| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 利用植物基因工程方法提高耐热性研究背景 | 第9-10页 |
| 1.2 获得耐热转基因植物 | 第10-12页 |
| 1.2.1 提高热激蛋白表达水平来实现耐热能力的提高 | 第10-11页 |
| 1.2.2 渗透能力变化影响植物耐热水平 | 第11页 |
| 1.2.3 抗氧化和解毒途径来提高植物耐热能力 | 第11-12页 |
| 1.2.4 细胞膜稳定性对耐热性影响 | 第12页 |
| 1.3 调节上游信号元件提高植物耐热能力 | 第12-13页 |
| 1.4 转录因子与植物耐热能力 | 第13-15页 |
| 1.5 本课题研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 基因的克隆及其生物信息学分析 | 第16-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-24页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第16页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第16页 |
| 2.1.3 分子生物学实验用品 | 第16-18页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.1.5 主要试验溶剂和培养基的配制 | 第19-24页 |
| 2.2 玉米 ZmDREB2A 基因的克隆 | 第24-26页 |
| 2.2.1 玉米叶片 RNA 的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 cDNA 第一条链合成 | 第25页 |
| 2.2.3 PCR 反应 | 第25-26页 |
| 2.2.4 ZmDREB2A 基因片段的回收 | 第26页 |
| 2.3 克隆载体 pMD18-T-ZmDREB2A 的构建 | 第26-27页 |
| 2.4 重组质粒大肠杆菌转化 | 第27页 |
| 2.5 ZmDREB2A 基因的测序和生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 2.6 结果与分析 | 第28-37页 |
| 2.6.1 ZmDREB2A 目的片段的获得 | 第28-29页 |
| 2.6.2 pMD18-T-ZmDREB2A 克隆载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.6.3 ZmDREB2A 基因的生物信息学分析 | 第30-37页 |
| 2.7 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 大豆的遗传转化 | 第38-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 菌株和载体 | 第38页 |
| 3.1.2 植物材料 | 第38页 |
| 3.1.3 分子生物学实验用品 | 第38页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第38页 |
| 3.1.5 主要试验溶剂和培养基的配制 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-44页 |
| 3.2.1 pCBM-ZmDREB2A 植物表达载体的构建 | 第39-42页 |
| 3.2.2 农杆菌介导的大豆遗传转化 | 第42-43页 |
| 3.2.3 转基因大豆叶片的小量 DNA 的提取 | 第43页 |
| 3.2.4 转基因大豆 PCR 检测 | 第43-44页 |
| 3.2.5 转基因大豆除草剂检测 | 第44页 |
| 3.2.6 转基因大豆热处理 | 第44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-47页 |
| 3.3.1 植物中表达载体 pCBM-ZmDREB2A 的构建 | 第44-45页 |
| 3.3.2 ZmDREB2A 基因对大豆的转化 | 第45-46页 |
| 3.3.3 转基因大豆耐热实验 | 第46-47页 |
| 3.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-50页 |
| 4.1 基因的选择 | 第48页 |
| 4.2 基因信息学分析 | 第48页 |
| 4.3 载体构建、大豆基因型和农杆菌的选择 | 第48-49页 |
| 4.4 大豆遗传转化体系的优化 | 第49-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 5.1 克隆得到 ZmDREB2A 基因 | 第50页 |
| 5.2 构建 pCBM-ZmDREB2A 热激表达载体 | 第50页 |
| 5.3 Half-seed 大豆组织培养体系建立 | 第50页 |
| 5.4 获得转基因耐热株系 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 攻读硕士期间发表的论文情况 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
