摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
1 前言 | 第11-20页 |
1.1 苏云金芽孢杆菌毒素的分类和基因型的命名 | 第12-13页 |
1.1.1 苏云金芽孢杆菌毒素的分类 | 第12页 |
1.1.2 Bt 伴孢晶体编码基因的命名 | 第12-13页 |
1.1.3 对地下害虫蛴螬有杀虫活性的基因 | 第13页 |
1.2 伴孢晶体的蛋白结构和杀虫机理 | 第13-16页 |
1.2.1 伴孢晶体的蛋白结构 | 第13-14页 |
1.2.2 杀虫晶体蛋白的作用机理 | 第14-16页 |
1.3 Bt 杀虫蛋白的应用 | 第16-18页 |
1.3.1 野生菌株直接工业化生产 | 第16-17页 |
1.3.2 构建工程菌株 | 第17-18页 |
1.3.3 用于转基因植物中,抗病虫害 | 第18页 |
1.4 本论文的研究目的及意义 | 第18-20页 |
2 产伴孢晶体的苏云金芽孢杆菌的菌株筛选 | 第20-33页 |
2.1 材料与试剂 | 第20-22页 |
2.1.1 对照菌株 | 第20页 |
2.1.2 培养基 | 第20-21页 |
2.1.3 仪器设备与试剂 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-27页 |
2.2.1 产伴孢晶体菌株的显微观察初选方法的建立 | 第22-23页 |
2.2.2 cry 基因型鉴定复筛方法的建立 | 第23-27页 |
2.3 结果与讨论 | 第27-32页 |
2.3.1 CGMCC 1.1752 和 CGMCC 1.1754 菌株的显微镜观察 | 第27-28页 |
2.3.2 CGMCC 1.1752 和 CGMCC 1.1754 菌株 cry 基因型鉴定 | 第28-30页 |
2.3.3 伴胞晶体产生菌的筛选 | 第30-31页 |
2.3.4 TS3 菌株的 cry 基因型的鉴定 | 第31-32页 |
2.4 小结 | 第32-33页 |
3 伴胞晶体产生菌 TS3 的鉴定 | 第33-47页 |
3.1 材料与试剂 | 第33-34页 |
3.1.1 菌株与培养基 | 第33页 |
3.1.2 引物与试剂 | 第33-34页 |
3.2 生理生化实验原理 | 第34-36页 |
3.2.1 API 20E 试剂盒 | 第34-35页 |
3.2.2 API 50CH 试剂盒 | 第35-36页 |
3.2.3 API ZYM 试剂盒 | 第36页 |
3.3 实验方法 | 第36-39页 |
3.3.1 菌株 16S rRNA 基因的系统发育分析 | 第36-38页 |
3.3.2 生理生化方法 | 第38-39页 |
3.4 结果与讨论 | 第39-46页 |
3.4.1 16S rRNA 基因的系统发育分析 | 第39-42页 |
3.4.2 生理生化实验结果与分析 | 第42-46页 |
3.5 小结 | 第46-47页 |
4 TS3 菌株的 cry8 型全基因的克隆 | 第47-60页 |
4.1 材料与试剂 | 第47-48页 |
4.1.1 实验菌株 | 第47页 |
4.1.2 PCR 扩增引物 | 第47页 |
4.1.3 试剂与仪器设备 | 第47-48页 |
4.2 实验方法 | 第48-49页 |
4.2.1 菌株培养 | 第48页 |
4.2.2 菌株 cry8 型全基因克隆 | 第48-49页 |
4.3 结果与讨论 | 第49-59页 |
4.4 小结 | 第59-60页 |
5 CGMCC 1.17 52 菌种发酵中的碳源和氮源的优化 | 第60-64页 |
5.1 材料与试剂 | 第60页 |
5.1.1 菌株 | 第60页 |
5.1.2 培养基 | 第60页 |
5.1.3 试剂及溶液 | 第60页 |
5.2 蛋白含量检测的方法 | 第60-61页 |
5.2.1 标准曲线的制定 | 第60-61页 |
5.2.2 发酵培养及测定方法 | 第61页 |
5.3 结果与讨论 | 第61-63页 |
5.3.1 绘制标准曲线 | 第61-62页 |
5.3.2 发酵液中蛋白含量的测定 | 第62-63页 |
5.4 小结 | 第63-64页 |
6 总结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-68页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |