| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 前言 | 第9-26页 |
| 1.1 花药形态及其发育过程 | 第9-13页 |
| 1.2 绒毡层发育及其功能 | 第13-15页 |
| 1.2.1 绒毡层的发育 | 第13-14页 |
| 1.2.2 绒毡层功能 | 第14-15页 |
| 1.3 绒毡层细胞转录调控网络 | 第15-18页 |
| 1.3.1 早期绒毡层细胞转录调控 | 第15-16页 |
| 1.3.2 绒毡层细胞发育的转录调控 | 第16-18页 |
| 1.4 花粉壁的发育 | 第18-25页 |
| 1.4.1 花粉壁的结构 | 第18-19页 |
| 1.4.2 花粉壁的成分 | 第19-20页 |
| 1.4.3 花粉壁形成过程 | 第20-25页 |
| 1.5 本研究工作主要内容 | 第25-26页 |
| 第2章 材料与方法 | 第26-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第26-27页 |
| 2.1.3 抗生素 | 第27页 |
| 2.1.4 试剂 | 第27-28页 |
| 2.2 实验仪器 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-42页 |
| 2.3.1 拟南芥的种植与培养 | 第28-29页 |
| 2.3.2 植物叶片总DNA提取 | 第29页 |
| 2.3.3 目的基因片段扩增(50 μl KOD酶三步法反应体系) | 第29-30页 |
| 2.3.4 PCR产物DNA片段回收 | 第30页 |
| 2.3.5 中间载体构建 | 第30页 |
| 2.3.6 转化大肠杆菌感受态 | 第30页 |
| 2.3.7 阳性克隆PCR鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.8 碱裂解法小量抽提质粒DNA | 第31页 |
| 2.3.9 酶切体系和连接体系 | 第31页 |
| 2.3.10 转化农杆菌感受态 | 第31页 |
| 2.3.11 植株转化与转基因植株筛选 | 第31-32页 |
| 2.3.12 植株总RNA提取、纯化与反转录 | 第32-33页 |
| 2.3.13 Real-Time PCR分析 | 第33页 |
| 2.3.14 半薄切片 | 第33页 |
| 2.3.15 DIOC2染色 | 第33-34页 |
| 2.3.16 烟草瞬时转化 | 第34页 |
| 2.3.17 原生质体制备与转化 | 第34-35页 |
| 2.3.18 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第35-37页 |
| 2.3.19 原核表达与蛋白纯化 | 第37-38页 |
| 2.3.20 酵母双杂交 | 第38-39页 |
| 2.3.21 凝胶迁移阻滞实验(EMSA) | 第39页 |
| 2.3.22 引物列表 | 第39-42页 |
| 第3章 实验结果 | 第42-67页 |
| 3.1 孢粉素合成相关基因位于转录因子AMS和MS188下游 | 第42-44页 |
| 3.2 MS188下游基因PKSA和PKSB融合GFP标签互补植株构建与鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3 PKSA-GFP、PKSB-GFP和转录因子AMS-GFP、MS188-GFP在花药中的定位分析 | 第45-46页 |
| 3.4 MS188直接结合PKSA、PKSB和NS2的启动子 | 第46-48页 |
| 3.5 MS188能够激活PKSA、PKSB和MS2的表达 | 第48-51页 |
| 3.6 ACOS5、CYP704B1和TKPR1/2融合GFP标签互补植株构建与鉴定 | 第51-53页 |
| 3.7 CYP704B1-GFP、TKPR1/2-GFP和ACOS5-GFP蛋白定位分析 | 第53-55页 |
| 3.8 ACOS5、 CYP704B1和TKPR1/2基因启动子序列分析 | 第55-56页 |
| 3.9 MS188和AMS均能够结合TKPR1、AC0S5.和CYP704B1的启动子 | 第56-58页 |
| 3.10 MS188对比AMS能够更强效激活ACOS5、CYP704B1和TKPR1的表达 | 第58-60页 |
| 3.11 MS188融合SRDX抑制子载体转基因植株的构建与表达分析 | 第60-62页 |
| 3.12、ProAMS::MS188GFP标签植株的孢粉素合成基因的表达分析以及花粉壁脂肪酸染色分析 | 第62-64页 |
| 3.13 转录因子bHLH010与MS188相互作用分析 | 第64-67页 |
| 第4章 讨论 | 第67-73页 |
| 4.1 孢粉素合成功能蛋白定位证明孢粉素前体在药室腔中的合成 | 第67-69页 |
| 4.2 转录因子MS188是激活孢粉素合成基因表达的关键因子 | 第69-70页 |
| 4.3 转录因子AMS和MS188相互作用形成feed-forward loop高效调控孢粉素合成基因的表达 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
