英文缩略语表 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
第一部分 蛋白磷酸酶1及其DNA甲基化在低氧预适应神经细胞NG108-15中的变化情况 | 第10-31页 |
1 前言 | 第10-14页 |
1.1 低氧现象 | 第10-11页 |
1.2 低氧预适应 | 第11-12页 |
1.3 DNA甲基化 | 第12-13页 |
1.4 蛋白磷酸酶1 | 第13页 |
1.5 NG108-15细胞 | 第13-14页 |
2 试验材料与方法 | 第14-20页 |
2.1 试验材料 | 第14页 |
2.2 试验方法 | 第14-20页 |
2.2.1 试剂的配制 | 第14-16页 |
2.2.2 细胞培养及5-aza-cdR的配制 | 第16页 |
2.2.3 5-aza-cdR和低氧处理NG108-15细胞 | 第16-17页 |
2.2.4 RTCA测定细胞的增殖 | 第17页 |
2.2.5 NG108-15细胞流式测定凋亡和周期 | 第17页 |
2.2.6 TRIzol法抽提细胞中的RNA | 第17-18页 |
2.2.7 RNA逆转录生成cDNA | 第18页 |
2.2.8 Real-timePCR检测PP1γ的转录水平 | 第18页 |
2.2.9 蛋白印迹(Western-blot) | 第18-20页 |
2.2.10 荧光素酶报告基因检测 | 第20页 |
2.2.11 统计学处理 | 第20页 |
3 试验结果与分析 | 第20-28页 |
3.1 低氧和5-aza-cdR影响细胞的形态变化 | 第20-21页 |
3.2 RTCA(实时定量细胞动态增殖检测)测定细胞增殖 | 第21-23页 |
3.3 细胞在不同处理组中的凋亡变化情况 | 第23-25页 |
3.4 细胞在不同处理组中的周期变化情况 | 第25-26页 |
3.5 细胞在不同处理组中的DNMTs和PP1γ的变化情况 | 第26页 |
3.6 细胞在不同处理组中的PP1γ蛋白质情况 | 第26-27页 |
3.7 5-aza-cdR抑制NG108-15细胞中PP1γ的转录活性 | 第27-28页 |
4 讨论 | 第28-30页 |
5 小结 | 第30-31页 |
第二部分 蛋白磷酸酶1及其DNA甲基化在低氧预适应小鼠中的变化情况 | 第31-46页 |
1 试剂与方法 | 第31-35页 |
1.1 试剂材料 | 第31-32页 |
1.2 试验方法 | 第32-35页 |
1.2.1 小鼠大脑立体定位注射5-aza-cdR | 第32页 |
1.2.2 小鼠低氧处理 | 第32-33页 |
1.2.3 定量PCR(Real-timePCR) | 第33-35页 |
1.2.4 Western-blot测定蛋白质表达水平 | 第35页 |
2 试验结果与分析 | 第35-43页 |
2.1 Real-timePCR检测DNMT1mRNA水平 | 第35-36页 |
2.2 Real-timePCR检测DNMT3AmRNA水平 | 第36-37页 |
2.3 Real-timePCR检测DNMT3BmRNA水平 | 第37-39页 |
2.4 Real-timePCR检测PP1γmRNA水平 | 第39-40页 |
2.5 Western-blot检测PP1γ在低氧处理小鼠海马中的蛋白质变化 | 第40-43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
4 小结 | 第45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
综述 | 第50-57页 |
参考文献 | 第55-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |