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平菇蓝光受体基因Pcry的克隆及分析

致谢第4-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-17页
    1.1 平菇和光第9页
    1.2 光受体第9-10页
    1.3 植物的光受体第10-11页
        1.3.1 蓝光受体第10-11页
        1.3.2 红光受体第11页
        1.3.3 植物光受体的研究进展第11页
    1.4 真菌的光受体第11-16页
        1.4.1 真菌的红光和绿光受体第12页
        1.4.2 真菌的蓝光受体第12-14页
            1.4.2.1 粗糙脉胞菌中的蓝光受体第12-13页
            1.4.2.2 香菇中的蓝光受体第13-14页
            1.4.2.3 其它真菌中的蓝光受体第14页
        1.4.3 蓝光受体对真菌生长发育过程及光形态建成的调节第14-15页
        1.4.4 真菌光受体调节的下游基因第15-16页
    1.5 真菌蓝光受体和平菇蓝光受体的研究现状第16-17页
2 引言第17-19页
    2.1 研究目的和意义第17-18页
    2.2 技术路线第18-19页
3 材料和方法第19-34页
    3.1 材料第19页
        3.1.1 菌株第19页
        3.1.2 培养基第19页
    3.2 主要试剂、仪器及引物第19-21页
        3.2.1 主要试剂第19页
        3.2.2 主要仪器第19-20页
        3.2.3 实验中主要溶液的配制第20-21页
        3.2.4 引物第21页
    3.3 实验方法第21-34页
        3.3.1 平菇总RNA的提取第21-23页
            3.3.1.1 提取平菇总RNA的准备工作第22页
            3.3.1.2 RNA的提取第22页
            3.3.1.3 RNA质量检测方法第22-23页
        3.3.2 cDNA第一条链的合成第23页
        3.3.3 平菇蓝光受体基因Pcry部分保守域片断的获得第23-26页
            3.3.3.1 其它真菌蓝光受体基因的分析及引物的设计第23-24页
            3.3.3.2 平菇蓝光受体基因Pcry部分保守域片断的RT-PCR反应第24页
            3.3.3.3 平菇蓝光受体基因Pcry部分保守域片断的回收及测序第24-26页
        3.3.4 平菇蓝光受体基因Pcry的 3'及 5'末端片断的克隆第26-30页
            3.3.4.1 RACE引物的设计第26-27页
            3.3.4.2 RACE cDNA第一链合成第27-28页
            3.3.4.3 RACE方法快速扩增cDNA 3'和 5'末端第28-30页
        3.3.5 平菇蓝光受体基因Pcry全长cDNA的获得第30-31页
        3.3.6 平菇蓝光受体Pcry全长cDNA的生物信息学分析第31页
        3.3.7 平菇蓝光受体基因Pcry全长cDNA表达模式的分析第31-32页
            3.3.7.1 实验材料的获得第31页
            3.3.7.2 半定量PCR第31-32页
        3.3.8 原核表达验证平菇蓝光受体基因Pcry全长cDNA开放阅读框的正确性验证第32-34页
            3.3.8.1 PCR扩增Pcry全长cDNA的ORF第32-33页
            3.3.8.2 构建原核表达菌株及诱导表达第33页
            3.3.8.3 SDS-PAGE检测蛋白的表达第33-34页
4 结果与分析第34-49页
    4.1 总RNA质量的检测第34-35页
    4.2 平菇蓝光受体基因Pcry部分保守域序列第35-36页
    4.3 平菇蓝光受体基因Pcry的 3'及 5'末端片断的克隆第36-39页
    4.4 平菇蓝光受体基因Pcry全长cDNA的获得第39-40页
    4.5 平菇蓝光受体基因Pcry全长cDNA的生物信息学分析第40-45页
        4.5.1 Pcry全长c DNA保守域分析图及比对结果第40-42页
        4.5.2 Pcry全长c DNA开放阅读框分析第42-43页
        4.5.3 蛋白质功能预测及分析第43-45页
        4.5.4 系统进化树分析第45页
    4.6 平菇蓝光受体基因Pcry全长c DNA的表达模式分析第45-47页
    4.7 平菇蓝光受体基因Pcry全长c DNA的原核表达结果第47-49页
5 结论和讨论第49-51页
参考文献第51-59页
英文摘要第59-60页

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