| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第1章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 逆境胁迫及植物抗逆分子机制 | 第9-12页 |
| 1.1.1 盐胁迫对植物的影响 | 第9-10页 |
| 1.1.2 干旱胁迫对植物的影响 | 第10页 |
| 1.1.3 植物对渗透胁迫的应答 | 第10-11页 |
| 1.1.4 植物对氧化胁迫的应答 | 第11页 |
| 1.1.5 非生物胁迫应答的转录水平调节 | 第11-12页 |
| 1.2 研究基因功能的主要策略 | 第12-13页 |
| 1.2.1 生物信息学在基因功能中的应用 | 第12-13页 |
| 1.2.2 T-DNA插入突变体在基因功能中的应用 | 第13页 |
| 1.3 固有无序蛋白质 | 第13-14页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 1.5 本研究的技术路线 | 第15-16页 |
| 第2章 AtSIS生物信息学分析 | 第16-23页 |
| 2.1 实验方法 | 第16页 |
| 2.2 结果分析 | 第16-22页 |
| 2.2.1 无序分析 | 第17页 |
| 2.2.2 AtSIS蛋白的氨基酸组成 | 第17-18页 |
| 2.2.3 亲水性分析 | 第18-19页 |
| 2.2.4 AtSIS蛋白质HCA值 | 第19-20页 |
| 2.2.5 二级结构及蛋白结合位点的预测 | 第20-21页 |
| 2.2.6 磷酸化修饰的预测 | 第21-22页 |
| 2.3 讨论 | 第22页 |
| 2.4 本章小结 | 第22-23页 |
| 第3章 AtSIS基因T-DNA插入突变体基因型分析 | 第23-30页 |
| 3.1 材料方法 | 第23-24页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第23-24页 |
| 3.2 结果分析 | 第24-28页 |
| 3.2.1 T-DNA插入位点分析 | 第24-25页 |
| 3.2.2 AtSIS T-DNA插入突变体类型 | 第25-28页 |
| 3.3 讨论 | 第28-29页 |
| 3.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第4章 AtSIS植物表达载体的构建 | 第30-43页 |
| 4.1 材料方法 | 第30-31页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 4.1.2 载体和菌株 | 第30页 |
| 4.1.3 培养基 | 第30页 |
| 4.1.4 酶、抗生素 | 第30-31页 |
| 4.2 实验方法 | 第31-36页 |
| 4.2.1 基因克隆 | 第31页 |
| 4.2.2 克隆载体的构建 | 第31-33页 |
| 4.2.3 植物表达载体的构建 | 第33-35页 |
| 4.2.4 农杆菌转化法转拟南芥 | 第35-36页 |
| 4.3 结果分析 | 第36-42页 |
| 4.3.1 AtSIS基因全长CDS的PCR扩增 | 第36-37页 |
| 4.3.2 pMD18-AtSIS菌株的筛选 | 第37页 |
| 4.3.3 测序结果和分析 | 第37页 |
| 4.3.4 表达载体双酶切 | 第37页 |
| 4.3.5 pCAMBIA1303-AtSIS表达载体的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| 4.3.6 菌液PCR鉴定 | 第38页 |
| 4.3.7 转基因拟南芥的筛选 | 第38页 |
| 4.3.8 转基因拟南芥的表型鉴定 | 第38页 |
| 4.3.9 转基因拟南芥的分子鉴定 | 第38-42页 |
| 4.4 讨论 | 第42页 |
| 4.5 本章小结 | 第42-43页 |
| 第5章 AtSIS对非生物胁迫的应答 | 第43-56页 |
| 5.1 实验材料 | 第43页 |
| 5.2 实验方法 | 第43-46页 |
| 5.2.1 表型实验 | 第43-44页 |
| 5.2.2 cDNA的合成 | 第44-45页 |
| 5.2.3 q RT-PCR | 第45-46页 |
| 5.3 结果分析 | 第46-54页 |
| 5.3.1 拟南芥Col-0 野生型和AtSIS基因突变体的芽期胁迫表型 | 第46-48页 |
| 5.3.2 拟南芥Col-0 野生型和AtSIS基因突变体的苗期胁迫表型 | 第48页 |
| 5.3.3 拟南芥Col-0 野生型和AtSIS基因突变体的花期胁迫表型 | 第48-49页 |
| 5.3.4 AtSIS共表达基因的预测 | 第49-51页 |
| 5.3.5 AtSIS及共表达基因qRT-PCR结果 | 第51-54页 |
| 5.4 讨论 | 第54-55页 |
| 5.5 本章小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
