中文摘要 | 第6-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
前言 | 第13-18页 |
第一部分 淡色库蚊抗药性相关蛋白筛选 | 第18-48页 |
材料与方法 | 第18-31页 |
一、实验材料 | 第18-21页 |
(一) 供试蚊 | 第18-19页 |
(二) 主要试剂 | 第19页 |
(三) 主要溶液配方 | 第19-20页 |
(四) 主要仪器 | 第20-21页 |
二、实验方法 | 第21-31页 |
(一) 实验流程 | 第21-23页 |
(二) 收集样本 | 第23页 |
(三) 提取蚊总蛋白 | 第23页 |
(四) 还原烷基化 | 第23-24页 |
(五) 蛋白质定量 | 第24页 |
(六) SDS-PAGE | 第24-25页 |
(七) 蛋白质酶解 | 第25页 |
(八) iTRAQ标记与混合 | 第25页 |
(九) SCX色谱分离 | 第25-26页 |
(十) 液相色谱-串联质谱分析 | 第26页 |
(十一) 生物信息学分析 | 第26-31页 |
结果 | 第31-43页 |
一、蚊总蛋白定量结果 | 第31-32页 |
二、生物信息学分析结果 | 第32-43页 |
讨论 | 第43-48页 |
第二部分 候选蛋白验证 | 第48-85页 |
材料与方法 | 第48-73页 |
一、实验材料 | 第48-53页 |
(一) 供试蚊 | 第48-49页 |
(二) 主要试剂 | 第49-50页 |
(三) 主要溶液配方 | 第50-51页 |
(四) 主要菌株与质粒 | 第51-52页 |
(五) 主要仪器 | 第52-53页 |
二、实验方法 | 第53-73页 |
(一) 实验流程图 | 第53-54页 |
(二) 候选蛋白经实验室种群验证 | 第54-71页 |
(三) 候选蛋白经现场种群验证 | 第71-73页 |
结果 | 第73-83页 |
一、候选蛋白经实验室种群验证 | 第73-81页 |
二、候选蛋白经现场种群验证 | 第81-83页 |
讨论 | 第83-85页 |
第三部分 基于CYP6AA9的蚊抗药性ELISA检测方法初步建立 | 第85-93页 |
材料与方法 | 第85-89页 |
一、实验材料 | 第85-87页 |
(一) 供试蚊 | 第85-86页 |
(二) 主要试剂 | 第86页 |
(三) 主要溶液配方 | 第86页 |
(四) 主要仪器 | 第86-87页 |
二、实验方法 | 第87-89页 |
(一) 蚊总蛋白提取 | 第87-88页 |
(二) 双抗体夹心ELISA法检测CYP6AA9表达 | 第88-89页 |
结果 | 第89-91页 |
讨论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-106页 |
综述 | 第106-124页 |
主要参考文献 | 第116-124页 |
附录:英文缩略词表 | 第124-127页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第127-128页 |
致谢 | 第128-129页 |