| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 毒素-抗毒素系统简介 | 第10-11页 |
| 1.2 毒素-抗毒素系统分类 | 第11-12页 |
| 1.3 Ⅱ型毒素-抗毒素(TA)系统 | 第12-14页 |
| 1.4 SO_1444/SO_1445 | 第14-17页 |
| 1.5 课题的目的与意义 | 第17-18页 |
| 1.6 研究内容和研究方案 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-42页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第20-25页 |
| 2.1.1 主要实验仪器 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第20页 |
| 2.1.3 培养基 | 第20-21页 |
| 2.1.4 基因克隆重组相关试剂 | 第21页 |
| 2.1.5 蛋白表达纯化相关试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.6 电泳检测相关试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.7 分子排阻层析试剂 | 第23页 |
| 2.1.8 核磁共振样品缓冲液 | 第23页 |
| 2.1.9 晶体生长条件溶液 | 第23页 |
| 2.1.10 感受态细胞E.coli BL21(DE3)的制备 | 第23-24页 |
| 2.1.11 聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-42页 |
| 2.2.1 SO_1445的N端结构域(SO_1445-N-58)的克隆 | 第25-31页 |
| 2.2.2 重组SO_1445-N-58和重组SO_1445的表达纯化 | 第31-33页 |
| 2.2.3 SO_1445和SO_1445-N-58状态的检测 | 第33-35页 |
| 2.2.4 启动子DNA(19 bp dsDNA)的制备 | 第35页 |
| 2.2.5 SO_1445和SO_1445-N-58分别与19 bp dsDNA的相互作用的检测 | 第35-38页 |
| 2.2.6 蛋白质及其与DNA复合物结构的解析 | 第38-42页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第42-68页 |
| 3.1 SO_1445的N端结构域(SO_1445-N-58)的克隆 | 第42-45页 |
| 3.1.1 SO_1445-N-58的基因扩增 | 第42页 |
| 3.1.2 pET28b-SO_1445质粒载体和PCR产物的双酶切 | 第42-43页 |
| 3.1.3 pET28b质粒载体和SO_1445-N-58基因的连接转化 | 第43页 |
| 3.1.4 阳性克隆的验证 | 第43-44页 |
| 3.1.5 测序结果比对 | 第44-45页 |
| 3.2 重组SO_1445-N-58和重组SO_1445的表达纯化 | 第45-47页 |
| 3.2.1 重组SO_1445-N-58的表达纯化 | 第45-46页 |
| 3.2.2 重组SO_1445的表达纯化 | 第46-47页 |
| 3.3 SO_1445和SO_1445-N-58状态的检测 | 第47-49页 |
| 3.4 启动子DNA(19 bp dsDNA)的制备 | 第49-50页 |
| 3.5 SO_1445和SO_1445-N-58分别与19 bp dsDNA的相互作用的检测 | 第50-57页 |
| 3.5.1 相互作用的ITC检测 | 第50-52页 |
| 3.5.2 相互作用的NMR检测 | 第52-53页 |
| 3.5.3 相互作用的CD检测 | 第53-54页 |
| 3.5.4 相互作用的DLS检测 | 第54-55页 |
| 3.5.5 相互作用的SEC检测 | 第55-57页 |
| 3.6 蛋白质及其与DNA复合物结构的解析 | 第57-68页 |
| 3.6.1 NMR解析 | 第57-60页 |
| 3.6.2 通过X-射线晶体学解析 | 第60-68页 |
| 第四章 结论与展望 | 第68-70页 |
| 4.1 结论 | 第68-69页 |
| 4.2 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
