| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略词表 | 第5-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-17页 |
| 1.1 草莓转基因研究进展 | 第8-11页 |
| 1.1.1 草莓遗传转化体系的建立 | 第8-9页 |
| 1.1.2 影响草莓遗传转化的主要因素 | 第9-10页 |
| 1.1.3 草莓转基因目前存在的问题 | 第10-11页 |
| 1.2 病毒诱导基因沉默体系 | 第11-14页 |
| 1.2.1 病毒诱导基因沉默研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.2 VIGS的机理 | 第12-13页 |
| 1.2.3 烟草脆裂病毒载体TRV | 第13页 |
| 1.2.4 VIGS的优缺点 | 第13-14页 |
| 1.3 脱落酸受体PYR1基因的研究进展 | 第14-17页 |
| 第二章 草莓脱落酸受体PYR1基因克隆及植物表达载体的构建 | 第17-30页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.2.2 菌株与质粒 | 第17页 |
| 2.2.3 酶及试剂 | 第17页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第17-18页 |
| 2.2.5 化学试剂及实验溶液配制 | 第18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-24页 |
| 2.3.1 FaPYR1基因克隆 | 第18-22页 |
| 2.3.2 FaPYR1基因反义植物表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 2.3.3 病毒介导的基因沉默载体的构建 | 第23页 |
| 2.3.4 农杆菌转化 | 第23-24页 |
| 2.4 结果与分析 | 第24-30页 |
| 2.4.1 草莓叶片总RNA提取 | 第24页 |
| 2.4.2 草莓中PYR1基因克隆与序列分析 | 第24-26页 |
| 2.4.3 pCAMBIA1304-FaPYR1反义植物表达载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.4.4 病毒载体pTRV2-FaPYR1构建 | 第28-30页 |
| 第三章 根癌农杆菌介导的草莓遗传转化体系的研究 | 第30-36页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 材料与试剂 | 第30-31页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第30页 |
| 3.2.2 供试菌株 | 第30页 |
| 3.2.3 培养基以及培养条件 | 第30-31页 |
| 3.2.4 GUS检测液配制 | 第31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-32页 |
| 3.3.1 外植体的选择 | 第31页 |
| 3.3.2 卡那霉素筛选浓度的确定 | 第31页 |
| 3.3.3 抑菌抗生素浓度的选择 | 第31页 |
| 3.3.4 菌液的制备 | 第31页 |
| 3.3.5 菌液浓度、侵染时间、共培养时间的优化选择 | 第31-32页 |
| 3.3.6 GUS瞬间表达鉴定 | 第32页 |
| 3.3.7 草莓的遗传转化步骤 | 第32页 |
| 3.4 结果与分析 | 第32-35页 |
| 3.4.1 卡那霉素浓度对草莓转化的影响 | 第32-33页 |
| 3.4.2 抗生素浓度对草莓转化的影响 | 第33页 |
| 3.4.3 菌液浓度、侵染时间、共培养时间的选择 | 第33-35页 |
| 3.5 讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 FaPYR1基因在草莓果实成熟中的作用 | 第36-52页 |
| 4.1 引言 | 第36页 |
| 4.2 材料与试剂 | 第36-39页 |
| 4.2.1 植物材料 | 第36-37页 |
| 4.2.2 菌株与质粒 | 第37页 |
| 4.2.3 酶及试剂 | 第37页 |
| 4.2.4 实验仪器 | 第37页 |
| 4.2.5 化学试剂及实验溶液配制 | 第37-39页 |
| 4.3 实验方法 | 第39-45页 |
| 4.3.1 草莓果实七个时期及不同组织RNA的提取 | 第39页 |
| 4.3.2 草莓叶片中基因组DNA的提取 | 第39页 |
| 4.3.3 Southern杂交方法 | 第39-42页 |
| 4.3.4 常用蛋白实验方法(参考蛋白手册) | 第42-43页 |
| 4.3.5 病毒诱导基因沉默在草莓果实中的应用 | 第43-44页 |
| 4.3.6 草莓果实PYR1基因沉默分析 | 第44-45页 |
| 4.4 实验结果 | 第45-51页 |
| 4.4.1 草莓果实七个时期及不同组织RNA的提取 | 第45页 |
| 4.4.2 FaPYR1基因在草莓中的拷贝数的分析 | 第45-46页 |
| 4.4.3 草莓各个组织FaPYR1基因表达量分析 | 第46-47页 |
| 4.4.4 草莓果实7个时期FaPYR1基因表达量分析 | 第47页 |
| 4.4.5 侵染方法的建立 | 第47页 |
| 4.4.6 病毒诱导草莓果实FaPYR1基因沉默表型分析 | 第47-48页 |
| 4.4.7 病毒的分子检测 | 第48页 |
| 4.4.8 RNA干扰后FaPYR1基因荧光定量RT-PCR | 第48-49页 |
| 4.4.9 RNA干扰后FaPYR1基因半定量RT-PCR | 第49-50页 |
| 4.4.10 RNA干扰后FaPYR1基因蛋白水平检测 | 第50页 |
| 4.4.11 RNA干扰后FaPYR1基因下游信号基因表达量分析 | 第50-51页 |
| 4.5 讨论 | 第51-52页 |
| 第五章 全文总论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简历 | 第59页 |
| 硕士期间发表学术论文 | 第59页 |
