摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第11-18页 |
1.类胰岛素生长因子概述 | 第11页 |
2.类胰岛素生长因子信号系统的组成 | 第11-14页 |
2.1 类胰岛素生长因子配体 | 第11-12页 |
2.2 类胰岛素生长因子受体 | 第12-13页 |
2.3 类胰岛素生长因子结合蛋白 | 第13-14页 |
3.类胰岛素生长因子信号系统的作用 | 第14-15页 |
3.1 类胰岛素生长因子系统与机体生长发育 | 第14页 |
3.2 类胰岛素生长因子系统与临床疾病 | 第14-15页 |
3.3 类胰岛素生长因子系统与生殖发育 | 第15页 |
4.类胰岛素生长因子系统在鱼类中的研究现状 | 第15-16页 |
5.研究目的和意义 | 第16-18页 |
第二章 材料和方法 | 第18-32页 |
1.实验材料 | 第18-19页 |
1.1 实验动物 | 第18页 |
1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
1.3 实验仪器 | 第19页 |
2.实验方法 | 第19-32页 |
2.1 总RNA的抽提 | 第19-20页 |
2.2 RNA质量检测 | 第20页 |
2.3 RNA反转录为cDNA | 第20-21页 |
2.4 引物设计 | 第21-22页 |
2.5 RT-PCR扩增 | 第22-23页 |
2.6 PCR扩增青鳉igf1ra和igf1rb全长序列 | 第23页 |
2.7 PCR产物回收 | 第23-24页 |
2.8 PCR产物连接 | 第24页 |
2.9 感受态细胞的制备 | 第24页 |
2.10 转化 | 第24-25页 |
2.11 质粒小量抽提 | 第25页 |
2.12 酶切验证 | 第25-26页 |
2.13 序列比对、系统发育和染色体位置分析 | 第26页 |
2.14 原位杂交 | 第26-31页 |
2.15 显微镜观察 | 第31-32页 |
第三章 结果 | 第32-46页 |
1.青鳉igf1ra和igf1rb基因克隆 | 第32-35页 |
1.1 RNA提取质量检测 | 第32页 |
1.2 Igf1ra和igf1rb基因编码区的鉴定 | 第32-35页 |
2.青鳉igf1ra和igf1rb序列分析 | 第35-38页 |
2.1 多序列比对分析 | 第35页 |
2.2 同源性分析 | 第35页 |
2.3 系统发育分析 | 第35页 |
2.4 染色体线性关系分析 | 第35-38页 |
3.青鳉igf1r mRNA的表达 | 第38-46页 |
3.1 RT-PCR分析igf1r mRNA在青鳉成鱼组织和胚胎中的表达 | 第38页 |
3.2 化学原位杂交检测igf1r mRNA在青鳉性腺中的时空表达 | 第38-40页 |
3.3 荧光双色原位杂交检测igf1r mRNA在青鳉卵巢中的亚细胞定位 | 第40页 |
3.4 荧光双色原位杂交检测igf1r mRNA在青鳉精巢中的亚细胞定位 | 第40-44页 |
3.5 整体胚胎化学原位杂交检测igf1r mRNA在青鳉胚胎中的时空表达 | 第44-46页 |
第四章 讨论 | 第46-51页 |
1.青鳉igf1ra和igf1rb序列分析 | 第46-47页 |
2.青鳉igf1ra和igf1rb表达分析 | 第47-51页 |
2.1 RT-PCR分析 | 第47-48页 |
2.2 Igf1r mRNA在青鳉卵巢中的时空表达分析 | 第48-49页 |
2.3 Igf1r mRNA在青鳉精巢中的时空表达分析 | 第49-50页 |
2.4 Igf1r mRNA在青鳉胚胎中的时空表达分析 | 第50-51页 |
第五章 结论与展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
附录 | 第60-62页 |
硕士期间发表的文章 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |