| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-22页 |
| 1.1 棉花的概述 | 第10-11页 |
| 1.1.1 棉花的生产 | 第10页 |
| 1.1.2 转基因抗虫棉的发展 | 第10-11页 |
| 1.2 基因工程技术在植物中的应用 | 第11-14页 |
| 1.3 烟粉虱的概述 | 第14-16页 |
| 1.3.1 烟粉虱的特征 | 第14-15页 |
| 1.3.2 烟粉虱侵染下植物抗虫机制的研究 | 第15-16页 |
| 1.4 基因背景 | 第16-21页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株材料 | 第22页 |
| 2.1.3 载体材料 | 第22-24页 |
| 2.1.4 基因来源 | 第24页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-38页 |
| 2.2.1 九个棉花内源基因RNAi干涉载体的构建 | 第24-27页 |
| 2.2.2 基因的超表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.3 Crispr—cas9载体构建 | 第28-30页 |
| 2.2.4 利用农杆菌的遗传转化 | 第30页 |
| 2.2.5 转基因株系的阳性检测 | 第30-31页 |
| 2.2.6 Southernblotting检测 | 第31-34页 |
| 2.2.7 RNA的提取(传统方法) | 第34-35页 |
| 2.2.8 RNA反转录 | 第35-36页 |
| 2.2.9 RT-PCR | 第36页 |
| 2.2.10 Real-timePCR | 第36-37页 |
| 2.2.11 田间抗虫鉴定试验设计 | 第37页 |
| 2.2.12 烟粉虱诱导表达模式 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-55页 |
| 3.1 烟粉虱诱导表达模式 | 第38-39页 |
| 3.2 T0代转基因植株的获得及分子检测 | 第39-46页 |
| 3.2.1 RNAi载体构建的阳性检测 | 第39-40页 |
| 3.2.2 超表达载体构建的阳性鉴定 | 第40页 |
| 3.2.3 利用农杆菌介导的遗传转化创造转基因棉花 | 第40-42页 |
| 3.2.4 干涉材料的阳性检测 | 第42-44页 |
| 3.2.5 转基因株系的Southern检测 | 第44-46页 |
| 3.3 T1代转基因株系的田间性状调查 | 第46-54页 |
| 3.3.1 田间材料的种植及管理 | 第46-48页 |
| 3.3.2 转基因植株中表达量的检测 | 第48-50页 |
| 3.3.3 转基因株系的Southern检测 | 第50-52页 |
| 3.3.4 田间数据统计及抗虫性状综合分析 | 第52-54页 |
| 3.4 出现的问题及初步探索 | 第54-55页 |
| 4讨论 | 第55-57页 |
| 4.1 创造了能够稳定遗传的转基因材料 | 第55页 |
| 4.2 对转基因株系进行初步抗虫鉴定 | 第55-56页 |
| 4.3 实验的不足与待改进方向 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |