| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 常用缩写词中英文对照表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 第一部分 MicroRNA标记的挑选和检测方法的建立与优化 | 第17-28页 |
| 1 材料 | 第17-19页 |
| 1.1 样本 | 第17-18页 |
| 1.2 主要仪器 | 第18页 |
| 1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2 方法 | 第19-21页 |
| 2.1 特异性MicroRNA标记分子的选择 | 第19页 |
| 2.2 RealTimePCR检测方法的选择 | 第19页 |
| 2.3 引物设计与评估 | 第19-20页 |
| 2.3.1 引物设计原则 | 第20页 |
| 2.3.2 引物验证指标 | 第20页 |
| 2.4 Real Time PCR体系的构建 | 第20-21页 |
| 2.4.1 逆转录反应 | 第20-21页 |
| 2.4.2 RealTimePCR反应 | 第21页 |
| 3 结果 | 第21-25页 |
| 3.1 RealTimePCR检测方法的选择 | 第21-22页 |
| 3.2 引物设计结果 | 第22-25页 |
| 3.3 体系构建结果 | 第25页 |
| 4 讨论 | 第25-27页 |
| 4.1 引物设计与评估 | 第25-26页 |
| 4.1.1 引物设计 | 第25页 |
| 4.1.2 引物评估 | 第25-26页 |
| 4.2 反应体积的调整 | 第26-27页 |
| 5 结论 | 第27-28页 |
| 第二部分 MicroRNA提取方法研究 | 第28-37页 |
| 1 材料 | 第28-30页 |
| 1.1 样本采集与制备 | 第28-29页 |
| 1.2 主要仪器 | 第29页 |
| 1.3 主要试剂 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-31页 |
| 2.1 提取过程 | 第30-31页 |
| 2.2 RNA质检测标准 | 第31页 |
| 2.2.1 RNA质检测 | 第31页 |
| 2.2.2 RNA完整性分析 | 第31页 |
| 2.2.3 反转录及RealTimePCR检测 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-35页 |
| 3.1 Nanodrop2000c定结果 | 第31-32页 |
| 3.2 琼脂糖凝胶电泳结果 | 第32-33页 |
| 3.3 RealTimePCR结果 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 5 结论 | 第36-37页 |
| 第三部分 实际样本检测与结果分析 | 第37-46页 |
| 1 材料与方法 | 第37-41页 |
| 1.1 材料 | 第37-39页 |
| 1.1.1 样本制备 | 第37-38页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第38页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第38-39页 |
| 1.2 方法 | 第39-41页 |
| 1.2.1 RNA提取 | 第39-40页 |
| 1.2.2 对提取的RNA进行逆转录反应 | 第40页 |
| 1.2.3 对生成的cDNA进行RealTimePCR检测 | 第40页 |
| 1.2.4 统计分析 | 第40-41页 |
| 2 结果 | 第41-43页 |
| 2.1 6种MicroRNA在四种体液中表达差异分析 | 第41页 |
| 2.2 使用PCA模型对四种体液进行主成分分析 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 4 结论 | 第44-46页 |
| 第四部分 检测体系构建与验证 | 第46-55页 |
| 1 材料 | 第46-48页 |
| 1.1 样本采集与制备 | 第46-47页 |
| 1.2 主要仪器 | 第47页 |
| 1.3 主要试剂 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-50页 |
| 2.1 系统稳定性研究 | 第48页 |
| 2.2 系统灵敏度研究 | 第48页 |
| 2.3 实验室间比对研究 | 第48-50页 |
| 3 结果 | 第50-54页 |
| 3.1 系统稳定性研究 | 第50页 |
| 3.2 系统灵敏度研究 | 第50-51页 |
| 3.3 实验室间比对研究 | 第51-54页 |
| 4 讨论 | 第54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 综述 | 第58-69页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 附录 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简历 | 第76页 |
