摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-15页 |
第一部分 :咖啡因对BPD新生鼠肺发育结局的影响 | 第15-30页 |
1 前言 | 第15-16页 |
2 材料和方法 | 第16-22页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第16-17页 |
2.1.1 主要试剂 | 第16-17页 |
2.1.2 主要仪器 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-22页 |
2.2.1 实验动物和分组 | 第17-18页 |
2.2.2 BPD新生鼠模型的建立 | 第18页 |
2.2.3 咖啡因给药方法 | 第18页 |
2.2.4 标本的收集 | 第18页 |
2.2.5 肺湿/干重比值 | 第18页 |
2.2.6 石蜡标本制备 | 第18-19页 |
2.2.7 HE染色 | 第19页 |
2.2.8 免疫组化染色 | 第19-20页 |
2.2.9 Westernblot方法检测肺组织TGF-β1,cleavedcaspase-3,PCNA和PDGF的蛋白表达 | 第20-21页 |
2.2.10 放射状肺泡计数(Radicalalveolarcount,RAC) | 第21页 |
2.2.11 肺泡平均截距(meanlinearintercept,MLI) | 第21页 |
2.2.12 弹力纤维染色 | 第21-22页 |
2.2.13 统计学分析 | 第22页 |
3 结果 | 第22-28页 |
3.1 肺组织湿重/干重比值 | 第22-23页 |
3.2 肺形态学改变 | 第23-25页 |
3.2.1 HE染色和RAC值、MLI测定 | 第23-25页 |
3.2.2 肺弹力纤维染色 | 第25页 |
3.3 肺微血管发育评估 | 第25-26页 |
3.4 肺组织增殖和凋亡蛋白表达 | 第26-27页 |
3.5 肺组织生长因子蛋白的表达 | 第27-28页 |
4 讨论 | 第28-29页 |
5 结论 | 第29-30页 |
第二部分 :咖啡因对BPD新生鼠NLRP3表达及其作用的影响 | 第30-42页 |
1 前言 | 第30-31页 |
2 材料和方法 | 第31-36页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第31-33页 |
2.1.1 主要试剂 | 第31-32页 |
2.1.2 主要仪器 | 第32-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-36页 |
2.2.1 BPD新生鼠模型制备和咖啡因干预 | 第33页 |
2.2.2 免疫组织化学染色方法检测NLRP3的蛋白表达和定位 | 第33页 |
2.2.3 免疫荧光染色方法检测NLRP3的定位 | 第33页 |
2.2.4 Western-blot检测肺组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白表达水平 | 第33-34页 |
2.2.5 Real-timePCR检测肺组织NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA表达量 | 第34-36页 |
2.2.6 统计学分析 | 第36页 |
3 结果 | 第36-39页 |
3.1 肺组织中NLRP3蛋白表达和定位(免疫组化染色) | 第36-37页 |
3.2 NLRP3在肺组织的定位和表达(免疫荧光染色) | 第37页 |
3.3 Westernblot检测肺组织NLRP3,caspase-1p10,IL-1β和IL-18蛋白的表达 | 第37-38页 |
3.4 RealtimePCR检测肺组织NLRP3、caspasep10,IL-1β和IL-18mRNA的表达 | 第38-39页 |
3.5 肺组织NLRP3蛋白的表达水平和IL-1β,IL-18蛋白的相关性分析 | 第39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
第三部分 咖啡因通过NF-κB转运障碍介导NLRP3对BPD肺保护作用的研究 | 第42-48页 |
1 前言 | 第42-43页 |
2 材料和方法 | 第43-45页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第43-44页 |
2.1.1 主要试剂 | 第43页 |
2.1.2 主要仪器 | 第43-44页 |
2.2 实验方法 | 第44-45页 |
2.2.1 实验动物模型 | 第44页 |
2.2.2 免疫组化染色方法检测NF-κB的表达 | 第44页 |
2.2.3 Westernblot检测肺组织NF-κB和p-NF-κB蛋白的表达 | 第44-45页 |
2.2.4 统计学分析 | 第45页 |
3 结果 | 第45-47页 |
3.1 肺组织NF-κB的表达和定位(免疫组化染色) | 第45页 |
3.2 Westernblot检测肺组织NF-κB,pNF-κB和pIκBα的蛋白表达 | 第45-46页 |
3.3 肺组织中pNF-κB蛋白表达水平和NLRP3蛋白表达相关性分析 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
本研究创新性的自我评价 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
综述 | 第56-63页 |
参考文献 | 第59-63页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
个人简历 | 第65页 |