摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
英文縮写词表 | 第12-13页 |
第1章 前言 | 第13-31页 |
1.1 重金属镉的毒性研究及分子机制概述 | 第13-16页 |
1.1.1 重金属镉的性质及来源 | 第13-14页 |
1.1.2 重金属镉的毒性及其分子机制 | 第14-16页 |
1.2 模式生物黑腹果蝇概述 | 第16-17页 |
1.3 果蝇DNA甲基化研究 | 第17-23页 |
1.3.1 真核生物DNA甲基化概述 | 第17-19页 |
1.3.2 果蝇DNA甲基化修饰特点 | 第19-20页 |
1.3.3 果蝇DNA甲基化修饰系统研究进展 | 第20-23页 |
1.4 果蝇细胞凋亡概述 | 第23-27页 |
1.4.1 真核生物细胞凋亡简介 | 第23-25页 |
1.4.2 果蝇细胞凋亡特点 | 第25页 |
1.4.3 果蝇细胞凋亡相关基因研究进展 | 第25-27页 |
1.5 数字基因表达谱技术简介 | 第27-28页 |
1.6 本研究的内容及意义 | 第28-31页 |
第2章 镉对黑腹果蝇DNA甲基化修饰相关基因表达的影响 | 第31-47页 |
2.1 实验材料 | 第31-32页 |
2.1.1 实验动物 | 第31页 |
2.1.2 实验仪器设备 | 第31页 |
2.1.3 实验主要试剂 | 第31-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-35页 |
2.2.1 果蝇的收集与处理 | 第32页 |
2.2.2 果蝇组织的解剖 | 第32页 |
2.2.3 果蝇总RNA提取 | 第32-33页 |
2.2.4 总RNA质量的检测 | 第33-34页 |
2.2.5 反转录合成cDNA单链 | 第34页 |
2.2.6 引物设计及合成 | 第34-35页 |
2.2.7 Real-time PCR | 第35页 |
2.2.8 数据分析 | 第35页 |
2.3 结果与分析 | 第35-42页 |
2.3.1 RNA完整性及纯度结果 | 第35-36页 |
2.3.2 Real-time PCR引物扩增 | 第36-38页 |
2.3.3 镉对亲代(F_0)果蝇精巢、卵巢dDNMT2及dMBD2/3基因表达的影响 | 第38-39页 |
2.3.4 镉对亲代(F_0)果蝇非精巢、卵巢体细胞dDNMT2及dMBD2/3基因表达的影响 | 第39-40页 |
2.3.5 镉对亲代(F_0)果蝇完整个体dDNMT2及dMBD2/3基因表达的影响 | 第40页 |
2.3.6 镉对子代(F_1)果蝇dDNMT2和dMBD2/3基因表达的影响 | 第40-41页 |
2.3.7 镉对不同组别果蝇dDNMT2和dMBD2/3基因表达的影响比较 | 第41-42页 |
2.4 讨论 | 第42-45页 |
2.4.1 镉诱导果蝇DNA甲基化相关基因的表达改变呈现剂量效应 | 第42-43页 |
2.4.2 镉诱导果蝇DNA甲基化相关基因的表达改变呈现性别和组织差异 | 第43-44页 |
2.4.3 镉诱导果蝇DNA甲基化相关基因表达改变的可遗传性分析 | 第44-45页 |
2.5 结论 | 第45-47页 |
第3章 数字基因表达谱测序分析与果蝇凋亡相关基因的筛选 | 第47-61页 |
3.1 实验材料 | 第47页 |
3.1.1 实验动物的收集与处理 | 第47页 |
3.1.2 实验仪器设备 | 第47页 |
3.1.3 实验主要试剂 | 第47页 |
3.2 实验方法 | 第47-49页 |
3.2.1 果蝇的收集与处理 | 第47-48页 |
3.2.2 果蝇总RNA提取 | 第48页 |
3.2.3 总RNA质量的检测 | 第48页 |
3.2.4 mRNA的纯化与cDNA文库构建、测序 | 第48-49页 |
3.3 实验结果 | 第49-56页 |
3.3.1 RNA完整性及纯度结果 | 第49页 |
3.3.2 表达谱测序原始数据统计 | 第49-50页 |
3.3.3 CK与TG样本间相关性分析 | 第50-52页 |
3.3.4 表达差异基因分析 | 第52页 |
3.3.5 Go基因注释分析及KEGG通路分析 | 第52页 |
3.3.6 与果蝇DNA甲基化相关基因筛选与分析 | 第52-53页 |
3.3.7 与果蝇细胞凋亡相关基因筛选与分析 | 第53-56页 |
3.4 讨论 | 第56-58页 |
3.4.1 清洁标签的获取与比对 | 第56-57页 |
3.4.2 果蝇DNA甲基化及细胞凋亡相关基因的筛选 | 第57-58页 |
3.5 结论 | 第58-61页 |
第4章 重金属镉对果蝇凋亡相关基因表达的影响 | 第61-71页 |
4.1 实验材料 | 第61页 |
4.1.1 实验动物 | 第61页 |
4.1.2 实验仪器设备 | 第61页 |
4.1.3 实验主要试剂 | 第61页 |
4.2 实验方法 | 第61-63页 |
4.2.1 果蝇的收集与处理 | 第61页 |
4.2.2 果蝇总RNA提取 | 第61-62页 |
4.2.3 总RNA质量的检测 | 第62页 |
4.2.4 反转录合成cDNA单链 | 第62页 |
4.2.5 引物设计及合成 | 第62-63页 |
4.2.6 Real-time PCR | 第63页 |
4.2.7 数据分析 | 第63页 |
4.3 结果与分析 | 第63-68页 |
4.3.1 RNA完整性及纯度结果 | 第63-64页 |
4.3.2 Real-time PCR引物扩增结果 | 第64-66页 |
4.3.3 镉对亲代(F_0)p53通路相关基因表达的影响 | 第66-67页 |
4.3.4 镉对亲代(F_0)果蝇Caspase-3通路相关基因表达的影响 | 第67-68页 |
4.4 讨论 | 第68-70页 |
4.4.1 镉对p53-tefu凋亡通路基因的影响 | 第68-69页 |
4.4.2 镉对Caspase-3凋亡信号通路基因的影响 | 第69-70页 |
4.5 结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-85页 |
致谢 | 第85-87页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第87页 |