| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 序言 | 第12-21页 |
| 1 鱼类抗菌肽的研究进展 | 第12-19页 |
| 1.1 鱼类抗菌肽的分类及生化特点 | 第12-14页 |
| 1.2 鱼类抗菌肽生物学活性与功能 | 第14-15页 |
| 1.3 鱼类抗菌肽的抗菌机制 | 第15页 |
| 1.4 抗菌肽与抗生素的区别 | 第15-16页 |
| 1.5 鱼类抗菌肽研究展望 | 第16页 |
| 1.6 鱼类Hepcidin的研究进展 | 第16-19页 |
| 2 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第一章 军曹鱼Hepcidin基因的全长克隆及序列分析 | 第21-40页 |
| 1 材料与方法 | 第21-31页 |
| 1.1 实验动物 | 第21页 |
| 1.2 菌种与质粒 | 第21页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 1.4 主要试剂 | 第22页 |
| 1.5 主要试剂配置方法 | 第22-23页 |
| 1.6 实验取材及处理 | 第23页 |
| 1.7 脾脏总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 1.8 军曹鱼第一链cDNA的合成 | 第24-25页 |
| 1.9 Hepcidin基因中间片段的获得 | 第25-27页 |
| 1.10 军曹鱼Hepcidin基因3’端RACE | 第27-29页 |
| 1.11 军曹鱼Hepcidin基因5’端RACE | 第29-31页 |
| 1.12 军曹鱼Hepcidin基因序列分析 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-38页 |
| 2.1 总RNA的提取与鉴定 | 第31页 |
| 2.2 RT-PCR法扩增Hepcidin基因中间片段结果 | 第31-32页 |
| 2.3 Hepcidin基因3’端扩增结果 | 第32-33页 |
| 2.4 Hepcidin基因5’端扩增结果 | 第33页 |
| 2.5 核酸和氨基酸序列分析 | 第33-34页 |
| 2.6 Hepcidin亲缘关系分析 | 第34-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 4 小结 | 第39-40页 |
| 第二章 用LPS和鲨鱼弧菌刺激后军曹鱼Hepcidin基因组织表达分析 | 第40-48页 |
| 1 材料与方法 | 第40-43页 |
| 1.1 实验材料 | 第40页 |
| 1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 1.3 主要仪器 | 第40页 |
| 1.4 军曹鱼Hepcidin基因的荧光定量表达分析 | 第40-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-45页 |
| 2.1 军曹鱼Hepcidin基因的组织表达分布 | 第43页 |
| 2.2 腹腔注射刺激后军曹鱼Hepcidin基因的组织表达分布 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 4 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 军曹鱼Hepcidin基因的原核表达 | 第48-62页 |
| 1 材料与方法 | 第48-56页 |
| 1.1 Hepcidin基因来源 | 第48页 |
| 1.2 菌株与质粒 | 第48页 |
| 1.3 主要试剂 | 第48-49页 |
| 1.4 主要仪器 | 第49页 |
| 1.5 原核表达质粒pTYB11-Hepcidin的构建 | 第49-52页 |
| 1.6 抗菌肽Hepcidin的诱导表达 | 第52-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-60页 |
| 2.1 重组表达载体的构建 | 第56-57页 |
| 2.2 重组质粒pTYB11-Hepcidin在E.coliER2566中的表达 | 第57-58页 |
| 2.3 融合蛋白的可溶性表达 | 第58-59页 |
| 2.4 重组蛋白表达含量的定量分析 | 第59页 |
| 2.5 重组Hepcidin蛋白的WesternBlot分析 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| 4 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第70页 |
