致谢 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
缩略词表 | 第12-16页 |
1 前言 | 第16-20页 |
2 实验材料与方法 | 第20-32页 |
2.1 实验材料 | 第20-23页 |
2.1.1 实验动物 | 第20页 |
2.1.2 细胞株、菌株及质粒 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
2.1.4 主要仪器 | 第20-21页 |
2.1.5 主要溶液及其配制 | 第21页 |
2.1.6 实验所用引物的稀释 | 第21-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-32页 |
2.2.1 RAW264.7小鼠巨噬细胞的复苏、培养及冻存 | 第23页 |
2.2.2 小鼠腹腔原代巨噬细胞的提取及培养 | 第23-24页 |
2.2.3 金黄色葡萄球菌(USA300)的制备 | 第24页 |
2.2.4 细胞转染 | 第24-25页 |
2.2.5 细胞总RNA的提取、反转录及实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
2.2.6 蛋白提取、定量及WesternBlot | 第26-27页 |
2.2.7 上清液细胞因子的测定 | 第27页 |
2.2.8 流式检测巨噬细胞的吞噬作用 | 第27-28页 |
2.2.9 巨噬细胞的杀伤作用 | 第28-29页 |
2.2.10 细胞免疫荧光 | 第29-30页 |
2.2.11 吖啶橙(AO)染色 | 第30页 |
2.2.12 小鼠急性肺炎模型的建立 | 第30页 |
2.2.13 鼠肺灌洗液的提取 | 第30-31页 |
2.2.14 小鼠肺组织RNA提取,蛋白提取及HE染色 | 第31页 |
2.2.15 统计学分析 | 第31-32页 |
3 实验结果 | 第32-57页 |
3.1 金黄色葡萄球菌(USA300)诱导巨噬细胞中HBXIP的产生 | 第32-33页 |
3.2 HBXIP能够减轻USA300诱导的小鼠体内的炎症反应 | 第33-35页 |
3.3 HBXIP抑制USA300诱导的巨噬细胞的炎症反应 | 第35-40页 |
3.3.1 HBXIP过表达及敲减质粒的功能鉴定 | 第35-37页 |
3.3.2 HBXIP抑制巨噬细胞炎症因子的表达 | 第37-39页 |
3.3.3 HBXIP对巨噬细胞中炎症相关信号通路的影响 | 第39-40页 |
3.4 HBXIP对巨噬细胞的生物学功能的影响 | 第40-44页 |
3.5 HBXIP对细胞自噬的调控 | 第44-52页 |
3.5.1 HBXIP对mTOR信号通路的影响 | 第44-45页 |
3.5.2 HBXIP促进自噬相关基因的表达 | 第45-46页 |
3.5.3 HBXIP促进自噬泡的形成 | 第46-49页 |
3.5.4 HBXIP提高了溶酶体生物学活性 | 第49-52页 |
3.6 HBXIP抑制TFEB磷酸化,促进TFEB入核 | 第52-53页 |
3.7 自噬有助于增强机体的抗菌免疫能力,降低机体炎症反应 | 第53-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
作者简介 | 第63页 |