| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩写表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-27页 |
| 1.1 β-葡萄糖苷酶研究现状 | 第11-19页 |
| 1.1.1 β-葡萄糖苷酶的结构与分类 | 第11页 |
| 1.1.2 β-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第11-13页 |
| 1.1.3 β-葡萄糖苷酶的底物特异性 | 第13页 |
| 1.1.4 β-葡萄糖苷酶的结构和催化机制 | 第13-14页 |
| 1.1.5 β-葡萄糖苷酶的定点突变 | 第14-16页 |
| 1.1.6 CH1 β-葡萄糖苷酶的底物特异性的分子基础研究 | 第16-18页 |
| 1.1.7 β-葡萄糖苷酶的功能与食品工业上的应用 | 第18-19页 |
| 1.2 植物多酚的研究 | 第19-22页 |
| 1.2.1 植物多酚的分类 | 第20页 |
| 1.2.2 植物多酚类糖苷的糖基类型 | 第20-21页 |
| 1.2.3 植物多酚的理化性质 | 第21页 |
| 1.2.4 植物多酚的生理功能 | 第21-22页 |
| 1.3 β-葡萄糖苷酶对植物多酚生物转化的研究 | 第22-24页 |
| 1.3.1 植物多酚改性方法的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.3.2 β-葡萄糖苷酶对植物多酚类糖苷物质去糖基研究 | 第23-24页 |
| 1.4 立题依据和研究内容 | 第24-27页 |
| 第二章 定点突变位点的确定及突变酶的构建 | 第27-41页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 材料与方法 | 第27-33页 |
| 2.2.1 菌种与质粒 | 第27页 |
| 2.2.2 培养基 | 第27-28页 |
| 2.2.3 主要试剂及其来源 | 第28页 |
| 2.2.4 主要仪器设备及其来源 | 第28页 |
| 2.2.5 GH1 β-葡萄糖苷酶的蛋白序列 | 第28-29页 |
| 2.2.6 软件与数据库 | 第29页 |
| 2.2.7 多序列比对 | 第29页 |
| 2.2.8 重组Tm-BglA与纤维四糖对接分析 | 第29-30页 |
| 2.2.9 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30页 |
| 2.2.10 引物设计 | 第30-31页 |
| 2.2.11 pHsh-TmBglA突变酶的构建 | 第31-33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-40页 |
| 2.3.1 定点突变位点的确定 | 第33-37页 |
| 2.3.2 pHsh-TmBglA突变质粒的验证 | 第37-40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 重组Tm-BglA及其突变酶酶学性质比较 | 第41-57页 |
| 3.1 引言 | 第41页 |
| 3.2 材料与方法 | 第41-47页 |
| 3.2.1 主要试剂及其来源 | 第41-42页 |
| 3.2.2 主要仪器设备及其来源 | 第42页 |
| 3.2.3 突变酶的制备与纯化 | 第42页 |
| 3.2.4 聚丙烯酰氨凝胶电泳 | 第42-43页 |
| 3.2.5 蛋白质浓度的测定 | 第43-44页 |
| 3.2.6 β-葡萄糖苷酶活性测定 | 第44-45页 |
| 3.2.7 突变酶的酶学性质 | 第45-47页 |
| 3.3 结果与分析 | 第47-56页 |
| 3.3.1 重组Tm-BglA及其突变酶的酶学性质分析比较 | 第47-52页 |
| 3.3.2 重组Tm-BglA及其突变酶的酶学性质比较 | 第52-53页 |
| 3.3.3 重组Tm-BglA及其突变酶的动力学参数测定 | 第53-55页 |
| 3.3.4 重组Tm-BglA的突变酶的的活化自由能的计算 | 第55-56页 |
| 3.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 重组Tm-BglA及其突变酶对植物多酚糖苷的水解作用 | 第57-76页 |
| 4.1 引言 | 第57-58页 |
| 4.2 材料与方法 | 第58-64页 |
| 4.2.1 主要试剂及其来源 | 第58页 |
| 4.2.2 主要仪器设备及其来源 | 第58页 |
| 4.2.3 重组Tm-BglA与突变酶水解大豆异黄酮效率的比较 | 第58-59页 |
| 4.2.4 重组Tm-BglA与突变酶水解槲皮素糖苷效率的比较 | 第59-61页 |
| 4.2.5 重组Tm-BglA与突变酶水解虎杖苷效率的比较 | 第61-63页 |
| 4.2.6 重组Tm-BglA与突变酶水解牛蒡子苷效率的比较 | 第63-64页 |
| 4.3 结果与分析 | 第64-75页 |
| 4.3.1 重组Tm-BglA及其突变酶对大豆异黄酮水解作用的比较 | 第64-66页 |
| 4.3.2 重组Tm-BglA及其突变酶对槲皮素糖苷的水解作用的比较 | 第66-71页 |
| 4.3.3 重组Tm-BglA及其突变酶对虎杖苷的水解作用的比较 | 第71-73页 |
| 4.3.4 重组Tm-BglA及其突变酶对牛蒡子苷的水解作用的比较 | 第73-75页 |
| 4.4 本章小结 | 第75-76页 |
| 第五章 重组Tm-BglA及其突变酶与底物的分子对接解析 | 第76-85页 |
| 5.1 引言 | 第76页 |
| 5.2 材料与方法 | 第76-77页 |
| 5.2.1 软件与数据库 | 第76页 |
| 5.2.2 重组Tm-BglA与配体小分子对接分析 | 第76-77页 |
| 5.3 结果与分析 | 第77-84页 |
| 5.3.1 重组Tm-BglA突变前后结构变化 | 第77页 |
| 5.3.2 重组Tm-BglA与突变酶与槲皮素糖苷相互作用分析 | 第77-80页 |
| 5.3.3 重组Tm-BglA与突变酶与虎杖苷相互作用分析 | 第80-82页 |
| 5.3.4 重组Tm-BglA与突变酶与牛蒡子苷相互作用分析 | 第82-84页 |
| 5.4 本章小结 | 第84-85页 |
| 结论与展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
