摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第12-20页 |
1 微藻的诱变与应用 | 第12-14页 |
1.1 物理诱变 | 第12-13页 |
1.2 化学诱变 | 第13-14页 |
2 节旋藻诱变育种进展 | 第14-16页 |
3 乙酰辅酶 A 羧化酶研究进展 | 第16-19页 |
3.1 乙酰辅酶 A 羧化酶概述 | 第16-18页 |
3.2 乙酰辅酶 A 羧化酶抑制剂 | 第18-19页 |
4. 论文的立项依据和研究目的 | 第19-20页 |
第二章 节旋藻的诱变选育 | 第20-33页 |
1 材料与方法 | 第20-25页 |
1.1 藻种及其培养 | 第20页 |
1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
1.3 试剂及其配置 | 第21-22页 |
1.4 试验方法 | 第22-25页 |
1.4.1 节旋藻 623 的纯化 | 第22页 |
1.4.2 吸光度-生物量关系的确定 | 第22页 |
1.4.3 亚硝基胍诱变预实验 | 第22-23页 |
1.4.4 喹禾灵筛选预实验 | 第23页 |
1.4.5 突变株筛选 | 第23页 |
1.4.6 突变株生长曲线测定与验证 | 第23页 |
1.4.7 出发株与突变株的形态特征观察 | 第23-24页 |
1.4.8 蛋白含量测定 | 第24页 |
1.4.9 总脂含量测定 | 第24-25页 |
2 实验结果 | 第25-31页 |
2.1 节旋藻培养液吸光度-生物量关系的确定 | 第25页 |
2.2 亚硝基胍诱变预实验 | 第25-26页 |
2.3 喹禾灵筛选预实验 | 第26-27页 |
2.4 突变株筛选 | 第27-28页 |
2.5 出发株 623,突变株 623-8,突变株 623-16 的形态特征观察 | 第28-29页 |
2.6 出发株 623,突变株 623-8,突变株 623-16 的蛋白含量测定 | 第29-30页 |
2.7 出发株 623,突变株 623-8,突变株 623-16 的总脂含量测定 | 第30-31页 |
3 讨论 | 第31-33页 |
3.1 随机诱变与定向选育 | 第31页 |
3.2 不同诱变手段的优劣和本实验对诱变剂的选择 | 第31-32页 |
3.3 喹禾灵筛选高产藻株的原理 | 第32-33页 |
第三章 节旋藻突变株培养条件的优化 | 第33-46页 |
1 材料与方法 | 第33-36页 |
1.1 藻种及其培养 | 第33页 |
1.2 主要仪器 | 第33页 |
1.3 试剂及其配置 | 第33-34页 |
1.4 实验方法 | 第34-36页 |
1.4.1 单因子实验 | 第34页 |
1.4.2 乙酰辅酶 A 羧化酶的提取与活性测定 | 第34-35页 |
1.4.2.1 乙酰辅酶 A 羧化酶的提取与催化丙二酸单酰辅酶 A 的合成 | 第34-35页 |
1.4.2.2 酶联免疫分析测定丙二酸单酰辅酶 A 浓度 | 第35页 |
1.4.3 正交实验优化培养条件 | 第35-36页 |
2 结果与讨论 | 第36-45页 |
2.1 单因子实验结果 | 第36-41页 |
2.1.1 pH 梯度实验 | 第36-38页 |
2.1.2 光照强度梯度实验 | 第38-39页 |
2.1.3 温度梯度实验 | 第39-41页 |
2.2 出发株与突变株的培养条件优化及正交实验结果分析 | 第41-45页 |
3 讨论 | 第45-46页 |
第四章 乙酰辅酶 A 羧化酶基因的克隆 | 第46-68页 |
1 材料与方法 | 第46-52页 |
1.1 藻种及其培养 | 第46页 |
1.2 主要仪器 | 第46-47页 |
1.3 试剂及其配置 | 第47页 |
1.4 实验方法 | 第47-52页 |
1.4.1 节旋藻 DNA 的提取 | 第47-48页 |
1.4.2 引物设计 | 第48-49页 |
1.4.3 乙酰辅酶 A 羧化酶各亚基基因的克隆 | 第49-50页 |
1.4.4 PCR 产物回收 | 第50页 |
1.4.5 E.coli DH5α感受态的制备 | 第50-51页 |
1.4.6 回收产物连入 T-Vector | 第51页 |
1.4.7 平板的制备 | 第51页 |
1.4.8 转化大肠杆菌 E.coli DH5 | 第51页 |
1.4.9 重组子鉴定 | 第51-52页 |
1.4.10 菌种的保存与测序 | 第52页 |
1.4.11 克隆片段测序结果分析 | 第52页 |
2 实验结果与分析 | 第52-68页 |
2.1 ACCase 各亚基 ORF 克隆结果 | 第52-53页 |
2.2 ACCase 各亚基 ORF 测序结果与分析 | 第53-68页 |
2.2.1 羧基转移酶α亚基(α-carboxyltransferase): | 第54-58页 |
2.2.2 羧基转移酶β亚基(β-carboxyltransferase): | 第58-62页 |
2.2.3 生物素羧化酶亚基(biotin carboxylase): | 第62-65页 |
2.2.4 生物素羧基载体蛋白亚基(biotin carboxyl carrier protein): | 第65-68页 |
总结 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
个人简历 | 第81-82页 |