致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
1 综述 | 第10-17页 |
1.1 食道组织结构 | 第10页 |
1.2 Wnt信号通路 | 第10-12页 |
1.3 食道上皮的发育 | 第12-13页 |
1.4 食道干细胞 | 第13-17页 |
1.4.1 食道上皮干细胞研究的临床意义 | 第13-14页 |
1.4.2 食道上皮干细胞研究的理论意义 | 第14-17页 |
2 实验内容与设计 | 第17-20页 |
2.1 实验的目的与意义 | 第17页 |
2.2 实验内容 | 第17-19页 |
2.2.1 实验思路 | 第17-18页 |
2.2.2 具体实验设计 | 第18-19页 |
2.3 实验流程图 | 第19-20页 |
3 实验试剂和方法 | 第20-30页 |
3.1 实验小鼠的制备原理与基因型鉴定 | 第20-23页 |
3.2 组织材料处理 | 第23-25页 |
3.2.1 石蜡切片组织处理 | 第23页 |
3.2.2 冰冻切片组织处理 | 第23页 |
3.2.3 总RNA的提取和cDNA的制备 | 第23-24页 |
3.2.4 构建RNA原位杂交探针 | 第24-25页 |
3.3 实验方法 | 第25-30页 |
3.3.1 原位杂交实验 | 第25-27页 |
3.3.2 免疫荧光实验 | 第27页 |
3.3.3 苏木精-伊红染色 | 第27-28页 |
3.3.4 X-gal染色 | 第28-29页 |
3.3.5 流式分选 | 第29页 |
3.3.6 干细胞诱导培养Organoid | 第29-30页 |
4 实验结果 | 第30-42页 |
4.1 Axin2/Lgr5在多个组织器官中可作为标记成体干细胞的Marker | 第30-31页 |
4.2 Wnt/β-catenin信号通路在食道黏膜上皮中的激活表达 | 第31-33页 |
4.3 在胚胎期和成体食道上皮Wnt/β-catenin信号通路的表达特征 | 第33-34页 |
4.4 谱系示踪实验表明Axin2+细胞维持并具有食道干细胞潜能 | 第34-36页 |
4.5 通过体外诱导培养类器官表明Axin2+细胞具有干细胞潜能 | 第36-38页 |
4.6 食道上皮基底层中存在干细胞/祖细胞 | 第38-39页 |
4.7 食道组织和食道类器官在结构和表达特征方面的对比 | 第39-40页 |
4.8 体外传代培养验证Axin2+细胞具有干细胞特征 | 第40-41页 |
4.9 食道基底层中的Axin2+细胞需要β-catenin来维持组织稳态 | 第41-42页 |
5 实验结论与讨论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-45页 |