| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第14-31页 |
| 1.1 植物的抗病性 | 第14-22页 |
| 1.1.1 植物对病原菌的识别 | 第15-16页 |
| 1.1.2 组成型防御 | 第16-17页 |
| 1.1.3 诱导型防御 | 第17-19页 |
| 1.1.4 信号途径 | 第19-21页 |
| 1.1.4.1 激素类信号途径 | 第19-20页 |
| 1.1.4.2 MAPK级联信号途径 | 第20-21页 |
| 1.1.5 防卫基因及其产物 | 第21页 |
| 1.1.6 防卫反应的调节机制 | 第21-22页 |
| 1.2 转录因子概述 | 第22-29页 |
| 1.2.1 WRKY转录因子及其在植物抗病中的作用 | 第23-25页 |
| 1.2.2 植物NAC家族及其功能 | 第25-29页 |
| 1.2.2.1 NAC在植物抗生物和非生物胁迫中的作用 | 第26-27页 |
| 1.2.2.2 NAC转录因子表达的调控 | 第27-29页 |
| 1.3 病毒诱导的基因沉默及其在植物基因功能研究中的作用 | 第29-30页 |
| 1.4 本研究的目的意义和主要研究内容 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-45页 |
| 2.1 植物材料与培养 | 第31页 |
| 2.2 植物总RNA的提取 | 第31页 |
| 2.3 番茄NAC和WRKY转录因子的全长序列的克隆 | 第31-33页 |
| 2.4 番茄NAC和WRKY转录因子基因测序及序列分析 | 第33-34页 |
| 2.5 番茄WRKY和NAC转录因子VIGS载体构建 | 第34-36页 |
| 2.6 VIGS体系的建立与验证 | 第36页 |
| 2.6.1 VIGS体系的建立 | 第36页 |
| 2.6.2 基因沉默的验证 | 第36页 |
| 2.7 瞬时过表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 2.8 瞬时过表达体系建立 | 第37页 |
| 2.9 实时定量PCR(RT-qPCR) | 第37-39页 |
| 2.10 Botrytis cinerea接种 | 第39页 |
| 2.10.1 Botrytis cinerea的培养和孢子收集 | 第39页 |
| 2.10.2 Botrytis cinerea的接种 | 第39页 |
| 2.10.3 Botrytis cinerea的病斑统计 | 第39页 |
| 2.10.4 Botrytis cinerea生长量测定 | 第39页 |
| 2.11 Pseudomonas syringae pv.tomato接种处理 | 第39-40页 |
| 2.12 活性氧的检测 | 第40页 |
| 2.13 氧化和干旱胁迫 | 第40-41页 |
| 2.14 诱导处理 | 第41页 |
| 2.14.1 病原菌诱导 | 第41页 |
| 2.14.2 外源信号分子诱导 | 第41页 |
| 2.15 转录活性分析 | 第41-42页 |
| 2.16 亚细胞定位 | 第42-43页 |
| 2.17 VIGS沉默植株PR基因的表达分析 | 第43-45页 |
| 3 WRKY转录因子SIDRW1在番茄与灰霉互作过程中是一个正调控因子 | 第45-64页 |
| 3.1 前言 | 第45页 |
| 3.2 结果与分析 | 第45-61页 |
| 3.2.1 SIDRW1等6个WRKY基因的克隆、鉴定 | 第45-49页 |
| 3.2.2 SIDRW1基因的诱导表达 | 第49页 |
| 3.2.3 SIDRW1可能是一个转录抑制子 | 第49页 |
| 3.2.4 SIDRW1定位于细胞核 | 第49-53页 |
| 3.2.5 SIDRW1基因VIGS沉默效率检验 | 第53-54页 |
| 3.2.6 对Pseudomonas syringae pv.tomato抗病性分析 | 第54-55页 |
| 3.2.7 对Botrytis cinerea的抗病性分析 | 第55-61页 |
| 3.2.7.1 对Botrytis cinerea的抗病表型分析 | 第55-57页 |
| 3.2.7.2 活性氧分析 | 第57-61页 |
| 3.2.7.3 PR基因表达分析 | 第61页 |
| 3.2.8 SIDRW1在番茄抗氧化和干旱胁迫中的作用 | 第61页 |
| 3.3 讨论 | 第61-64页 |
| 4 NAC转录因子SISRN1在番茄抗逆方面的调控功能分析 | 第64-83页 |
| 4.1 引言 | 第64页 |
| 4.2 结果与分析 | 第64-78页 |
| 4.2.1 SISRN1基因的克隆及鉴定 | 第64-66页 |
| 4.2.2 SISRN1基因的诱导表达 | 第66-67页 |
| 4.2.3 SISRN1具有转录激活活性 | 第67页 |
| 4.2.4 SISRN1定位于细胞核 | 第67-69页 |
| 4.2.5 SISRN1基因VIGS沉默效率检验 | 第69-70页 |
| 4.2.6 对Pseudomonas syringae pv.tomato抗病性分析 | 第70-72页 |
| 4.2.7 对Booytis cinerea的抗病性分析 | 第72-76页 |
| 4.2.7.1 对Botrytis cinerea的抗病表型分析 | 第72页 |
| 4.2.7.2 活性氧分析 | 第72-75页 |
| 4.2.7.3 PR基因表达分析 | 第75-76页 |
| 4.2.8 SISRN1在番茄抗非生物胁迫中的作用 | 第76-78页 |
| 4.3 讨论 | 第78-83页 |
| 参考文献 | 第83-100页 |
| 附件:基于烟草脆裂病毒的病毒诱导的基因沉默体系的优化 | 第100-106页 |