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苏云金芽孢杆菌的筛选与伴孢晶体编码基因的克隆与序列分析

摘要第6-7页
Abstract第7页
1 前言第11-20页
    1.1 苏云金芽孢杆菌毒素的分类和基因型的命名第12-13页
        1.1.1 苏云金芽孢杆菌毒素的分类第12页
        1.1.2 Bt 伴孢晶体编码基因的命名第12-13页
        1.1.3 对地下害虫蛴螬有杀虫活性的基因第13页
    1.2 伴孢晶体的蛋白结构和杀虫机理第13-16页
        1.2.1 伴孢晶体的蛋白结构第13-14页
        1.2.2 杀虫晶体蛋白的作用机理第14-16页
    1.3 Bt 杀虫蛋白的应用第16-18页
        1.3.1 野生菌株直接工业化生产第16-17页
        1.3.2 构建工程菌株第17-18页
        1.3.3 用于转基因植物中,抗病虫害第18页
    1.4 本论文的研究目的及意义第18-20页
2 产伴孢晶体的苏云金芽孢杆菌的菌株筛选第20-33页
    2.1 材料与试剂第20-22页
        2.1.1 对照菌株第20页
        2.1.2 培养基第20-21页
        2.1.3 仪器设备与试剂第21-22页
    2.2 实验方法第22-27页
        2.2.1 产伴孢晶体菌株的显微观察初选方法的建立第22-23页
        2.2.2 cry 基因型鉴定复筛方法的建立第23-27页
    2.3 结果与讨论第27-32页
        2.3.1 CGMCC 1.1752 和 CGMCC 1.1754 菌株的显微镜观察第27-28页
        2.3.2 CGMCC 1.1752 和 CGMCC 1.1754 菌株 cry 基因型鉴定第28-30页
        2.3.3 伴胞晶体产生菌的筛选第30-31页
        2.3.4 TS3 菌株的 cry 基因型的鉴定第31-32页
    2.4 小结第32-33页
3 伴胞晶体产生菌 TS3 的鉴定第33-47页
    3.1 材料与试剂第33-34页
        3.1.1 菌株与培养基第33页
        3.1.2 引物与试剂第33-34页
    3.2 生理生化实验原理第34-36页
        3.2.1 API 20E 试剂盒第34-35页
        3.2.2 API 50CH 试剂盒第35-36页
        3.2.3 API ZYM 试剂盒第36页
    3.3 实验方法第36-39页
        3.3.1 菌株 16S rRNA 基因的系统发育分析第36-38页
        3.3.2 生理生化方法第38-39页
    3.4 结果与讨论第39-46页
        3.4.1 16S rRNA 基因的系统发育分析第39-42页
        3.4.2 生理生化实验结果与分析第42-46页
    3.5 小结第46-47页
4 TS3 菌株的 cry8 型全基因的克隆第47-60页
    4.1 材料与试剂第47-48页
        4.1.1 实验菌株第47页
        4.1.2 PCR 扩增引物第47页
        4.1.3 试剂与仪器设备第47-48页
    4.2 实验方法第48-49页
        4.2.1 菌株培养第48页
        4.2.2 菌株 cry8 型全基因克隆第48-49页
    4.3 结果与讨论第49-59页
    4.4 小结第59-60页
5 CGMCC 1.17 52 菌种发酵中的碳源和氮源的优化第60-64页
    5.1 材料与试剂第60页
        5.1.1 菌株第60页
        5.1.2 培养基第60页
        5.1.3 试剂及溶液第60页
    5.2 蛋白含量检测的方法第60-61页
        5.2.1 标准曲线的制定第60-61页
        5.2.2 发酵培养及测定方法第61页
    5.3 结果与讨论第61-63页
        5.3.1 绘制标准曲线第61-62页
        5.3.2 发酵液中蛋白含量的测定第62-63页
    5.4 小结第63-64页
6 总结第64-65页
参考文献第65-68页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第68-69页
致谢第69-70页

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