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水稻类受体蛋白激酶DIS1和DIS2的功能研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩写表第8-10页
目录第10-14页
第一章 文献综述第14-42页
    第一节 水稻花器官发育与基因调控第14-24页
        1 水稻花器官发育概述第14页
        2 水稻花序发育第14-19页
            2.1 水稻花序发育过程第14页
            2.2 水稻花序发育的基因调控第14-19页
        3 水稻颖花发育第19-20页
            3.1 水稻颖花发育过程第19页
            3.2 水稻颖花发育的基因调控第19-20页
        4 水稻花药与花粉发育第20-21页
            4.1 水稻花药与花粉发育过程第20-21页
            4.2 水稻花粉发育的基因调控第21页
        5 水稻花器官发育的表观遗传调控第21-24页
    第二节 植物类受体蛋白激酶第24-42页
        1 植物类受体蛋白激酶概述第24-25页
        2 与有性生殖相关的植物类受体蛋白激酶第25-33页
            2.1 CLAVATA家族与植物花顶端分生组织的分化第25-26页
            2.2 ERACTA家族与植物花序和花器官的形态建成第26-27页
            2.3 TNFR-RLKs家族与植物有性生殖第27页
            2.4 BRI1与植物花器官发育第27-28页
            2.5 参与配子体发育与受精的植物类受体蛋白激酶第28-32页
                2.5.1 PRKs与雄配子体发育第28页
                2.5.2 BAMs与配子体发育第28-29页
                2.5.3 SERKs与雄配子体发育第29页
                2.5.4 ERs与配子体发育第29-30页
                2.5.5 EMS1/EXS与雄配子体发育第30-31页
                2.5.6 MSP1与水稻配子体发育第31页
                2.5.7 CrRLK1-L家族与配子体发育第31页
                2.5.8 其它RLKs与配子体发育第31-32页
            2.6 自交不亲和第32-33页
        3 CrRLK1-L类受体蛋白激酶家族研究进展第33-42页
            3.1 CrRLK1-L类受体蛋白激酶的发现第33页
            3.2 CrRLK1-L类受体蛋白激酶的家族特点第33-38页
            3.3 CrRLK1-L类受体蛋白激酶在拟南芥的研究概况第38-41页
            3.4 CrRLK1-L类受体蛋白激酶在其它植物中的研究第41-42页
第二章 材料与方法第42-80页
    第一节 实验材料第42-44页
        1 植物材料第42页
        2 菌种和载体第42页
        3 实验试剂和仪器第42-44页
    第二节 实验方法第44-80页
        1 细菌感受态的制备第44-46页
            1.1 大肠杆菌感受态的制备第44-45页
            1.2 农杆菌感受态的制备第45-46页
        2 细菌感受态的转化第46-47页
            2.1 大肠杆菌感受态的转化第46-47页
            2.2 农杆菌感受态的转化第47页
        3 载体构建第47-52页
            3.1 RNAi载体构建第47-48页
            3.2 Pro::GUS载体构建第48页
            3.3 Pro::GFP载体构建第48-49页
            3.4 DIS1过表达载体的构建第49页
            3.5 Trucated过表达载体的构建第49页
            3.6 DIS1点突变载体的构建第49-50页
            3.7 DIS1抗原表达载体的构建第50页
            3.8 DIS1和DIS2激酶活性表达载体的构建第50-51页
            3.9 拟南芥同源基因功能互补表达载体的构建第51-52页
        4 阳性克隆鉴定方法第52-53页
            4.1 质粒小量提取第52页
            4.2 酶切鉴定第52页
            4.3 PCR鉴定第52-53页
            4.4 测序鉴定第53页
        5 农杆菌介导的植物遗传转化第53-56页
            5.1 农杆菌介导的水稻遗传转化第53-55页
            5.2 农杆菌介导的拟南芥遗传转化第55-56页
            5.3 农杆菌介导的烟草遗传转化第56页
        6 转基因植物的鉴定第56-68页
            6.1 DNA水平的鉴定第56-58页
            6.2 RNA水平的鉴定第58-62页
            6.3 Southern杂交第62-65页
            6.4 蛋白水平的鉴定第65-68页
        7 GUS染色第68页
        8 扫描电镜(SEM)第68-69页
        9 水稻成熟花粉活力检测第69-70页
        10 水稻花粉萌发与伸长实验(苯胺兰染色)第70页
        11 水稻手工杂交第70-72页
        12 石蜡切片第72-74页
        13 半薄切片第74-75页
        14 DIS1多克隆抗体制备第75-78页
            14.1 重组蛋白诱导表达条件摸索第75页
            14.2 抗原诱导表达及纯化流程第75-78页
                14.2.1 DIS1胞内域抗原蛋白诱导表达及纯化流程第75-76页
                14.2.2 DIS1胞外域抗原蛋白诱导表达及纯化流程第76-77页
                14.2.3 抗原纯化效果检测第77页
                14.2.4 SDS-PAGE收集抗原第77-78页
        15 体外激酶活性检测(in vitro)第78-79页
        16 植物激素处理第79页
        17 水稻转录本芯片分析第79-80页
第三章 结果与分析第80-112页
    1 DIS1和DIS2 RNA干涉造成水稻花序与颖花发育多种缺陷第80-83页
    2 DIS1和DIS2 T-DNA插入缺失突变体造成水稻花序和颖花发育轻度异常第83-85页
    3 edRi和dis1-1水稻突变体的雌蕊和花药有不同程度的发育缺陷第85-87页
    4 edRi、dis1-1和dis2水稻突变体的花粉形态观察和活力检测第87-89页
    5 edRi、dis1-1和dis2水稻突变体的花粉萌发、伸长和杂交实验第89-92页
    6 CoS和AK转基因株系的颖花、雄雌蕊形态及花粉活力分析第92-94页
    7 DIS1和DIS2的时空表达模式第94-97页
    8 DIS1和DIS2的亚细胞定位和体外激酶活性分析第97-98页
    9 DIS1异源转化fer-1可以恢复其育性第98-106页
    10 其它一些相关结果第106-112页
        10.1 edRi与dis1-1、dis2突变体的株高和分蘖比较第106-107页
        10.2 DIS1、DIS2过表达转基因水稻的株高和分蘖比较第107页
        10.3 edRi与dis1-1的叶片表型及扫描电镜观察第107-110页
        10.4 DIS1和DIS2与细胞分裂素、生长素的关系第110-112页
第四章 讨论第112-118页
    1 DIS1和DIS2都是质膜定位的功能性RLKS第112页
    2 DIS1和DIS2是水稻花序、颖花和配子体发育所必需的功能重叠基因第112-114页
    3 DIS1和DIS2具有功能多样性第114-115页
    4 DIS1和DIS2的作用机制第115-118页
结论第118-119页
参考文献第119-131页
致谢第131-133页
个人简历第133页

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