| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 英汉缩略词对照表 | 第14-16页 |
| 引言 | 第16-19页 |
| 第一部分 固本化瘀通络合剂含药血清对高糖环境下足细胞的作用浓度摸索 | 第19-35页 |
| 1.材料与方法 | 第19-25页 |
| 1.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第19页 |
| 1.1.2 实验细胞 | 第19-20页 |
| 1.1.3 实验药材 | 第20页 |
| 1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 1.3 主要仪器和设备 | 第21页 |
| 1.4 实验方法 | 第21-25页 |
| 1.4.1 固本化瘀通络合剂含药血清及正常大鼠血清的制备 | 第21-22页 |
| 1.4.2 细胞培养与分组 | 第22-24页 |
| 1.4.3 形态学观察 | 第24页 |
| 1.4.4 CFSE/PI染色 | 第24-25页 |
| 1.5 统计学分析 | 第25页 |
| 2.结果 | 第25-31页 |
| 2.1 不同培养条件下足细胞的形态学改变 | 第25-26页 |
| 2.2 不同培养条件下足细胞CFSE/PI染色结果 | 第26-31页 |
| 3.讨论 | 第31-34页 |
| 3.1 中医对DN的认识 | 第31-32页 |
| 3.2 固本化瘀通络法与糖尿病肾病的治疗 | 第32-34页 |
| 3.3 不同浓度的固本化瘀通络合剂含药血清对高糖环境下足细胞的作用 | 第34页 |
| 4.结论 | 第34-35页 |
| 第二部分 固本化瘀通络合剂含药血清对高糖诱导的足细胞损伤和凋亡的影响 | 第35-58页 |
| 1.材料与方法 | 第35-45页 |
| 1.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第35页 |
| 1.1.2 实验细胞 | 第35页 |
| 1.1.3 实验药材 | 第35-36页 |
| 1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 1.3 主要仪器和设备 | 第37-38页 |
| 1.4 实验方法 | 第38-45页 |
| 1.4.1 固本化瘀通络合剂含药血清及正常大鼠血清的制备 | 第38-39页 |
| 1.4.2 细胞培养与分组 | 第39页 |
| 1.4.3 形态学观察 | 第39页 |
| 1.4.4 流式细胞术(AnnexinV-FITC/PI双标染色法) | 第39-40页 |
| 1.4.5 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) | 第40-43页 |
| 1.4.6 Western Blotting检测nephrin蛋白表达 | 第43-45页 |
| 1.5 统计学分析 | 第45页 |
| 2.结果 | 第45-52页 |
| 2.1 不同培养条件下足细胞的形态学改变 | 第45-46页 |
| 2.2 流式细胞术（Annexin V-FITC/PI 双标染色法）检测细胞凋亡 | 第46-48页 |
| 2.3 RT-PCR检测nephrin mRNA表达 | 第48-50页 |
| 2.3.1 甲醛变性电泳检测RNA完整性 | 第48-49页 |
| 2.3.2 足细胞nephrin mRNA表达 | 第49-50页 |
| 2.4 Western Blotting检测nephrin蛋白表达 | 第50-52页 |
| 2.4.1 总蛋白完整性检测 | 第50-51页 |
| 2.4.2 足细胞nephrin蛋白表达 | 第51-52页 |
| 3.讨论 | 第52-57页 |
| 3.1 足细胞损伤与DNA蛋白尿 | 第52-53页 |
| 3.2 固本化瘀通络合剂抑制高糖诱导的足细胞损伤和凋亡 | 第53-55页 |
| 3.3 细胞损伤、凋亡与自噬 | 第55-57页 |
| 4.结论 | 第57-58页 |
| 第三部分 固本化瘀通络合剂含药血清对高糖诱导的足细胞自噬的影响及分子机制研究 | 第58-96页 |
| 1.材料与方法 | 第58-68页 |
| 1.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第58页 |
| 1.1.2 实验细胞 | 第58页 |
| 1.1.3 实验药材 | 第58-59页 |
| 1.2 主要试剂 | 第59-61页 |
| 1.3 主要仪器和设备 | 第61页 |
| 1.4 实验方法 | 第61-68页 |
| 1.4.1 固本化瘀通络合剂含药血清及正常大鼠血清的制备 | 第62页 |
| 1.4.2 细胞培养与分组 | 第62页 |
| 1.4.3 形态学观察 | 第62-63页 |
| 1.4.4 免疫荧光检测 | 第63页 |
| 1.4.5 pGMAD-CMV-RFP-GFP-hLC3腺病毒转染 | 第63-64页 |
| 1.4.6 RT-PCR检测 | 第64-67页 |
| 1.4.7 Western Blotting检测 | 第67-68页 |
| 1.5 统计学分析 | 第68页 |
| 2.结果 | 第68-88页 |
| 2.1 免疫荧光检测P62的表达 | 第68-71页 |
| 2.2 pGMAD-CMV-RFP-GFP-hLC3腺病毒转染+免疫荧光法检测LC3 | 第71-73页 |
| 2.3 不同培养条件下足细胞的LC3B、P62、atg5、atg7、atg12、AMPK和mTOR的mRNA相对表达量 | 第73-80页 |
| 2.3.1 自噬小体标志物LC3B、atg5、atg7、atg12mRNA相对表达量 | 第73-77页 |
| 2.3.2 自噬底物标志物P62mRNA相对表达量 | 第77-78页 |
| 2.3.3 自噬信号通路相关基因AMPK和mTORmRNA相对表达量 | 第78-80页 |
| 2.4 不同培养条件下足细胞的LC3、P62、Atg7和Atg12-Atg5复合体的蛋白 | 第80-88页 |
| 2.4.1 自噬小体标志物LC3、Atg12-Atg5复合体和Atg7的蛋白表达 | 第80-84页 |
| 2.4.2 自噬底物标志物 P62 的蛋白表达 | 第84-85页 |
| 2.4.3 自噬信号通路分子 AMPK、p-AMPK、m TOR 和 p-m TOR 的蛋白表达 | 第85-88页 |
| 3.讨论 | 第88-95页 |
| 3.1 高糖环境与足细胞自噬 | 第88-89页 |
| 3.2 固本化瘀通络合剂对高糖环境下足细胞自噬异常的调控作用及其分子机制 | 第89-92页 |
| 3.3 固本化瘀通络合剂调控高糖诱导的足细胞自噬异常的AMPK和mTOR信号通路 | 第92-95页 |
| 4.结论 | 第95-96页 |
| 结论 | 第96-97页 |
| 创新性及特色 | 第97-98页 |
| 不足与展望 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-111页 |
| 综述 | 第111-138页 |
| References | 第124-138页 |
| 在校期间公开发表的学术论文 | 第138-139页 |
