-13页
        2.3 类胰岛素生长因子结合蛋白第13-14页
    3.类胰岛素生长因子信号系统的作用第14-15页
        3.1 类胰岛素生长因子系统与机体生长发育第14页
        3.2 类胰岛素生长因子系统与临床疾病第14-15页
        3.3 类胰岛素生长因子系统与生殖发育第15页
    4.类胰岛素生长因子系统在鱼类中的研究现状第15-16页
    5.研究目的和意义第16-18页
第二章 材料和方法第18-32页
    1.实验材料第18-19页
        1.1 实验动物第18页
        1.2 实验试剂第18-19页
        1.3 实验仪器第19页
    2.实验方法第19-32页
        2.1 总RNA的抽提第19-20页
        2.2 RNA质量检测第20页
        2.3 RNA反转录为cDNA第20-21页
        2.4 引物设计第21-22页
        2.5 RT-PCR扩增第22-23页
        2.6 PCR扩增青鳉igf1ra和igf1rb全长序列第23页
        2.7 PCR产物回收第23-24页
        2.8 PCR产物连接第24页
        2.9 感受态细胞的制备第24页
        2.10 转化第24-25页
        2.11 质粒小量抽提第25页
        2.12 酶切验证第25-26页
        2.13 序列比对、系统发育和染色体位置分析第26页
        2.14 原位杂交第26-31页
        2.15 显微镜观察第31-32页
第三章 结果第32-46页
    1.青鳉igf1ra和igf1rb基因克隆第32-35页
        1.1 RNA提取质量检测第32页
        1.2 Igf1ra和igf1rb基因编码区的鉴定第32-35页
    2.青鳉igf1ra和igf1rb序列分析第35-38页
        2.1 多序列比对分析第35页
        2.2 同源性分析第35页
        2.3 系统发育分析第35页
        2.4 染色体线性关系分析第35-38页
    3.青鳉igf1r mRNA的表达第38-46页
        3.1 RT-PCR分析igf1r mRNA在青鳉成鱼组织和胚胎中的表达第38页
        3.2 化学原位杂交检测igf1r mRNA在青鳉性腺中的时空表达第38-40页
        3.3 荧光双色原位杂交检测igf1r mRNA在青鳉卵巢中的亚细胞定位第40页
        3.4 荧光双色原位杂交检测igf1r mRNA在青鳉精巢中的亚细胞定位第40-44页
        3.5 整体胚胎化学原位杂交检测igf1r mRNA在青鳉胚胎中的时空表达第44-46页
第四章 讨论第46-51页
    1.青鳉igf1ra和igf1rb序列分析第46-47页
    2.青鳉igf1ra和igf1rb表达分析第47-51页
        2.1 RT-PCR分析第47-48页
        2.2 Igf1r mRNA在青鳉卵巢中的时空表达分析第48-49页
        2.3 Igf1r mRNA在青鳉精巢中的时空表达分析第49-50页
        2.4 Igf1r mRNA在青鳉胚胎中的时空表达分析第50-51页
第五章 结论与展望第51-53页
参考文献第53-60页
附录第60-62页
硕士期间发表的文章第62-63页
致谢第63页

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