| Abstract | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abbreviations | 第10-11页 |
| 第1章 研究背景与文献综述 | 第11-40页 |
| 1.1 CRISPR/Cas系统 | 第11-22页 |
| 1.1.1 CRISPR/Cas系统的研究历史 | 第11页 |
| 1.1.2 CRISPR/Cas系统的结构和组成 | 第11-16页 |
| 1.1.3 CRISPR/Cas系统的作用机制 | 第16-19页 |
| 1.1.4 CISPR/Cas系统的其他功能 | 第19-20页 |
| 1.1.5 CRISPR/Cas系统与噬菌体的共进化 | 第20页 |
| 1.1.6 CRISPR/Cas系统的应用 | 第20-22页 |
| 1.1.7 总结 | 第22页 |
| 1.2 CRISPR/Cas9 | 第22-30页 |
| 1.2.1 CRISPR/Cas9研究背景 | 第22-25页 |
| 1.2.2 CRISPR/Cas9用于基因敲除或者敲入 | 第25页 |
| 1.2.3 CRISPR/Cas9脱靶效应 | 第25-26页 |
| 1.2.4 CRISPR/Cas9用于基因修复 | 第26-27页 |
| 1.2.5 CRISPR/Cas9用于基因调控 | 第27页 |
| 1.2.6 CRISPR/Cas9用于文库筛选 | 第27-28页 |
| 1.2.7 CRISPR/Cas9其他应用 | 第28页 |
| 1.2.8 CRISPR/Cas9生物信息学工具 | 第28页 |
| 1.2.9 CRISPR/Cas9与ZFN和TALEN比较 | 第28-29页 |
| 1.2.10 总结 | 第29-30页 |
| 1.3 参考文献 | 第30-40页 |
| 第2章 利用CRISPR/Cas9构建基因改造小鼠、大鼠和食蟹猴 | 第40-61页 |
| 2.1 前言 | 第40-41页 |
| 2.2 材料与方法 | 第41-47页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第41页 |
| 2.2.2 细胞培养,转染和免疫染色 | 第41页 |
| 2.2.3 载体构建 | 第41-43页 |
| 2.2.4 体外转录 | 第43-44页 |
| 2.2.5 T7EN1切割实验 | 第44-45页 |
| 2.2.6 小鼠—细胞期受精卵注射 | 第45-46页 |
| 2.2.7 大鼠—细胞期受精卵注射 | 第46页 |
| 2.2.8 食蟹猴受精卵获取与显微注射 | 第46-47页 |
| 2.3 结果 | 第47-59页 |
| 2.4 参考文献 | 第59-61页 |
| 第3章 利用最小脱靶效应的CRISPR/Cas9切口酶高效进行基因组改造 | 第61-89页 |
| 3.1 前言 | 第61页 |
| 3.2 材料与方法 | 第61-69页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第61-62页 |
| 3.2.2 载体构建 | 第62页 |
| 3.2.3 体外转录 | 第62页 |
| 3.2.4 细胞培养和电转 | 第62-63页 |
| 3.2.5 T7EN分析 | 第63-64页 |
| 3.2.6 γ-H2AX染色和分析 | 第64-67页 |
| 3.2.7 小鼠—细胞期受精卵注射 | 第67页 |
| 3.2.8 sgRNA的设计和脱靶位点的搜寻 | 第67-68页 |
| 3.2.9 深度测序 | 第68-69页 |
| 3.3 结果 | 第69-87页 |
| 3.4 参考文献 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 发表论文 | 第90-93页 |
