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转糖基活性β-半乳糖苷酶产生菌株筛选、克隆表达及酶学性质研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1 引言第8-14页
   ·β-半乳糖苷酶第8-10页
     ·β-半乳糖苷酶的来源及性质第8-9页
     ·β-半乳糖苷酶的作用机制第9-10页
     ·β-半乳糖苷酶基因的克隆表达第10页
     ·β-半乳糖苷酶的应用第10页
   ·功能性低聚糖第10-12页
     ·乳果糖第11页
     ·低聚半乳糖第11-12页
   ·肺炎克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae第12-13页
   ·立题背景及意义第13页
   ·课题主要研究内容第13-14页
2 材料与方法第14-21页
   ·实验材料第14-15页
   ·实验方法第15-21页
3 结果与讨论第21-36页
   ·菌株筛选鉴定、产酶条件优化及酶法合成低聚糖第21-26页
     ·菌株筛选第21页
     ·菌种鉴定第21-23页
     ·K.pneumoniae 285发酵产酶条件的优化第23-25页
     ·K.pneumoniae 285 β-半乳糖苷酶催化生成低聚糖第25-26页
   ·β-半乳糖苷酶基因克隆表达及诱导条件优化第26-29页
     ·bgaB、LacZ基因的PCR扩增第26-27页
     ·bgaB、LacZ基因的克隆第27页
     ·bgaB、LacZ基因的表达第27-28页
     ·重组表达菌株诱导条件的优化第28-29页
   ·重组蛋白分离纯化、酶学性质研究及催化生成低聚糖第29-36页
     ·带(His)_6标签重组酶的金属镍螯合琼脂糖凝胶层析分离第29-30页
     ·蛋白质含量测定第30页
     ·重组酶酶学性质研究第30-33页
     ·动力学参数K_m和V_(max)的测定第33-34页
     ·重组β-半乳糖苷酶催化生成低聚糖第34-36页
4 主要结论第36-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-43页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第43页

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