| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 SOCS1/2在动物免疫调控和疫病发生中的作用研究进展 | 第11-17页 |
| 1.1 热应激诱发免疫抑制严重危害我国养猪业安全 | 第11-12页 |
| 1.1.1 热应激 | 第11页 |
| 1.1.2 热应激诱发免疫抑制作用机理 | 第11-12页 |
| 1.2 SOCS1/2的免疫调控机制 | 第12-15页 |
| 1.2.1 SOCS家族 | 第12-13页 |
| 1.2.2 SOCS1的免疫调控机制 | 第13-14页 |
| 1.2.3 SOCS2的免疫调控机制 | 第14-15页 |
| 1.3 HSP70的分子功能 | 第15-16页 |
| 1.4 研究意义与展望 | 第16-17页 |
| 2 猪SOCS1基因的克隆、生物信息学分析及热应激条件下的表达 | 第17-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 材料 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-20页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第18页 |
| 2.2.2 RNA的质量鉴定 | 第18页 |
| 2.2.3 第一链的合成 | 第18页 |
| 2.2.4 猪SOCS1基因cDNA的克隆 | 第18-20页 |
| 2.2.5 猪SOCS1基因cDNA序列的分析 | 第20页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR反应 | 第20页 |
| 2.2.7 数据统计分析 | 第20页 |
| 2.3 结果和分析 | 第20-25页 |
| 2.3.1 RNA结果检测 | 第20页 |
| 2.3.2 SOCS1基因的克隆 | 第20-21页 |
| 2.3.3 SOCS1同源性比对 | 第21-22页 |
| 2.3.4 SOCS1基因生物信息学分析 | 第22-24页 |
| 2.3.5 热应激条件下SOCS1mRNA的表达范型 | 第24-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-26页 |
| 2.5 小结 | 第26-27页 |
| 3 猪SOCS2基因的克隆、生物信息学分析及热应激条件下的表达 | 第27-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 总RNA的提取 | 第27页 |
| 3.2.2 RNA的质量鉴定 | 第27页 |
| 3.2.3 第一链的合成 | 第27页 |
| 3.2.4 猪SOCS2基因cDNA的克隆 | 第27-28页 |
| 3.2.5 猪SOCS2基因cDNA序列的分析 | 第28页 |
| 3.2.6 荧光定量PCR反应 | 第28页 |
| 3.2.7 数据统计分析 | 第28-29页 |
| 3.3 结果和分析 | 第29-34页 |
| 3.3.1 RNA结果检测 | 第29页 |
| 3.3.2 SOCS2基因的克隆 | 第29页 |
| 3.3.3 SOCS2同源性比对 | 第29-31页 |
| 3.3.4 SOCS2基因生物信息学分析 | 第31-33页 |
| 3.3.5 热应激条件下SOCS2mRNA的表达范型 | 第33-34页 |
| 3.4 讨论 | 第34-35页 |
| 3.5 小结 | 第35-36页 |
| 4 SOCS1调控热应激猪巨噬细胞NF-κB活性的分子机制 | 第36-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第36页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第36-37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-42页 |
| 4.2.1 真核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 4.2.2 SOCS1基因敲除模型建立 | 第38页 |
| 4.2.3 试验设计 | 第38页 |
| 4.2.4 瞬时转染 | 第38-39页 |
| 4.2.5 荧光定量PCR | 第39-41页 |
| 4.2.6 WesternBlot | 第41页 |
| 4.2.7 双荧光报告分析 | 第41-42页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第42-51页 |
| 4.3.1 猪SOCS1/HSP70在293T细胞和CRL-2845细胞中的表达 | 第42-45页 |
| 4.3.2 SOCS1和HSP70共转染对NF-κB活性的影响 | 第45-48页 |
| 4.3.3 SOCS1基因敲除对NF-κB活性的影响 | 第48-49页 |
| 4.3.4 SOCS1经降解Mal而抑制HSP70诱导的NF-κB活化 | 第49-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-52页 |
| 4.5 小结 | 第52-53页 |
| 5 SOCS2调控热应激猪巨噬细胞NF-κB活性的分子机制 | 第53-60页 |
| 5.1 实验材料 | 第53页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第53页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第53页 |
| 5.2 实验方法 | 第53-54页 |
| 5.2.1 真核表达载体的构建 | 第53页 |
| 5.2.2 SOCS2基因敲除模型建立 | 第53-54页 |
| 5.2.3 试验设计 | 第54页 |
| 5.2.4 瞬时转染 | 第54页 |
| 5.2.5 荧光定量PCR | 第54页 |
| 5.2.6 WesternBlot | 第54页 |
| 5.2.7 双荧光报告分析 | 第54页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第54-59页 |
| 5.3.1 SOCS2/HSP70在CRL-2845细胞中的真核表达 | 第54-55页 |
| 5.3.2 SOCS2和HSP70共转染对NF-κB活性的影响 | 第55-57页 |
| 5.3.3 SOCS2基因敲除对NF-κB活性的影响 | 第57-58页 |
| 5.3.4 SOCS2经降解Mal而抑制NF-κB活性 | 第58-59页 |
| 5.4 讨论 | 第59页 |
| 5.5 小结 | 第59-60页 |
| 6 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72-73页 |
| 导师简介 | 第73页 |
