| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-20页 |
| 1.1 β-木糖苷酶的研究概述 | 第14-16页 |
| 1.1.1 β-木糖苷酶简介 | 第14页 |
| 1.1.2 β-木糖苷酶的应用 | 第14-15页 |
| 1.1.3 β-木糖苷酶的固定化研究 | 第15-16页 |
| 1.2 宏基因组学简介 | 第16-18页 |
| 1.2.1 宏基因组学的概念及研究意义 | 第16页 |
| 1.2.2 宏基因组学研究策略 | 第16-17页 |
| 1.2.3 宏基因组β-木糖苷酶的研究现状 | 第17-18页 |
| 1.3 大肠杆菌及枯草杆菌异源表达概述 | 第18-19页 |
| 1.3.1 大肠杆菌异源表达概况 | 第18页 |
| 1.3.2 枯草杆菌异源表达概况 | 第18-19页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 β-木糖苷酶基因的克隆与表达 | 第20-36页 |
| 2.1 试验材料与仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.2 试验仪器设备 | 第21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 2.2.2 β-木糖苷酶基因的克隆 | 第22-24页 |
| 2.2.3 β-木糖苷酶的诱导表达 | 第24页 |
| 2.2.4 β-木糖苷酶酶学性质分析 | 第24-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-35页 |
| 2.3.1 表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.3.2 β-木糖苷酶基因的克隆 | 第27-30页 |
| 2.3.3 β-木糖苷酶酶学性质分析 | 第30-35页 |
| 2.4 本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 β-木糖苷酶宏基因组区段改组及其筛选 | 第36-56页 |
| 3.1 试验材料与仪器 | 第36-37页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第36-37页 |
| 3.2 试验方法 | 第37-41页 |
| 3.2.1 土壤总DNA的提取 | 第37-38页 |
| 3.2.2 土壤微生物多样性分析 | 第38页 |
| 3.2.3 β-木糖苷酶基因的获取 | 第38-39页 |
| 3.2.4 土壤β-木糖苷酶区段改组文库的构建 | 第39页 |
| 3.2.5 改组后β-木糖苷酶活性菌株的筛选 | 第39页 |
| 3.2.6 序列分析 | 第39-40页 |
| 3.2.7 结构分析 | 第40页 |
| 3.2.8 β-木糖苷酶酶学性质分析 | 第40-41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-55页 |
| 3.3.1 土壤总DNA的提取 | 第41页 |
| 3.3.2 土壤微生物多样性分析 | 第41-45页 |
| 3.3.3 简并引物的设计 | 第45-46页 |
| 3.3.4 土壤宏基因组区段改组文库的构建 | 第46-47页 |
| 3.3.5 β-木糖苷酶活性菌株的筛选 | 第47-48页 |
| 3.3.6 序列分析 | 第48-49页 |
| 3.3.7 结构分析 | 第49-50页 |
| 3.3.8 β-木苷酶酶学性质分析 | 第50-55页 |
| 3.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 枯草杆菌/大肠杆菌双表达质粒的构建 | 第56-69页 |
| 4.1 试验材料与仪器 | 第56-57页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第56-57页 |
| 4.1.2 试验仪器设备 | 第57页 |
| 4.2 试验方法 | 第57-62页 |
| 4.2.1 PANY7-Shuttle质粒的构建 | 第57-60页 |
| 4.2.2 pANY7-Hj-Xyn和pANY7-BH3683质粒的构建 | 第60-61页 |
| 4.2.3 枯草芽孢杆菌的转化 | 第61-62页 |
| 4.2.4 pANY7-Hj-Xyn和pANY7-BH3683在大肠杆菌中表达 | 第62页 |
| 4.2.5 pANY7-Hj-Xyn和pANY7-BH3683在枯草杆菌中表达 | 第62页 |
| 4.3 结果与分析 | 第62-68页 |
| 4.3.1 PANY7-Shuttle质粒的构建 | 第62-65页 |
| 4.3.2 pANY7-Hj-Xyn质粒的构建 | 第65-66页 |
| 4.3.3 pANY7-BH3683质粒的构建 | 第66-67页 |
| 4.3.4 pANY7-Hj-Xyn和pANY7-BH3683在大肠杆菌中表达 | 第67页 |
| 4.3.5 pANY7-Hj-Xyn和pANY7-BH3683在枯草杆菌中表达 | 第67-68页 |
| 4.4 本章小结 | 第68-69页 |
| 第五章 β-木糖苷酶的固定化 | 第69-80页 |
| 5.1 试验材料与仪器 | 第69页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第69页 |
| 5.1.2 仪器设备 | 第69页 |
| 5.2 试验方法 | 第69-72页 |
| 5.2.1 酶液制备 | 第69-70页 |
| 5.2.2 金属-酶杂交体系金属离子筛选 | 第70页 |
| 5.2.3 固定化β-木糖苷酶的制备 | 第70-71页 |
| 5.2.4 固定化β-木糖苷酶酶学性质探究 | 第71-72页 |
| 5.3 结果与分析 | 第72-79页 |
| 5.3.1 酶-金属离子杂化过程分析 | 第72-73页 |
| 5.3.2 金属-酶杂交体系金属离子筛选 | 第73页 |
| 5.3.3 固定化β-木糖苷酶酶学性质探究 | 第73-79页 |
| 5.4 本章小结 | 第79-80页 |
| 第六章 结论与展望 | 第80-83页 |
| 6.1 结论 | 第80-81页 |
| 6.2 展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
