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高产葡萄糖氧化酶分泌型基因工程菌的构建

学位论文数据集第3-4页
摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 绪论第12-24页
    1.1 葡萄糖氧化酶第12-15页
        1.1.1 葡萄糖氧化酶的结构第12-13页
        1.1.2 葡萄糖氧化酶的性质第13页
        1.1.3 葡萄糖氧化酶组分含量第13-14页
        1.1.4 离子对酶活的影响第14页
        1.1.5 酶活性的测定第14-15页
        1.1.6 葡萄糖氧化酶应用第15页
    1.2 发酵菌株的选定第15-19页
        1.2.1 毕赤酵母宿主菌株的遗传稳定性第16-17页
        1.2.2 分泌蛋白的翻译后修饰第17-18页
        1.2.3 毕赤酵母宿主菌株的表达策略第18页
        1.2.4 蛋白的表达过程的应激反应第18-19页
    1.3 发酵条件对菌体的影响第19-22页
        1.3.1 碳源第19-20页
        1.3.2 氮源第20-21页
        1.3.3 溶氧的影响第21页
        1.3.4 pH值对生产发酵的影响第21-22页
    1.4 本课题研究的目的和意义第22-24页
第二章 菌株的构建第24-54页
    2.1 实验操作方法试剂盒及菌株第24-35页
    2.2 构建强转运因子工程菌第35-39页
        2.2.1 载体质粒的构建第36-37页
        2.2.2 菌株的结果与分析第37-39页
    2.3 构建强转录折叠工程菌第39-46页
        2.3.1 载体质粒的构建第39-40页
        2.3.2 菌株结果与分析第40-46页
    2.4 基因调控因子工程菌的构建第46-52页
        2.4.1 载体质粒的构建第46-47页
        2.4.2 菌株结果与分析第47-52页
    2.5 本章小结第52-54页
第三章 菌株发酵过程的优化第54-66页
    3.1 盐离子的影响第55-60页
        3.1.1 对照菌在低盐离子浓度的3L发酵结果第55-57页
        3.1.2 菌株BIP和13第57-58页
        3.1.3 菌株HAG1和13第58-60页
    3.2 溶氧的影响第60-64页
        3.2.1 pGAPZB-HAC1-vgb克隆载体构建第60页
        3.2.2 表达了vgb蛋白的摇瓶数据分析第60-62页
        3.2.3 表达了vgb蛋白的qPCR数据分析第62-63页
        3.2.4 表达了vgb蛋白的3L发酵数据分析第63-64页
    3.3 本章小结第64-66页
第四章 密码子优化不同来源基因的表达第66-72页
    4.1 不同来源基因菌株的构建第66页
    4.2 不同基因菌株的筛选第66-71页
        4.2.1 不同基因菌株的摇瓶发酵数据第67-68页
        4.2.2 不同基因的菌株转录量的分析第68页
        4.2.3 不同基因菌株3L发酵数据第68-70页
        4.2.4 不同基因表达蛋白含量的测定第70页
        4.2.5 不同蛋白酶对温度和pH稳定性对比第70-71页
    4.3 本章小结第71-72页
第五章 结论与展望第72-74页
参考文献第74-78页
致谢第78-80页
作者和导师简介第80-82页
附录第82-83页

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