致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-17页 |
1.1 平菇和光 | 第9页 |
1.2 光受体 | 第9-10页 |
1.3 植物的光受体 | 第10-11页 |
1.3.1 蓝光受体 | 第10-11页 |
1.3.2 红光受体 | 第11页 |
1.3.3 植物光受体的研究进展 | 第11页 |
1.4 真菌的光受体 | 第11-16页 |
1.4.1 真菌的红光和绿光受体 | 第12页 |
1.4.2 真菌的蓝光受体 | 第12-14页 |
1.4.2.1 粗糙脉胞菌中的蓝光受体 | 第12-13页 |
1.4.2.2 香菇中的蓝光受体 | 第13-14页 |
1.4.2.3 其它真菌中的蓝光受体 | 第14页 |
1.4.3 蓝光受体对真菌生长发育过程及光形态建成的调节 | 第14-15页 |
1.4.4 真菌光受体调节的下游基因 | 第15-16页 |
1.5 真菌蓝光受体和平菇蓝光受体的研究现状 | 第16-17页 |
2 引言 | 第17-19页 |
2.1 研究目的和意义 | 第17-18页 |
2.2 技术路线 | 第18-19页 |
3 材料和方法 | 第19-34页 |
3.1 材料 | 第19页 |
3.1.1 菌株 | 第19页 |
3.1.2 培养基 | 第19页 |
3.2 主要试剂、仪器及引物 | 第19-21页 |
3.2.1 主要试剂 | 第19页 |
3.2.2 主要仪器 | 第19-20页 |
3.2.3 实验中主要溶液的配制 | 第20-21页 |
3.2.4 引物 | 第21页 |
3.3 实验方法 | 第21-34页 |
3.3.1 平菇总RNA的提取 | 第21-23页 |
3.3.1.1 提取平菇总RNA的准备工作 | 第22页 |
3.3.1.2 RNA的提取 | 第22页 |
3.3.1.3 RNA质量检测方法 | 第22-23页 |
3.3.2 cDNA第一条链的合成 | 第23页 |
3.3.3 平菇蓝光受体基因Pcry部分保守域片断的获得 | 第23-26页 |
3.3.3.1 其它真菌蓝光受体基因的分析及引物的设计 | 第23-24页 |
3.3.3.2 平菇蓝光受体基因Pcry部分保守域片断的RT-PCR反应 | 第24页 |
3.3.3.3 平菇蓝光受体基因Pcry部分保守域片断的回收及测序 | 第24-26页 |
3.3.4 平菇蓝光受体基因Pcry的 3'及 5'末端片断的克隆 | 第26-30页 |
3.3.4.1 RACE引物的设计 | 第26-27页 |
3.3.4.2 RACE cDNA第一链合成 | 第27-28页 |
3.3.4.3 RACE方法快速扩增cDNA 3'和 5'末端 | 第28-30页 |
3.3.5 平菇蓝光受体基因Pcry全长cDNA的获得 | 第30-31页 |
3.3.6 平菇蓝光受体Pcry全长cDNA的生物信息学分析 | 第31页 |
3.3.7 平菇蓝光受体基因Pcry全长cDNA表达模式的分析 | 第31-32页 |
3.3.7.1 实验材料的获得 | 第31页 |
3.3.7.2 半定量PCR | 第31-32页 |
3.3.8 原核表达验证平菇蓝光受体基因Pcry全长cDNA开放阅读框的正确性验证 | 第32-34页 |
3.3.8.1 PCR扩增Pcry全长cDNA的ORF | 第32-33页 |
3.3.8.2 构建原核表达菌株及诱导表达 | 第33页 |
3.3.8.3 SDS-PAGE检测蛋白的表达 | 第33-34页 |
4 结果与分析 | 第34-49页 |
4.1 总RNA质量的检测 | 第34-35页 |
4.2 平菇蓝光受体基因Pcry部分保守域序列 | 第35-36页 |
4.3 平菇蓝光受体基因Pcry的 3'及 5'末端片断的克隆 | 第36-39页 |
4.4 平菇蓝光受体基因Pcry全长cDNA的获得 | 第39-40页 |
4.5 平菇蓝光受体基因Pcry全长cDNA的生物信息学分析 | 第40-45页 |
4.5.1 Pcry全长c DNA保守域分析图及比对结果 | 第40-42页 |
4.5.2 Pcry全长c DNA开放阅读框分析 | 第42-43页 |
4.5.3 蛋白质功能预测及分析 | 第43-45页 |
4.5.4 系统进化树分析 | 第45页 |
4.6 平菇蓝光受体基因Pcry全长c DNA的表达模式分析 | 第45-47页 |
4.7 平菇蓝光受体基因Pcry全长c DNA的原核表达结果 | 第47-49页 |
5 结论和讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
英文摘要 | 第59-60页 |