| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 肺炎及肺炎链球菌疫苗 | 第11-16页 |
| 1.1.1 肺炎链球菌简介 | 第11页 |
| 1.1.2 肺炎链球菌引起的疾病 | 第11-12页 |
| 1.1.3 肺炎链球菌疫苗 | 第12-15页 |
| 1.1.4 PspA蛋白介绍 | 第15-16页 |
| 1.2 细菌样颗粒(BLP)为载体的疫苗研制 | 第16-17页 |
| 1.3 调理吞噬方法 | 第17-19页 |
| 1.4 论文设计 | 第19-21页 |
| 1.4.1 实验目的 | 第19页 |
| 1.4.2 实验设计 | 第19-21页 |
| 第2章 PspA4的制备及保护性研究 | 第21-53页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第21-25页 |
| 2.1.1 载体与菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.3 酶及试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要溶液的配制 | 第23-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-37页 |
| 2.2.1 琼脂糖凝胶回收核酸片段 | 第25页 |
| 2.2.2 质粒小量提取操作 | 第25-26页 |
| 2.2.3 外源质粒转化入大肠杆菌感受态细胞操作 | 第26页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE及Western-Blot操作 | 第26-27页 |
| 2.2.5 ELISA操作 | 第27-28页 |
| 2.2.6 PspA4目的基因的选取及表达载体的构建 | 第28-30页 |
| 2.2.7 PspA4-PA融合蛋白的表达及鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.8 BLP的制备及定量 | 第31-32页 |
| 2.2.9 BLPs/PspA4-PA制备条件的确立 | 第32-33页 |
| 2.2.10 Odyssey近红外激光成像系统定量BLPs/PspA4-PA | 第33-34页 |
| 2.2.11 免疫荧光法鉴定BLPs/Psp/A4-PA | 第34页 |
| 2.2.12 BLPs/PspA4-PA粘膜免疫策略的确定 | 第34-36页 |
| 2.2.13 BLPs/PspA4-PA疫苗攻毒保护实验 | 第36-37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-52页 |
| 2.3.1 PspA4目的基因的选取及表达载体的构建 | 第37-39页 |
| 2.3.2 PspA4-PA融合蛋白的表达及鉴定 | 第39-41页 |
| 2.3.3 BLP的制备及定量 | 第41页 |
| 2.3.4 BLPs/PspA4-PA制备条件的确立 | 第41-44页 |
| 2.3.5 Odyssey近红外激光成像定量BLPs/PspA4-PA | 第44-45页 |
| 2.3.6 免疫荧光法鉴定BLPs/PspA4-PA | 第45-46页 |
| 2.3.7 BLPs/PspA4-PA鼻粘膜免疫策略的确定 | 第46-50页 |
| 2.3.8 BLPs/PspA4-PA攻毒保护实验 | 第50-52页 |
| 2.4 本章小结及讨论 | 第52-53页 |
| 第3章 PspA抗体的体外调理吞噬方法的建立 | 第53-68页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第53-55页 |
| 3.1.1 细胞与样品 | 第53页 |
| 3.1.2 试剂 | 第53-54页 |
| 3.1.3 仪器 | 第54页 |
| 3.1.4 主要溶液的配置 | 第54-55页 |
| 3.2 实验方法 | 第55-58页 |
| 3.2.1 HL60细胞的培养与分化 | 第55页 |
| 3.2.2 HL60细胞分化条件的摸索 | 第55页 |
| 3.2.3 流式细胞术检测HL60细胞的分化情况 | 第55-56页 |
| 3.2.4 调理吞噬实验 | 第56-58页 |
| 3.3 实验结果 | 第58-66页 |
| 3.3.1 HL60细胞分化条件的摸索 | 第58-60页 |
| 3.3.2 调理吞噬实验 | 第60-66页 |
| 3.4 本章小结及讨论 | 第66-68页 |
| 本文结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
