英文缩略词 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-27页 |
1.1 猪繁殖与呼吸综合征 | 第12-15页 |
1.1.1 PRRSV 生物学特征 | 第12-13页 |
1.1.2 PRRS 流行病学 | 第13页 |
1.1.3 PRRSV 致病机理 | 第13-14页 |
1.1.4 PRRSV 免疫学反应 | 第14-15页 |
1.2 模式识别受体 | 第15-16页 |
1.3 Toll 样受体 3 基因研究进展 | 第16-22页 |
1.3.1 Toll 样受体的研究进展 | 第16-19页 |
1.3.2 Toll 样受体 3 基因 | 第19-22页 |
1.3.3 基因启动子区单核苷酸多态 | 第22页 |
1.4 猪对 PRRSV 抗性差异的研究进展 | 第22-24页 |
1.5 肺泡表面活性物质研究进展 | 第24-25页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
2 材料与方法 | 第27-47页 |
2.1 试验材料 | 第27-31页 |
2.1.1 试验动物 | 第27页 |
2.1.2 样品采集 | 第27页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第27-28页 |
2.1.4 主要试剂及来源 | 第28-29页 |
2.1.5 主要数据库及生物信息学软件 | 第29-30页 |
2.1.6 常用试剂的配制 | 第30-31页 |
2.2 试验方法 | 第31-46页 |
2.2.1 引物序列及 Tm 值 | 第31-32页 |
2.2.2 猪组织基因组 DNA 提取 | 第32-33页 |
2.2.3 总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
2.2.4 反转录获得 cDNA | 第34-35页 |
2.2.5 猪 TLR3 实时荧光定量 PCR | 第35-36页 |
2.2.6 猪 TLR3 基因的 mRNA 表达分析 | 第36-37页 |
2.2.7 猪 TLR3 基因 5′调控区分析 | 第37-44页 |
2.2.8 猪 TLR3 启动子区 SNPs 检测 | 第44页 |
2.2.9 猪 SP-C、SP-D 肺组织特异性启动子获得 | 第44-46页 |
2.3 统计分析 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-60页 |
3.1 总 RNA 的提取 | 第47-48页 |
3.1.1 总 RNA 的检测 | 第47页 |
3.1.2 总 RNA 反转录 cDNA | 第47-48页 |
3.2 猪 TLR3 基因的功能研究 | 第48-53页 |
3.2.1 TLR3 基因部分编码区的克隆与同源性分析 | 第48-50页 |
3.2.2 猪 TLR3 基因的 mRNA 表达分析 | 第50页 |
3.2.3 猪 TLR3 基因在攻毒前后 mRNA 表达分析 | 第50-53页 |
3.3 猪 TLR3 基因表达调控 | 第53-58页 |
3.3.1 猪 TLR3 基因启动子区荧光素酶表达载体构建 | 第53-54页 |
3.3.2 猪 TLR3 基因启动子删除试验 | 第54页 |
3.3.3 猪 TLR3 基因启动子不同长度片段荧光素酶活性检测 | 第54-55页 |
3.3.4 猪 TLR3 基因启动子的生物信息学分析 | 第55页 |
3.3.5 猪 TLR3 基因启动子 mutPRE 定点突变 | 第55-57页 |
3.3.6 猪 TLR3 启动子 SNPs 检测 | 第57-58页 |
3.4 猪 SP-C、SP-D 肺组织特异性表达 | 第58-60页 |
3.4.1 猪 SP-C、SP-D 启动子的获得 | 第58页 |
3.4.2 猪 SP-C、SP-D 红色荧光蛋白表达载体构建 | 第58页 |
3.4.3 猪 SP-C、SP-D 基因启动子肺组织特异性检测 | 第58-60页 |
4 讨论 | 第60-64页 |
4.1 猪 TLR3 基因启动子功能研究 | 第60-63页 |
4.2 猪 SP-C、SP-D 基因启动子功能研究 | 第63-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第75页 |