| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-14页 |
| ·肝细胞癌中的p16甲基化现象 | 第11-12页 |
| ·将来在诊断和治疗方面的应用 | 第12页 |
| ·实验基本构思 | 第12-14页 |
| 第二章 单克隆细胞株的制备 | 第14-31页 |
| 引言 | 第14页 |
| 第一节 实验材料 | 第14-17页 |
| ·材料和抗体 | 第15页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第15-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16-17页 |
| ·载体、细菌菌株、细胞株 | 第17页 |
| 第二节 实验方法 | 第17-25页 |
| ·pcDNA3.1B-HBx和pcDNA3.1B的转化和扩增 | 第17-19页 |
| ·细胞转染 | 第19-20页 |
| ·逆转录PCR检测三种细胞株HBx mRNA的表达 | 第20-22页 |
| ·蛋白质印迹三种细胞株HBx蛋白的表达 | 第22-25页 |
| 第三节 实验结果 | 第25-28页 |
| ·提取的质粒电泳结果 | 第25页 |
| ·携带绿色荧光蛋白质粒转染后的结果 | 第25-27页 |
| ·逆转录PCR检测HBx的mRNA表达 | 第27页 |
| ·蛋白免疫印迹检测HBx蛋白的表达 | 第27-28页 |
| 第四节 实验讨论 | 第28-30页 |
| 第五节 实验小结 | 第30-31页 |
| 第三章 HBX蛋白介导的P16甲基化 | 第31-43页 |
| 引言 | 第31-32页 |
| 第一节 实验材料 | 第32页 |
| ·试剂和抗体 | 第32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32页 |
| 第二节 实验方法 | 第32-38页 |
| ·半定量RT-PCR方法测定p16表达水平 | 第32-33页 |
| ·蛋白免疫印迹检测p16表达情况 | 第33-34页 |
| ·HBx与p16启动子甲基化程度的定性研究 | 第34-38页 |
| 第三节 实验结果 | 第38-39页 |
| ·mRNA水平上观察p16基因转录情况 | 第38页 |
| ·在蛋白质观察p16基因的表达情况 | 第38-39页 |
| ·HBx与p16启动子甲基化关系的定性研究 | 第39页 |
| 第四节 实验讨论 | 第39-42页 |
| 第五节 实验小结 | 第42-43页 |
| 第四章 体外生物学效应 | 第43-56页 |
| 引言 | 第43页 |
| 第一节 实验材料 | 第43-44页 |
| ·试剂 | 第43-44页 |
| ·实验仪器 | 第44页 |
| ·其它试剂与材料 | 第44页 |
| 第二节 实验方法 | 第44-47页 |
| ·细胞冷冻保存及解冻 | 第44-45页 |
| ·细胞形态的观察 | 第45-46页 |
| ·三种细胞增值分析 | 第46页 |
| ·细胞周期分析和凋亡率分析 | 第46-47页 |
| 第三节 实验结果 | 第47-54页 |
| ·三种细胞的镜下照片 | 第47-49页 |
| ·细胞增值水平曲线 | 第49-50页 |
| ·细胞周期分析和细胞凋亡率 | 第50-54页 |
| 第四节 实验讨论 | 第54-55页 |
| 第五节 实验小结 | 第55-56页 |
| 第五章 实验结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 综述 | 第61-67页 |
| 个人简历 | 第67-68页 |