摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 研究背景 | 第9-21页 |
1.1 环境变化威胁着造礁石珊瑚的生存与繁衍 | 第9页 |
1.2 造礁石珊瑚白化的特征和过程 | 第9-10页 |
1.3 氧化压力对珊瑚细胞凋亡的诱导 | 第10-18页 |
1.3.1 过度的氧化压力与损伤 | 第10-11页 |
1.3.2 通路激活与细胞凋亡 | 第11-15页 |
1.3.3 Caspase3在细胞凋亡过程中的介导作用 | 第15-18页 |
1.4 共生营养关系受环境应激的影响 | 第18-19页 |
1.4.1 互利性营养关系是造礁石珊瑚共生关系的基础 | 第18页 |
1.4.2 环境应激改变了珊瑚共生体的营养关系 | 第18-19页 |
1.4.3 GS在响应环境应激中的调节作用 | 第19页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
2 材料和方法 | 第21-36页 |
2.1 实验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 实验动物及菌株 | 第21页 |
2.1.2 试剂耗材 | 第21-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-36页 |
2.2.1 鹿角杯形珊瑚总RNA的提取及cDNA文库的制备 | 第24-26页 |
2.2.2 RACE PCR获得基因cDNA全长 | 第26-27页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
2.2.4 重组表达载体构建 | 第28-30页 |
2.2.5 重组蛋白表达及纯化 | 第30-31页 |
2.2.6 重组蛋白活性测定 | 第31-35页 |
2.2.7 鹿角杯形珊瑚Caspase3及GS活性测定 | 第35-36页 |
3 实验结果 | 第36-56页 |
3.1 鹿角杯形珊瑚RNA及cDNA文库的制备 | 第36-37页 |
3.2 PdCaspase3和PdGS基因的分子特征 | 第37-47页 |
3.2.1 PdCaspase3基因的分子特征 | 第37-42页 |
3.2.2 PdGS基因的分子特征 | 第42-47页 |
3.3 Pd Caspase3和PdGS的同源性分析 | 第47-51页 |
3.3.1 PdCaspase3的同源性分析 | 第47-49页 |
3.3.2 PdGS的同源性分析 | 第49-51页 |
3.4 环境应激下PdCaspase3和PdGS基因的时序表达 | 第51-52页 |
3.4.1 高温和铵富集应激下PdCaspase3基因的表达变化 | 第51-52页 |
3.4.2 铵富集应激下PdGS基因的表达变化 | 第52页 |
3.5 PdCaspase3和PdGS重组蛋白的表达及纯化 | 第52-53页 |
3.6 PdCaspase3和PdGS重组蛋白的活性验证 | 第53-54页 |
3.6.1 PdCaspase3重组蛋白的活性测定 | 第53-54页 |
3.6.2 PdGS重组蛋白活性测定 | 第54页 |
3.7 环境应激下珊瑚Caspase3和GS的活性变化 | 第54-56页 |
3.7.1 环境应激下珊瑚Caspase3的活性变化 | 第54-55页 |
3.7.2 铵富集应激下珊瑚GS的活性变化 | 第55-56页 |
4 分析和讨论 | 第56-59页 |
4.1 PdCaspase3和PdGS基因的分子特征 | 第56-57页 |
4.2 PdCaspase3和PdGS分子功能研究 | 第57页 |
4.3 环境应激对珊瑚Caspase3和GS表达与活性的影响 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
已完成和发表的论文 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |