| 内容提要 | 第1-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-18页 |
| ·引言 | 第9页 |
| ·玉米淀粉合成的基本途径及其关键酶 | 第9-12页 |
| ·玉米淀粉生物合成的基本途径 | 第9-10页 |
| ·玉米淀粉合成关键酶 | 第10-12页 |
| ·淀粉合成研究的国内外现状 | 第12页 |
| ·玉米淀粉生物合成中淀粉合成酶的理化性质及其作用 | 第12-14页 |
| ·淀粉合成酶的理化性质 | 第12-14页 |
| ·玉米可溶性淀粉合成酶(SSs)在淀粉合成中的作用 | 第14页 |
| ·SBE对zSSⅠ的影响 | 第14页 |
| ·酵母双杂交 | 第14-16页 |
| ·酵母双杂交的原理 | 第15页 |
| ·酵母双杂交的优点及应用 | 第15-16页 |
| ·酵母双杂交局限性和存在的问题 | 第16页 |
| ·研究目的和意义 | 第16-17页 |
| ·实验技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 玉米可溶性淀粉合成酶的基因克隆 | 第18-27页 |
| ·仪器和试剂 | 第18-20页 |
| ·植物材料、菌株及质粒 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·引物设计 | 第19-20页 |
| ·常用溶液配制 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-24页 |
| ·玉米籽粒总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·总RNA的逆转录 | 第21-22页 |
| ·玉米SSⅠ、SSⅡb ORF序列的获得 | 第22-23页 |
| ·玉米SSⅢHD ORF序列的获得 | 第23页 |
| ·阳性片段的克隆与测序 | 第23-24页 |
| ·诱饵载体的构建 | 第24页 |
| ·实验结果 | 第24-26页 |
| ·SSⅠ全长cDNA克隆 | 第24页 |
| ·SSⅡb全长cDNA克隆 | 第24-25页 |
| ·SSⅢ保守区cDNA克隆 | 第25-26页 |
| ·pGBKT7-SSⅠ、pGBKT7-SSⅡb、pGBKT7-SSⅢHD的构建 | 第26页 |
| ·本章小结 | 第26-27页 |
| 第三章 玉米籽粒胚乳发育期cDNA表达文库的构建 | 第27-35页 |
| ·仪器和试剂 | 第27-29页 |
| ·植物材料、菌株及质粒 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28-29页 |
| ·引物 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-32页 |
| ·RNA提取 | 第29-30页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第30页 |
| ·通过LD-PCR合成ds cDNA | 第30-32页 |
| ·将ds cDNA与AD载体转入酵母(AH109) | 第32页 |
| ·实验结果 | 第32-34页 |
| ·RNA的提取和cDNA的获得 | 第32-33页 |
| ·酵母cDNA文库的获得 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第四章 SS高通量筛选酵母双杂交文库中的互作蛋白 | 第35-45页 |
| ·仪器和试剂 | 第35-37页 |
| ·菌株及质粒 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·常用溶液配制 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-40页 |
| ·转录激活检测 | 第37-38页 |
| ·测试DNA-BD融合物的毒性 | 第38页 |
| ·酵母杂交筛选 | 第38-39页 |
| ·阳性克隆分析 | 第39页 |
| ·酵母双杂交回转验证 | 第39-40页 |
| ·实验结果 | 第40-44页 |
| ·诱饵质粒自激活检测和毒性测试 | 第40页 |
| ·酵母杂交筛选 | 第40-41页 |
| ·阳性克隆检测 | 第41-44页 |
| ·酵母双杂交回转验证 | 第44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 第五章 SSⅡb和Cyanate hydratase体外相互作用的GST pull-down检测 | 第45-52页 |
| ·仪器和试剂 | 第45-47页 |
| ·菌株及质粒 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·引物 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·常用溶液配制 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·pGEX4T-CH的获得 | 第47-48页 |
| ·大肠杆菌BL21诱导可溶性GST及其融合蛋白的表达 | 第48页 |
| ·酵母蛋白的提取 | 第48页 |
| ·GST pull-down分析 | 第48-49页 |
| ·Western blot分析 | 第49页 |
| ·实验结果 | 第49-51页 |
| ·pGEX4T-1-CH的获得 | 第49-50页 |
| ·大肠杆菌BL21诱导可溶性GST及其融合蛋白的表达 | 第50页 |
| ·SSⅡb和Cyanate hydratase体外GST pull-down检测 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第六章 总结和展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文及其他成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 中文摘要 | 第60-62页 |
| Abstract | 第62-63页 |
