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苦马豆素诱导山羊胎盘滋养层细胞凋亡的信号转导通路研究

摘要第6-9页
ABSTRACT第9-11页
前言第16-17页
文献综述第17-37页
    第一章 胎盘滋养层细胞的研究进展第17-29页
        1.1 滋养层细胞的功能第17-23页
            1.1.1 滋养层细胞与妊娠识别第17-20页
            1.1.2 滋养层细胞与胚胎附植第20-21页
            1.1.3 滋养层细胞与胎盘形成第21-23页
        1.2 胎盘滋养层细胞的体外培养第23-25页
            1.2.1 胎盘滋养层细胞的分离第23-24页
            1.2.2 胎盘滋养层细胞的纯化第24-25页
        1.3 胎盘滋养层细胞的鉴定第25页
        1.4 胎盘滋养层细胞的永生化第25-29页
            1.4.1 端粒(Telomere)和端粒酶(Telomerase)的发现第26页
            1.4.2 端粒和端粒酶的结构与功能第26-27页
            1.4.3 端粒酶与细胞衰老、永生化第27-29页
    第二章 胎盘滋养层细胞与细胞凋亡研究进展第29-37页
        2.1 细胞凋亡的生物学特征第29页
        2.2 细胞凋亡调控的分子基础第29-30页
            2.2.1 Caspase 家族第29-30页
            2.2.2 Bax/Bcl-2 蛋白家族第30页
        2.3 细胞凋亡信号转导通路第30-31页
            2.3.1 死亡受体通路第30-31页
            2.3.2 线粒体通路第31页
        2.4 胎盘滋养层细胞与细胞凋亡第31-35页
            2.4.1 内源性调控因素第32-33页
            2.4.2 外源性调控因素第33-34页
            2.4.3 单核细胞/巨噬细胞第34-35页
        2.5 苦马豆素与细胞凋亡第35页
            2.5.1 苦马豆素和家畜中毒第35页
            2.5.2 苦马豆素的诱导细胞凋亡作用第35页
        2.6 本研究的目的和意义第35-37页
试验研究第37-84页
    第三章 永生化山羊胎盘滋养层细胞系的建立及生物学特性分析第37-59页
        3.1 材料第38-41页
            3.1.1 菌种和细胞第38页
            3.1.2 组织和试验动物第38页
            3.1.3 主要试剂第38页
            3.1.4 试验所用溶液及其配制第38-41页
            3.1.5 主要仪器第41页
        3.2 方法第41-47页
            3.2.1 山羊胎盘滋养层细胞的分离培养第41-42页
            3.2.2 山羊胎盘滋养层细胞的鉴定第42页
            3.2.3 hTERT 基因转染原代山羊胎盘滋养层细胞第42-43页
            3.2.4 转染后山羊胎盘滋养层细胞的鉴定第43页
            3.2.5 外源性 hTERT 基因在转染后山羊胎盘滋养层细胞中的表达第43-46页
            3.2.6 山羊胎盘滋养层细胞生物学特性的分析第46-47页
            3.2.7 统计学分析第47页
        3.3 结果第47-56页
            3.3.1 原代山羊胎盘滋养层细胞的分离第47-48页
            3.3.2 pCI-neo-hTERT 质粒的鉴定第48-49页
            3.3.3 G418 对山羊胎盘滋养层细胞最佳筛选浓度的确定第49页
            3.3.4 转染后阳性细胞的扩大培养第49页
            3.3.5 山羊胎盘滋养层细胞的形态特征第49-50页
            3.3.6 山羊胎盘滋养层细胞的鉴定第50-51页
            3.3.7 hTERT 基因在山羊胎盘滋养层细胞中的表达第51-52页
            3.3.8 山羊胎盘滋养层细胞的生长特性第52-53页
            3.3.9 山羊胎盘滋养层细胞激素分泌功能的检测第53-54页
            3.3.10 体外培养的山羊胎盘滋养层细胞具有侵袭性第54页
            3.3.11 软琼脂克隆形成试验第54-55页
            3.3.12 裸鼠致瘤性试验第55-56页
        3.4 讨论第56-57页
        3.5 小结第57-59页
    第四章 苦马豆素对山羊胎盘滋养层细胞迁移和侵袭功能的影响第59-71页
        4.1 材料第60-61页
            4.1.1 SW 与细胞第60页
            4.1.2 主要试剂第60页
            4.1.3 试验所用溶液及其配制第60-61页
            4.1.4 主要仪器第61页
        4.2 方法第61-64页
            4.2.1 SW 对山羊胎盘滋养层细胞活性的影响第61-62页
            4.2.2 SW 对山羊胎盘滋养层细胞细胞周期的影响第62页
            4.2.3 SW 对山羊胎盘滋养层细胞黏附能力的影响第62-63页
            4.2.4 细胞迁移试验第63页
            4.2.5 细胞侵袭试验第63页
            4.2.6 Western blot 检测第63页
            4.2.7 统计学分析第63-64页
        4.3 结果第64-69页
            4.3.1 SW 对山羊胎盘滋养层细胞活性的影响第64页
            4.3.2 SW 对山羊胎盘滋养层细胞细胞周期的影响第64-65页
            4.3.3 SW 对山羊胎盘滋养层细胞周期蛋白的影响第65页
            4.3.4 SW 对山羊胎盘滋养层细胞黏附能力的影响第65-66页
            4.3.5 SW 对山羊胎盘滋养层细胞迁移能力的影响第66-67页
            4.3.6 SW 对山羊胎盘滋养层细胞侵袭能力的影响第67-68页
            4.3.7 SW 对山羊胎盘滋养层细胞 MT1-MMP、MMP-2 和 TIMP-2 的影响第68-69页
        4.4 讨论第69-70页
        4.5 小结第70-71页
    第五章 苦马豆素诱导山羊胎盘滋养层细胞凋亡的信号转导通路第71-84页
        5.1 材料第72-74页
            5.1.1 SW 与细胞第72页
            5.1.2 主要试剂第72页
            5.1.3 试验所用溶液及其配制第72-73页
            5.1.4 主要仪器第73-74页
        5.2 方法第74-76页
            5.2.1 SW 对山羊胎盘滋养层细胞活性的影响第74页
            5.2.2 SW 对山羊胎盘滋养层细胞形态的影响第74页
            5.2.3 DNA 片段化分析第74-75页
            5.2.4 流式细胞术检测 SW 对山羊胎盘滋养层细胞凋亡率的影响第75页
            5.2.5 蛋白浓度检测第75页
            5.2.6 Caspase 活性检测第75页
            5.2.7 Western blot 检测第75-76页
            5.2.8 TUNEL 试验第76页
            5.2.9 统计学分析第76页
        5.3 结果第76-82页
            5.3.1 SW 对山羊胎盘滋养层细胞活性的影响第76-77页
            5.3.2 SW 诱导山羊胎盘滋养层细胞凋亡的形态学观察第77-78页
            5.3.3 DNA 片段化分析第78页
            5.3.4 SW 对山羊胎盘滋养层细胞凋亡率的影响第78页
            5.3.5 Caspase 级联反应在 SW 诱导山羊胎盘滋养层细胞凋亡中的作用第78-79页
            5.3.6 Caspase 抑制剂对 SW 诱导的山羊胎盘滋养层细胞凋亡的影响第79-80页
            5.3.7 SW 对山羊胎盘滋养层细胞 Fas 和 FasL 表达的影响第80页
            5.3.8 SW 促进山羊胎盘滋养层细胞中 Bax/Bcl-2 比值升高第80-81页
            5.3.9 SW 促进山羊胎盘滋养层细胞线粒体中 Cytochrome c 的释放第81页
            5.3.10 SW 选择性诱导妊娠山羊胎盘组织中滋养层细胞凋亡第81-82页
        5.4 讨论第82-83页
        5.5 小结第83-84页
结论与创新点第84-86页
参考文献第86-99页
缩略词和中英文对照表第99-101页
致谢第101-102页
作者简介第102-103页

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