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基于模拟酶切vMIP-II的CCR1受体拮抗多肽的设计与生物活性研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 前言第10-27页
    1.1 病毒巨噬细胞炎性蛋白-II 背景介绍第10-13页
        1.1.1 vMIP-II 的结构第10-11页
        1.1.2 vMIP-II 的生物学功能第11-13页
    1.2 趋化因子受体概述第13-19页
        1.2.1 趋化因子及其受体简介第13-14页
        1.2.2 趋化因子受体参与疾病的发生发展第14-19页
    1.3 CCR1 参与的疾病及病理机制第19-23页
        1.3.1 类风湿关节炎第19-20页
        1.3.2 多发性硬化症第20-21页
        1.3.3 其他疾病第21-23页
    1.4 CCR1 拮抗剂的发展现状第23-24页
    1.5 多肽药物的简介第24页
    1.6 研究背景与意义第24-25页
    1.7 本研究的技术路线第25-27页
第二章 多肽的设计与筛选第27-34页
    2.1 生物信息学对药物的辅助设计第27-28页
    2.2 基于蛋白质结构的多重序列比对第28-30页
    2.3 肽库的建立以及多肽的筛选第30-32页
    2.4 多肽 C18P 的生物信息学分析第32-34页
第三章 多肽的生物活性研究第34-74页
    3.1 实验材料与试剂第34-37页
        3.1.1 主要实验材料及试剂第34-35页
        3.1.2 实验仪器、设备第35-36页
        3.1.3 主要试剂的配制第36-37页
    3.2 实验方法及步骤第37-55页
        3.2.1 多肽 C18P 的合成、纯化与检测第37-38页
        3.2.2 建立表达 CCR1 受体的 HEK293/CCR1 细胞模型第38-43页
        3.2.3 HEK293/CCR1 细胞模型的鉴定第43-46页
        3.2.4 人外周血单个核细胞(PBMCs)的分离第46-47页
        3.2.5 细胞的活力测定及药物的毒性作用第47-48页
        3.2.6 多肽 C18P 的趋化活性实验第48-50页
        3.2.7 多肽 C18P 对细胞内钙离子浓度变化的影响第50-51页
        3.2.8 多肽 C18P 与 CCR1 受体结合实验第51页
        3.2.9 [35S]GTPγS 结合实验第51-52页
        3.2.10 多肽 C18P 对体外内毒素炎症细胞模型的作用第52-54页
        3.2.11 统计学分析第54-55页
    3.3 实验结果第55-74页
        3.3.1 C18P 的合成及检测分析第55-56页
        3.3.2 表达 CCR1 受体的 HEK293/CCR1 细胞的鉴定第56-61页
        3.3.3 多肽 C18P 的细胞毒性分析第61-62页
        3.3.4 多肽 C18P 的趋化及趋化抑制作用分析第62-65页
        3.3.5 多肽 C18P 对 HEK293/CCR1 细胞内钙流变化的影响第65-66页
        3.3.6 多肽 C18P 与 CCR1 受体结合分析第66-67页
        3.3.7 [35S]GTPγS 结合实验第67-68页
        3.3.8 多肽 C18P 对体外内毒素炎症模型的作用第68-74页
第四章 讨论第74-79页
    4.1 VMIP-II 用于多肽筛选的研究基础第74-75页
    4.2 生物信息学分析有助于药物开发,避免盲目性第75-76页
    4.3 多肽的生物活性验证第76-79页
        4.3.1 构建的 HEK293/CCR1 细胞可用于 CCR1 受体功能的研究第76页
        4.3.2 多肽 C18P 是 CCR1 的特异性拮抗剂第76-77页
        4.3.3 多肽影响内毒素炎症细胞模型细胞因子分泌第77-79页
第五章 总结与展望第79-81页
    5.1 全文总结第79页
    5.2 展望第79-81页
参考文献第81-92页
英文缩略词第92-93页
攻读硕士学位期间论文发表情况第93-94页
致谢第94页

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