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猪TLR3基因及SP-C、SP-D基因启动子功能分析

英文缩略词第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-27页
    1.1 猪繁殖与呼吸综合征第12-15页
        1.1.1 PRRSV 生物学特征第12-13页
        1.1.2 PRRS 流行病学第13页
        1.1.3 PRRSV 致病机理第13-14页
        1.1.4 PRRSV 免疫学反应第14-15页
    1.2 模式识别受体第15-16页
    1.3 Toll 样受体 3 基因研究进展第16-22页
        1.3.1 Toll 样受体的研究进展第16-19页
        1.3.2 Toll 样受体 3 基因第19-22页
        1.3.3 基因启动子区单核苷酸多态第22页
    1.4 猪对 PRRSV 抗性差异的研究进展第22-24页
    1.5 肺泡表面活性物质研究进展第24-25页
    1.6 本研究的目的和意义第25-27页
2 材料与方法第27-47页
    2.1 试验材料第27-31页
        2.1.1 试验动物第27页
        2.1.2 样品采集第27页
        2.1.3 主要仪器设备第27-28页
        2.1.4 主要试剂及来源第28-29页
        2.1.5 主要数据库及生物信息学软件第29-30页
        2.1.6 常用试剂的配制第30-31页
    2.2 试验方法第31-46页
        2.2.1 引物序列及 Tm 值第31-32页
        2.2.2 猪组织基因组 DNA 提取第32-33页
        2.2.3 总 RNA 的提取第33-34页
        2.2.4 反转录获得 cDNA第34-35页
        2.2.5 猪 TLR3 实时荧光定量 PCR第35-36页
        2.2.6 猪 TLR3 基因的 mRNA 表达分析第36-37页
        2.2.7 猪 TLR3 基因 5′调控区分析第37-44页
        2.2.8 猪 TLR3 启动子区 SNPs 检测第44页
        2.2.9 猪 SP-C、SP-D 肺组织特异性启动子获得第44-46页
    2.3 统计分析第46-47页
3 结果与分析第47-60页
    3.1 总 RNA 的提取第47-48页
        3.1.1 总 RNA 的检测第47页
        3.1.2 总 RNA 反转录 cDNA第47-48页
    3.2 猪 TLR3 基因的功能研究第48-53页
        3.2.1 TLR3 基因部分编码区的克隆与同源性分析第48-50页
        3.2.2 猪 TLR3 基因的 mRNA 表达分析第50页
        3.2.3 猪 TLR3 基因在攻毒前后 mRNA 表达分析第50-53页
    3.3 猪 TLR3 基因表达调控第53-58页
        3.3.1 猪 TLR3 基因启动子区荧光素酶表达载体构建第53-54页
        3.3.2 猪 TLR3 基因启动子删除试验第54页
        3.3.3 猪 TLR3 基因启动子不同长度片段荧光素酶活性检测第54-55页
        3.3.4 猪 TLR3 基因启动子的生物信息学分析第55页
        3.3.5 猪 TLR3 基因启动子 mutPRE 定点突变第55-57页
        3.3.6 猪 TLR3 启动子 SNPs 检测第57-58页
    3.4 猪 SP-C、SP-D 肺组织特异性表达第58-60页
        3.4.1 猪 SP-C、SP-D 启动子的获得第58页
        3.4.2 猪 SP-C、SP-D 红色荧光蛋白表达载体构建第58页
        3.4.3 猪 SP-C、SP-D 基因启动子肺组织特异性检测第58-60页
4 讨论第60-64页
    4.1 猪 TLR3 基因启动子功能研究第60-63页
    4.2 猪 SP-C、SP-D 基因启动子功能研究第63-64页
5 结论第64-65页
参考文献第65-74页
致谢第74-75页
攻读硕士期间发表论文第75页

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