摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩写表 | 第8-10页 |
目录 | 第10-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-42页 |
第一节 水稻花器官发育与基因调控 | 第14-24页 |
1 水稻花器官发育概述 | 第14页 |
2 水稻花序发育 | 第14-19页 |
2.1 水稻花序发育过程 | 第14页 |
2.2 水稻花序发育的基因调控 | 第14-19页 |
3 水稻颖花发育 | 第19-20页 |
3.1 水稻颖花发育过程 | 第19页 |
3.2 水稻颖花发育的基因调控 | 第19-20页 |
4 水稻花药与花粉发育 | 第20-21页 |
4.1 水稻花药与花粉发育过程 | 第20-21页 |
4.2 水稻花粉发育的基因调控 | 第21页 |
5 水稻花器官发育的表观遗传调控 | 第21-24页 |
第二节 植物类受体蛋白激酶 | 第24-42页 |
1 植物类受体蛋白激酶概述 | 第24-25页 |
2 与有性生殖相关的植物类受体蛋白激酶 | 第25-33页 |
2.1 CLAVATA家族与植物花顶端分生组织的分化 | 第25-26页 |
2.2 ERACTA家族与植物花序和花器官的形态建成 | 第26-27页 |
2.3 TNFR-RLKs家族与植物有性生殖 | 第27页 |
2.4 BRI1与植物花器官发育 | 第27-28页 |
2.5 参与配子体发育与受精的植物类受体蛋白激酶 | 第28-32页 |
2.5.1 PRKs与雄配子体发育 | 第28页 |
2.5.2 BAMs与配子体发育 | 第28-29页 |
2.5.3 SERKs与雄配子体发育 | 第29页 |
2.5.4 ERs与配子体发育 | 第29-30页 |
2.5.5 EMS1/EXS与雄配子体发育 | 第30-31页 |
2.5.6 MSP1与水稻配子体发育 | 第31页 |
2.5.7 CrRLK1-L家族与配子体发育 | 第31页 |
2.5.8 其它RLKs与配子体发育 | 第31-32页 |
2.6 自交不亲和 | 第32-33页 |
3 CrRLK1-L类受体蛋白激酶家族研究进展 | 第33-42页 |
3.1 CrRLK1-L类受体蛋白激酶的发现 | 第33页 |
3.2 CrRLK1-L类受体蛋白激酶的家族特点 | 第33-38页 |
3.3 CrRLK1-L类受体蛋白激酶在拟南芥的研究概况 | 第38-41页 |
3.4 CrRLK1-L类受体蛋白激酶在其它植物中的研究 | 第41-42页 |
第二章 材料与方法 | 第42-80页 |
第一节 实验材料 | 第42-44页 |
1 植物材料 | 第42页 |
2 菌种和载体 | 第42页 |
3 实验试剂和仪器 | 第42-44页 |
第二节 实验方法 | 第44-80页 |
1 细菌感受态的制备 | 第44-46页 |
1.1 大肠杆菌感受态的制备 | 第44-45页 |
1.2 农杆菌感受态的制备 | 第45-46页 |
2 细菌感受态的转化 | 第46-47页 |
2.1 大肠杆菌感受态的转化 | 第46-47页 |
2.2 农杆菌感受态的转化 | 第47页 |
3 载体构建 | 第47-52页 |
3.1 RNAi载体构建 | 第47-48页 |
3.2 Pro::GUS载体构建 | 第48页 |
3.3 Pro::GFP载体构建 | 第48-49页 |
3.4 DIS1过表达载体的构建 | 第49页 |
3.5 Trucated过表达载体的构建 | 第49页 |
3.6 DIS1点突变载体的构建 | 第49-50页 |
3.7 DIS1抗原表达载体的构建 | 第50页 |
3.8 DIS1和DIS2激酶活性表达载体的构建 | 第50-51页 |
3.9 拟南芥同源基因功能互补表达载体的构建 | 第51-52页 |
4 阳性克隆鉴定方法 | 第52-53页 |
4.1 质粒小量提取 | 第52页 |
4.2 酶切鉴定 | 第52页 |
4.3 PCR鉴定 | 第52-53页 |
4.4 测序鉴定 | 第53页 |
5 农杆菌介导的植物遗传转化 | 第53-56页 |
5.1 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第53-55页 |
5.2 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第55-56页 |
5.3 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第56页 |
6 转基因植物的鉴定 | 第56-68页 |
6.1 DNA水平的鉴定 | 第56-58页 |
6.2 RNA水平的鉴定 | 第58-62页 |
6.3 Southern杂交 | 第62-65页 |
6.4 蛋白水平的鉴定 | 第65-68页 |
7 GUS染色 | 第68页 |
8 扫描电镜(SEM) | 第68-69页 |
9 水稻成熟花粉活力检测 | 第69-70页 |
10 水稻花粉萌发与伸长实验(苯胺兰染色) | 第70页 |
11 水稻手工杂交 | 第70-72页 |
12 石蜡切片 | 第72-74页 |
13 半薄切片 | 第74-75页 |
14 DIS1多克隆抗体制备 | 第75-78页 |
14.1 重组蛋白诱导表达条件摸索 | 第75页 |
14.2 抗原诱导表达及纯化流程 | 第75-78页 |
14.2.1 DIS1胞内域抗原蛋白诱导表达及纯化流程 | 第75-76页 |
14.2.2 DIS1胞外域抗原蛋白诱导表达及纯化流程 | 第76-77页 |
14.2.3 抗原纯化效果检测 | 第77页 |
14.2.4 SDS-PAGE收集抗原 | 第77-78页 |
15 体外激酶活性检测(in vitro) | 第78-79页 |
16 植物激素处理 | 第79页 |
17 水稻转录本芯片分析 | 第79-80页 |
第三章 结果与分析 | 第80-112页 |
1 DIS1和DIS2 RNA干涉造成水稻花序与颖花发育多种缺陷 | 第80-83页 |
2 DIS1和DIS2 T-DNA插入缺失突变体造成水稻花序和颖花发育轻度异常 | 第83-85页 |
3 edRi和dis1-1水稻突变体的雌蕊和花药有不同程度的发育缺陷 | 第85-87页 |
4 edRi、dis1-1和dis2水稻突变体的花粉形态观察和活力检测 | 第87-89页 |
5 edRi、dis1-1和dis2水稻突变体的花粉萌发、伸长和杂交实验 | 第89-92页 |
6 CoS和AK转基因株系的颖花、雄雌蕊形态及花粉活力分析 | 第92-94页 |
7 DIS1和DIS2的时空表达模式 | 第94-97页 |
8 DIS1和DIS2的亚细胞定位和体外激酶活性分析 | 第97-98页 |
9 DIS1异源转化fer-1可以恢复其育性 | 第98-106页 |
10 其它一些相关结果 | 第106-112页 |
10.1 edRi与dis1-1、dis2突变体的株高和分蘖比较 | 第106-107页 |
10.2 DIS1、DIS2过表达转基因水稻的株高和分蘖比较 | 第107页 |
10.3 edRi与dis1-1的叶片表型及扫描电镜观察 | 第107-110页 |
10.4 DIS1和DIS2与细胞分裂素、生长素的关系 | 第110-112页 |
第四章 讨论 | 第112-118页 |
1 DIS1和DIS2都是质膜定位的功能性RLKS | 第112页 |
2 DIS1和DIS2是水稻花序、颖花和配子体发育所必需的功能重叠基因 | 第112-114页 |
3 DIS1和DIS2具有功能多样性 | 第114-115页 |
4 DIS1和DIS2的作用机制 | 第115-118页 |
结论 | 第118-119页 |
参考文献 | 第119-131页 |
致谢 | 第131-133页 |
个人简历 | 第133页 |