摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 文献综述 | 第7-19页 |
1.1 引言 | 第7页 |
1.2 动物G蛋白 | 第7-9页 |
1.2.1 动物G蛋白的种类及结构 | 第7-9页 |
1.3 植物G蛋白 | 第9-15页 |
1.3.1 植物G蛋白的种类及结构 | 第10页 |
1.3.2 植物G蛋白的生理功能 | 第10-14页 |
1.3.2.1 生长和形态 | 第10-11页 |
1.3.2.2 G蛋白与激素信号和糖信号有关 | 第11-12页 |
1.3.2.3 G蛋白与气孔 | 第12-13页 |
1.3.2.4 G蛋白与病原胁迫信号 | 第13-14页 |
1.3.3 植物G蛋白的作用机制 | 第14-15页 |
1.4 DEP1的研究进展 | 第15-16页 |
1.5 RACK1参与G蛋白信号通路 | 第16-18页 |
1.6 研究目的以及研究内容 | 第18-19页 |
第二章 水稻G蛋白相互作用蛋白的筛选 | 第19-28页 |
2.1 前言 | 第19-20页 |
2.2 材料与方法 | 第20-23页 |
2.2.1 酵母双杂交质粒与相关试剂 | 第20页 |
2.2.2 利用重组诱饵质粒pGBKT7/RGA1、pGBKT7/RGB1、pGBKT7/RGG1筛选水稻cDNA文库 | 第20-21页 |
2.2.3 重组诱饵质粒pGBKT7/RGA1、pGBKT7/RGB1、pGBKT7/RGG1和猎物空质粒pGADT7/EV共转化酵母菌株AH109 | 第21页 |
2.2.4 重组诱饵质粒pGBKT7/RGA1、pGBKT7/RGB1、pGBKT7/RGG1激活作用及毒性检测 | 第21页 |
2.2.5 cDNA文库筛选 | 第21-22页 |
2.2.6 阳性菌落pGADT7文库质粒测序分析 | 第22-23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-26页 |
2.3.1 重组诱饵质粒pGBKT7/RGA1、pGBKT7/RGB1、pGBKT7/RGG1激活作用及毒性检测 | 第23页 |
2.3.2 酵母AH109与Y187的融合检验 | 第23-24页 |
2.3.3 cDNA文库蹄选结果 | 第24-26页 |
2.4 小结 | 第26-28页 |
第三章 水稻DEP1与异三聚体G蛋白组分相互作用研究及其相互作用蛋白的筛选 | 第28-34页 |
3.1 前言 | 第28页 |
3.2 材料与方法 | 第28-29页 |
3.2.1 实验材料与试剂 | 第28页 |
3.2.2 重组诱饵质粒pGBKT7/DEP1、pGBKT7/dep1和猎物质粒pGADT7/EV共转化酵母菌株AH109 | 第28页 |
3.2.3 水稻DEP1及其突变体dep1与异三聚体G蛋白信号组分相互作用探究 | 第28-29页 |
3.2.4 水稻DEP1及其突变体dep1相互作用蛋白的筛选 | 第29页 |
3.3 结果与分析 | 第29-33页 |
3.3.1 重组诱饵质粒pGBKT7/DEP1、pGBKT7/dep1激活作用及毒性检测 | 第29-30页 |
3.3.2 水稻DEP1及其突变体dep1与异三聚体G蛋白信号组分相互作用 | 第30-31页 |
3.3.3 水稻DEP1及其突变体dep1相互作用蛋白的筛选 | 第31-33页 |
3.4 小结 | 第33-34页 |
第四章 RACK1相互作用蛋白筛选与鉴定 | 第34-45页 |
4.2 前言 | 第34-37页 |
4.2.1 实验材料与试剂 | 第34页 |
4.2.2 重组诱饵质粒pGBKT7/OsRACK1和猎物质粒pGADT7/EV共转化转化酵母菌株AH109 | 第34页 |
4.2.3 OsRACK1A相互作用蛋白的筛选 | 第34-35页 |
4.2.4 水稻蛋白质提取 | 第35页 |
4.2.5 水稻His-OsRACK1蛋白的原核表达 | 第35页 |
4.2.6 Western Blot鉴定His-OsRACK1蛋白 | 第35-36页 |
4.2.7 利用His pull-down方法筛选OsRACK1相互作用蛋白 | 第36-37页 |
4.3 结果与分析 | 第37-43页 |
4.3.1 重组诱饵质粒pGBKT7/OsRACK1激活作用及毒性检测 | 第37页 |
4.3.2 OsRACKl相互作用蛋白的蹄选 | 第37-40页 |
4.3.3 His-OsRACK1蛋白小剂量表达检测 | 第40-41页 |
4.3.4 目的蛋白的表达检测及亲和层析纯化蛋白 | 第41页 |
4.3.5 His-pull down筛选OsRACK1的互作蛋白 | 第41-43页 |
4.4 小结 | 第43-45页 |
第五章 总结与讨论 | 第45-49页 |
参考文献 | 第49-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第59-60页 |