| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第18-26页 |
| 1.1 家蚕滞育的研究现状 | 第18-22页 |
| 1.1.1 环境生物学方面的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.1.2 生理生化方面的研究进展 | 第19页 |
| 1.1.3 酶学方面的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.1.4 滞育相关物质在分子生物学方面的的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.2 家蚕滞育特性的应用 | 第22页 |
| 1.3 本研究的目的意义 | 第22-26页 |
| 1.3.1 本课题研究的主要内容和意义 | 第22-23页 |
| 1.3.2 本课题研究的主要技术路线 | 第23-26页 |
| 第2章 家蚕MF品种滞育激素基因的克隆及不同化性品种间的表达分析 | 第26-39页 |
| 2.1 实验材料及设备 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.2 实验主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.1.3 实验主要试剂 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.2 家蚕各组织RNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.3 家蚕MF品种滞育激素基因的克隆 | 第28-29页 |
| 2.2.4 家蚕滞育激素基因的结构分析 | 第29页 |
| 2.2.5 DH基因在家蚕MF品种雌雄幼虫组织中的表达分析 | 第29-30页 |
| 2.2.6 DH基因在不同化性品种间的表达分析 | 第30-31页 |
| 2.3 结果与分析 | 第31-37页 |
| 2.3.1 DH基因的克隆及序列特征 | 第31-32页 |
| 2.3.2 BmDH-MF蛋白跨膜结构域的预测和分析 | 第32页 |
| 2.3.3 BmDH-MF基因编码的蛋白疏水/亲水性的预测和分析 | 第32-33页 |
| 2.3.4 BmDH-MF基因编码的蛋白与其他家蚕品种的同源蛋白序列比较 | 第33-34页 |
| 2.3.5 家蚕DH基因在家蚕品种马富雌雄幼虫组织中的表达分析 | 第34页 |
| 2.3.6 DH基因在三个家蚕品种不同组织中的表达变化 | 第34-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第3章 家蚕MF品种滞育激素受体基因的克隆及不同化性品种间的表达分析 | 第39-57页 |
| 3.1 实验材料与设备 | 第39-40页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.2 实验主要仪器设备 | 第39页 |
| 3.1.3 实验主要试剂 | 第39-40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-45页 |
| 3.2.1 DHR基因扩增相关特异性引物的设计 | 第40页 |
| 3.2.2 DHR基因部分EST序列的克隆与验证 | 第40-42页 |
| 3.2.3 DHR基因 3'末端与 5'末端cDNA的克隆 | 第42-44页 |
| 3.2.4 家蚕滞育激素受体基因的生物信息学分析 | 第44页 |
| 3.2.5 滞育激素受体基因的组织表达分析 | 第44页 |
| 3.2.6 滞育激素受体基因在不同化性品种间的表达谱分析 | 第44-45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-54页 |
| 3.3.1 RNA样品的提取 | 第45页 |
| 3.3.2 DHR基因cDNA的克隆和基因序列分析 | 第45-47页 |
| 3.3.3 不同家蚕品种滞育激素受体的序列特征分析 | 第47-51页 |
| 3.3.4 家蚕DHR基因编码氨基酸的系统进化树分析 | 第51页 |
| 3.3.5 家蚕DHR基因在家蚕品种MF雌雄幼虫组织中的表达变化 | 第51-52页 |
| 3.3.6 滞育激素受体基因在三个家蚕品种蛹期的表达变化 | 第52-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-57页 |
| 第4章 滞育激素受体基因的RNAi干涉 | 第57-69页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第57-58页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第57页 |
| 4.1.2 实验所用试剂 | 第57页 |
| 4.1.3 实验所用缓冲液的配制 | 第57-58页 |
| 4.2 实验方法 | 第58-62页 |
| 4.2.1 干涉实验引物的合成 | 第58页 |
| 4.2.2 干涉模板DNA的获取 | 第58-59页 |
| 4.2.3 利用Promega公司Kit进行体外转录合成dsRNA | 第59-60页 |
| 4.2.4 dsRNA体外干涉 | 第60-61页 |
| 4.2.5 dsRNA体外干涉后的定量分析 | 第61页 |
| 4.2.6 dsRNA体外干涉后蚕蛹化蛾交配产卵后卵色观察及孵化情况调查 | 第61-62页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第62-66页 |
| 4.3.1 干涉模板DNA及目的基因dsRNA的结果分析 | 第62-63页 |
| 4.3.2 蛹期干涉后卵色变化结果及孵化调查分析 | 第63-66页 |
| 4.3.3 dsRNA体外干涉后的DHR定量分析 | 第66页 |
| 4.4 讨论 | 第66-69页 |
| 结论与展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 已登录GenBank序列号 | 第75-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
