| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-32页 |
| 1 低温胁迫对植物的影响 | 第15-26页 |
| 1.1 低温胁迫对棉花的危害 | 第16-17页 |
| 1.2 植物低温胁迫信号分子研究 | 第17-18页 |
| 1.3 膜脂与低温胁迫 | 第18-25页 |
| 1.3.1 超长链脂肪酸与低温胁迫 | 第20-22页 |
| 1.3.2 KCS基因家族 | 第22-23页 |
| 1.3.3 不饱和脂肪酸与低温胁迫 | 第23-25页 |
| 1.4 植物激素与低温胁迫 | 第25-26页 |
| 2 高温胁迫对植物的影响 | 第26页 |
| 3 植物抵御低温和高温胁迫的生理生化变化 | 第26-27页 |
| 4 非编码小RNA对环境的适应调整 | 第27-31页 |
| 4.1 植物miRNA的产生和作用机理 | 第28-29页 |
| 4.2 植物miRNA调控激素信号路径 | 第29-30页 |
| 4.3 植物miRNA与高低温胁迫 | 第30-31页 |
| 5 本研究的内容和意义 | 第31-32页 |
| 第二章 棉花GhKCS13调控低温敏感性的功能鉴定 | 第32-76页 |
| 1 材料方法 | 第32-42页 |
| 1.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第32页 |
| 1.1.2 主要菌株和载体 | 第32页 |
| 1.1.3 主要酶类和试剂 | 第32-33页 |
| 1.2 实验方法 | 第33-42页 |
| 1.2.1 载体构建反遗传转化 | 第33-35页 |
| 1.2.2 棉花幼苗的低温处理 | 第35页 |
| 1.2.3 棉花幼苗的激素和脂肪酸类物质的外源处理 | 第35-36页 |
| 1.2.4 酵母转化以及抗低温胁迫分析 | 第36页 |
| 1.2.5 VIGS介导的基因沉默 | 第36-37页 |
| 1.2.6 RT-PCR和荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)分析 | 第37页 |
| 1.2.7 亚细胞定位分析 | 第37-38页 |
| 1.2.8 原位杂交 | 第38页 |
| 1.2.9 转基因分子鉴定(Southern and Northern blotting) | 第38-39页 |
| 1.2.10 鞘脂提取 | 第39页 |
| 1.2.11 脂质含量测定 | 第39-40页 |
| 1.2.12 植物生理指标的测定 | 第40页 |
| 1.2.13 植物激素含量测定 | 第40-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-72页 |
| 2.1 GhKCS13基因的克隆及序列比较 | 第42-43页 |
| 2.2 GhKCS13基因的组织表达模式和诱导表达 | 第43-45页 |
| 2.3 GhKCS13亚细胞定位及原位杂交 | 第45-46页 |
| 2.4 转基因植株的鉴定 | 第46-47页 |
| 2.5 超表达GhKCS13增强棉花对低温的敏感性 | 第47-50页 |
| 2.5.1 GhKCS13转基因株系大田表型鉴定 | 第47-48页 |
| 2.5.2 GhKCS13转基因株系低温处理表型鉴定 | 第48-50页 |
| 2.6 GhKCS13基因在酵母中异源表达 | 第50-51页 |
| 2.7 GhKCS13通过改变鞘脂的不饱和度来调控对低温的响应 | 第51-58页 |
| 2.7.1 GhKCS13转基因株系鞘脂总含量测定 | 第51-53页 |
| 2.7.2 GhKCS13转基因株系含有不同脂肪酸碳链的鞘脂组分 | 第53-55页 |
| 2.7.3 GhKCS13转基因株系按照LCB分类的鞘脂组分 | 第55-57页 |
| 2.7.4 GhKCS13基因表达的差异影响鞘脂的不饱和度 | 第57-58页 |
| 2.8 GhKCS13通过膜脂质的重塑来调控对低温的响应 | 第58-65页 |
| 2.8.1 GhKCS13转基因株系磷脂和糖脂的测定 | 第58-59页 |
| 2.8.2 GhKCS13转基因株系的各磷脂组分 | 第59-62页 |
| 2.8.3 GhKCS13转基因株系通过改变膜脂结构来调控对低温的响应 | 第62-64页 |
| 2.8.4 GhKCS13转基因株系的各溶血磷脂的组分 | 第64-65页 |
| 2.9 GhKCS13通过调控不饱和脂肪酸的合成来响应低温胁迫 | 第65-68页 |
| 2.9.1 GhKCS13影响不饱和脂肪酸的合成 | 第65-66页 |
| 2.9.2 VIGS介导的FADs基因沉默植株对低温胁迫更加敏感 | 第66-67页 |
| 2.9.3 GhKCS13通过调控脱饱和酶来响应低温胁迫 | 第67-68页 |
| 2.10 GhKCS13通过调控茉莉酸的合成来响应低温胁迫 | 第68-72页 |
| 2.10.1 GhKCS13基因影响茉莉酸的合成 | 第68-69页 |
| 2.10.2 GhKCS13通过调控茉莉酸的合成来响应低温胁迫 | 第69-72页 |
| 3 讨论 | 第72-76页 |
| 3.1 GhKCS13通过改变鞘脂的不饱和度来调控对低温的响应 | 第72-73页 |
| 3.2 GhKCS13通过膜脂质的重塑来调控对低温的响应 | 第73-74页 |
| 3.3 GhKCS13通过不饱和磷脂酸来调控对低温的响应 | 第74页 |
| 3.4 GhKCS13通过调控茉莉酸的合成来响应低温胁迫 | 第74-76页 |
| 第三章 棉花中高低温胁迫相关miRNAs及其靶基因的鉴定 | 第76-99页 |
| 1 材料方法 | 第76-80页 |
| 1.1 实验材料 | 第76页 |
| 1.2 实验方法 | 第76-80页 |
| 1.2.1 生理指标的测定 | 第76页 |
| 1.2.2 小RNA文库与降解组文库构建与测序 | 第76-77页 |
| 1.2.3 小RNA和降解组数据分析 | 第77-78页 |
| 1.2.4 差异表达基因的筛选 | 第78页 |
| 1.2.5 miRNA和靶基因的反转录以及qRT-PCR验证 | 第78-80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-94页 |
| 2.1 不同温度胁迫对棉花幼苗的影响 | 第80-81页 |
| 2.2 小RNA测序数据统计 | 第81-83页 |
| 2.3 保守miRNA和新的候选miRNA的鉴定 | 第83-85页 |
| 2.4 差异表达miRNA的筛选 | 第85-88页 |
| 2.5 miRNA靶标的鉴定 | 第88-90页 |
| 2.6 差异表达miRNA靶基因的功能富集 | 第90-91页 |
| 2.7 差异表达miRNA及其靶基因的qRT-PCR验证 | 第91-94页 |
| 3 讨论 | 第94-99页 |
| 3.1 miRNA在低温和高温胁迫下调节棉花生长稳态 | 第95-96页 |
| 3.2 叶绿体可能是高低温胁迫的传感器 | 第96-97页 |
| 3.3 转录因子在对高低温胁迫中起着关键作用 | 第97页 |
| 3.4 生物和非生物胁迫可能存在某些相同的反应途径 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-116页 |
| 附录 | 第116-148页 |
| 在读期间研究成果 | 第148-149页 |
| 致谢 | 第149-151页 |
