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WRKY转录因子SIDRW1和NAC转录因子SISRN1在番茄抗性反应中的功能研究

致谢第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
1 引言第14-31页
    1.1 植物的抗病性第14-22页
        1.1.1 植物对病原菌的识别第15-16页
        1.1.2 组成型防御第16-17页
        1.1.3 诱导型防御第17-19页
        1.1.4 信号途径第19-21页
            1.1.4.1 激素类信号途径第19-20页
            1.1.4.2 MAPK级联信号途径第20-21页
        1.1.5 防卫基因及其产物第21页
        1.1.6 防卫反应的调节机制第21-22页
    1.2 转录因子概述第22-29页
        1.2.1 WRKY转录因子及其在植物抗病中的作用第23-25页
        1.2.2 植物NAC家族及其功能第25-29页
            1.2.2.1 NAC在植物抗生物和非生物胁迫中的作用第26-27页
            1.2.2.2 NAC转录因子表达的调控第27-29页
    1.3 病毒诱导的基因沉默及其在植物基因功能研究中的作用第29-30页
    1.4 本研究的目的意义和主要研究内容第30-31页
2 材料与方法第31-45页
    2.1 植物材料与培养第31页
    2.2 植物总RNA的提取第31页
    2.3 番茄NAC和WRKY转录因子的全长序列的克隆第31-33页
    2.4 番茄NAC和WRKY转录因子基因测序及序列分析第33-34页
    2.5 番茄WRKY和NAC转录因子VIGS载体构建第34-36页
    2.6 VIGS体系的建立与验证第36页
        2.6.1 VIGS体系的建立第36页
        2.6.2 基因沉默的验证第36页
    2.7 瞬时过表达载体的构建第36-37页
    2.8 瞬时过表达体系建立第37页
    2.9 实时定量PCR(RT-qPCR)第37-39页
    2.10 Botrytis cinerea接种第39页
        2.10.1 Botrytis cinerea的培养和孢子收集第39页
        2.10.2 Botrytis cinerea的接种第39页
        2.10.3 Botrytis cinerea的病斑统计第39页
        2.10.4 Botrytis cinerea生长量测定第39页
    2.11 Pseudomonas syringae pv.tomato接种处理第39-40页
    2.12 活性氧的检测第40页
    2.13 氧化和干旱胁迫第40-41页
    2.14 诱导处理第41页
        2.14.1 病原菌诱导第41页
        2.14.2 外源信号分子诱导第41页
    2.15 转录活性分析第41-42页
    2.16 亚细胞定位第42-43页
    2.17 VIGS沉默植株PR基因的表达分析第43-45页
3 WRKY转录因子SIDRW1在番茄与灰霉互作过程中是一个正调控因子第45-64页
    3.1 前言第45页
    3.2 结果与分析第45-61页
        3.2.1 SIDRW1等6个WRKY基因的克隆、鉴定第45-49页
        3.2.2 SIDRW1基因的诱导表达第49页
        3.2.3 SIDRW1可能是一个转录抑制子第49页
        3.2.4 SIDRW1定位于细胞核第49-53页
        3.2.5 SIDRW1基因VIGS沉默效率检验第53-54页
        3.2.6 对Pseudomonas syringae pv.tomato抗病性分析第54-55页
        3.2.7 对Botrytis cinerea的抗病性分析第55-61页
            3.2.7.1 对Botrytis cinerea的抗病表型分析第55-57页
            3.2.7.2 活性氧分析第57-61页
            3.2.7.3 PR基因表达分析第61页
        3.2.8 SIDRW1在番茄抗氧化和干旱胁迫中的作用第61页
    3.3 讨论第61-64页
4 NAC转录因子SISRN1在番茄抗逆方面的调控功能分析第64-83页
    4.1 引言第64页
    4.2 结果与分析第64-78页
        4.2.1 SISRN1基因的克隆及鉴定第64-66页
        4.2.2 SISRN1基因的诱导表达第66-67页
        4.2.3 SISRN1具有转录激活活性第67页
        4.2.4 SISRN1定位于细胞核第67-69页
        4.2.5 SISRN1基因VIGS沉默效率检验第69-70页
        4.2.6 对Pseudomonas syringae pv.tomato抗病性分析第70-72页
        4.2.7 对Booytis cinerea的抗病性分析第72-76页
            4.2.7.1 对Botrytis cinerea的抗病表型分析第72页
            4.2.7.2 活性氧分析第72-75页
            4.2.7.3 PR基因表达分析第75-76页
        4.2.8 SISRN1在番茄抗非生物胁迫中的作用第76-78页
    4.3 讨论第78-83页
参考文献第83-100页
附件:基于烟草脆裂病毒的病毒诱导的基因沉默体系的优化第100-106页

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