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咖啡因通过NF-κB下调NLRP3对BPD肺保护作用的研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略语第11-15页
第一部分 :咖啡因对BPD新生鼠肺发育结局的影响第15-30页
    1 前言第15-16页
    2 材料和方法第16-22页
        2.1 主要试剂和仪器第16-17页
            2.1.1 主要试剂第16-17页
            2.1.2 主要仪器第17页
        2.2 实验方法第17-22页
            2.2.1 实验动物和分组第17-18页
            2.2.2 BPD新生鼠模型的建立第18页
            2.2.3 咖啡因给药方法第18页
            2.2.4 标本的收集第18页
            2.2.5 肺湿/干重比值第18页
            2.2.6 石蜡标本制备第18-19页
            2.2.7 HE染色第19页
            2.2.8 免疫组化染色第19-20页
            2.2.9 Westernblot方法检测肺组织TGF-β1,cleavedcaspase-3,PCNA和PDGF的蛋白表达第20-21页
            2.2.10 放射状肺泡计数(Radicalalveolarcount,RAC)第21页
            2.2.11 肺泡平均截距(meanlinearintercept,MLI)第21页
            2.2.12 弹力纤维染色第21-22页
            2.2.13 统计学分析第22页
    3 结果第22-28页
        3.1 肺组织湿重/干重比值第22-23页
        3.2 肺形态学改变第23-25页
            3.2.1 HE染色和RAC值、MLI测定第23-25页
            3.2.2 肺弹力纤维染色第25页
        3.3 肺微血管发育评估第25-26页
        3.4 肺组织增殖和凋亡蛋白表达第26-27页
        3.5 肺组织生长因子蛋白的表达第27-28页
    4 讨论第28-29页
    5 结论第29-30页
第二部分 :咖啡因对BPD新生鼠NLRP3表达及其作用的影响第30-42页
    1 前言第30-31页
    2 材料和方法第31-36页
        2.1 主要试剂和仪器第31-33页
            2.1.1 主要试剂第31-32页
            2.1.2 主要仪器第32-33页
        2.2 实验方法第33-36页
            2.2.1 BPD新生鼠模型制备和咖啡因干预第33页
            2.2.2 免疫组织化学染色方法检测NLRP3的蛋白表达和定位第33页
            2.2.3 免疫荧光染色方法检测NLRP3的定位第33页
            2.2.4 Western-blot检测肺组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白表达水平第33-34页
            2.2.5 Real-timePCR检测肺组织NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA表达量第34-36页
            2.2.6 统计学分析第36页
    3 结果第36-39页
        3.1 肺组织中NLRP3蛋白表达和定位(免疫组化染色)第36-37页
        3.2 NLRP3在肺组织的定位和表达(免疫荧光染色)第37页
        3.3 Westernblot检测肺组织NLRP3,caspase-1p10,IL-1β和IL-18蛋白的表达第37-38页
        3.4 RealtimePCR检测肺组织NLRP3、caspasep10,IL-1β和IL-18mRNA的表达第38-39页
        3.5 肺组织NLRP3蛋白的表达水平和IL-1β,IL-18蛋白的相关性分析第39页
    4 讨论第39-41页
    5 结论第41-42页
第三部分 咖啡因通过NF-κB转运障碍介导NLRP3对BPD肺保护作用的研究第42-48页
    1 前言第42-43页
    2 材料和方法第43-45页
        2.1 主要试剂和仪器第43-44页
            2.1.1 主要试剂第43页
            2.1.2 主要仪器第43-44页
        2.2 实验方法第44-45页
            2.2.1 实验动物模型第44页
            2.2.2 免疫组化染色方法检测NF-κB的表达第44页
            2.2.3 Westernblot检测肺组织NF-κB和p-NF-κB蛋白的表达第44-45页
            2.2.4 统计学分析第45页
    3 结果第45-47页
        3.1 肺组织NF-κB的表达和定位(免疫组化染色)第45页
        3.2 Westernblot检测肺组织NF-κB,pNF-κB和pIκBα的蛋白表达第45-46页
        3.3 肺组织中pNF-κB蛋白表达水平和NLRP3蛋白表达相关性分析第46-47页
    4 讨论第47页
    5 结论第47-48页
本研究创新性的自我评价第48-49页
参考文献第49-56页
综述第56-63页
    参考文献第59-63页
攻读学位期间取得的研究成果第63-64页
致谢第64-65页
个人简历第65页

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