| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 铜与神经毒性 | 第10-13页 |
| 1.1.1 铜代谢 | 第10-11页 |
| 1.1.2 铜与AD | 第11-12页 |
| 1.1.3 铜的神经毒性 | 第12-13页 |
| 1.2 铜的毒性机制 | 第13-14页 |
| 1.2.1 铜与线粒体 | 第13页 |
| 1.2.2 铜与细胞核 | 第13-14页 |
| 1.2.3 铜与生物分子结合 | 第14页 |
| 1.3 蛋白质组学 | 第14-15页 |
| 1.4 本课题的研究目的、科学意义与技术路线 | 第15-18页 |
| 第二章 短期低剂量铜暴露对小鼠海马神经元凋亡、DNA损伤和ATP水平影响的研究 | 第18-34页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.2.1 实验动物及分组 | 第18-19页 |
| 2.2.2 主要化学试剂及试剂盒 | 第19-20页 |
| 2.2.3 主要仪器及设备 | 第20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-27页 |
| 2.3.1 石蜡切片准备 | 第20-21页 |
| 2.3.2 TUNEL染色 | 第21-22页 |
| 2.3.3 8-OHdG免疫荧光 | 第22-23页 |
| 2.3.4 脑ATP含量的测定 | 第23-24页 |
| 2.3.5 Western-blot实验步骤 | 第24-27页 |
| 2.3.6 数据统计分析 | 第27页 |
| 2.4 结果 | 第27-32页 |
| 2.4.1 低剂量铜暴露导致海马神经细胞凋亡显著增加 | 第27-30页 |
| 2.4.2 低剂量铜处理导致小鼠海马神经元DNA氧化损伤加剧 | 第30-31页 |
| 2.4.3 铜处理3xTg-AD小鼠脑中ATP水平降低 | 第31-32页 |
| 2.5 讨论 | 第32-33页 |
| 2.6 本章小结 | 第33-34页 |
| 第三章 短期低剂量铜暴露对WT小鼠和3xTg-AD小鼠海马细胞核蛋白质组的影响 | 第34-69页 |
| 3.1 引言 | 第34-35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-39页 |
| 3.2.1 主要化学试剂名称及试剂盒 | 第35-36页 |
| 3.2.2 主要仪器及设备 | 第36页 |
| 3.2.3 主要试剂配置 | 第36-39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-46页 |
| 3.3.1 小鼠海马组织分离 | 第39-40页 |
| 3.3.2 海马细胞核抽提 | 第40页 |
| 3.3.3 海马细胞核蛋白提取与纯化 | 第40页 |
| 3.3.4 海马细胞核蛋白定量 | 第40-41页 |
| 3.3.5 对蛋白样品进行荧光标记 | 第41-42页 |
| 3.3.6 一向等电点分离 | 第42-43页 |
| 3.3.7 第二向聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第43-44页 |
| 3.3.8 荧光差异蛋白点分析 | 第44页 |
| 3.3.9 2DE和考马斯亮蓝染色 | 第44-45页 |
| 3.3.10 挖胶和酶解 | 第45页 |
| 3.3.11 质谱鉴定 | 第45页 |
| 3.3.12 差异蛋白功能分析 | 第45-46页 |
| 3.4 结果 | 第46-64页 |
| 3.4.1 3xTg-AD小鼠海马细胞核蛋白质组学分析 | 第46-52页 |
| 3.4.2 WT/Cu组与WT组小鼠海马细胞核蛋白质组学分析 | 第52-57页 |
| 3.4.3 3xTg-AD/Cu小鼠与3xTg-AD小鼠海马细胞核蛋白质组学分析 | 第57-64页 |
| 3.5 讨论 | 第64-67页 |
| 3.5.1 铜的神经毒性 | 第65页 |
| 3.5.2 低剂量铜暴露导致海马细胞核蛋白差异表达 | 第65-67页 |
| 3.6 本章小结 | 第67-69页 |
| 第四章 差异蛋白进一步验证 | 第69-78页 |
| 4.1 引言 | 第69页 |
| 4.2 实验材料 | 第69-71页 |
| 4.2.1 主要化学试剂名称 | 第69-70页 |
| 4.2.2 主要仪器及设备 | 第70-71页 |
| 4.2.3 主要试剂配置 | 第71页 |
| 4.3 实验方法 | 第71-72页 |
| 4.3.1 Western-blot实验步骤 | 第71页 |
| 4.3.2 免疫组织化学 | 第71-72页 |
| 4.3.3 数据统计分析 | 第72页 |
| 4.4 结果 | 第72-75页 |
| 4.4.1 铜暴露小鼠海马差异表达的代表性核蛋白质点的相对丰度 | 第72-73页 |
| 4.4.2 Western印迹和免疫组化分析验证差异表达的蛋白质 | 第73-75页 |
| 4.5 讨论 | 第75-77页 |
| 4.6 本章小结 | 第77-78页 |
| 第五章 结论与展望 | 第78-81页 |
| 5.1 结论 | 第78-79页 |
| 5.2 展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-93页 |
| 附录 中英文缩略词表 | 第93-95页 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
