| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-32页 |
| 1.1 脂肪酶研究现状 | 第11-15页 |
| 1.1.1 脂肪酶简介 | 第11-12页 |
| 1.1.2 脂肪酶的结构特征 | 第12-14页 |
| 1.1.3 脂肪酶催化特征 | 第14-15页 |
| 1.2 手性伯醇概述 | 第15-18页 |
| 1.2.1 手性伯醇的制备 | 第16页 |
| 1.2.2 脂肪酶拆分手性醇的机理 | 第16-18页 |
| 1.3 酶化学修饰概述 | 第18-25页 |
| 1.3.1 酶化学修饰简介 | 第18-19页 |
| 1.3.2 酶化学修饰的分类 | 第19-24页 |
| 1.3.3 酶化学修饰的应用 | 第24-25页 |
| 1.4 酶蛋白结构表征 | 第25-27页 |
| 1.4.1 圆二色光谱分析 | 第26页 |
| 1.4.2 MALDI-TOF-MS质谱分析 | 第26-27页 |
| 1.5 分子模拟概述 | 第27-30页 |
| 1.5.1 分子模拟方法介绍 | 第27-28页 |
| 1.5.2 分子模拟常用软件 | 第28-29页 |
| 1.5.3 分子模拟在脂肪酶研究中的应用 | 第29-30页 |
| 1.6 本文研究思路和主要内容 | 第30-32页 |
| 第二章 手性醇的动力学拆分 | 第32-43页 |
| 2.1 引言 | 第32页 |
| 2.2 实验材料及方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第32-33页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第33-39页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第39-42页 |
| 2.3.1 手性醇转酯化反应 | 第39-41页 |
| 2.3.2 手性醇酯水解反应 | 第41-42页 |
| 2.4 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 洋葱假单胞菌脂肪酶的化学修饰研究 | 第43-55页 |
| 3.1 引言 | 第43页 |
| 3.2 实验材料及方法 | 第43-47页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第43-44页 |
| 3.2.2 主要实验仪器 | 第44页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第44-47页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第47-54页 |
| 3.3.1 蛋白含量测定结果 | 第47页 |
| 3.3.2 脂肪酶分子氨基酸表面可接触性(ASA)分析结果 | 第47-50页 |
| 3.3.3 脂肪酶化学修饰结果 | 第50-54页 |
| 3.4 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 酪氨酸修饰PcL结构表征 | 第55-67页 |
| 4.1 引言 | 第55页 |
| 4.2 实验试剂与方法 | 第55-61页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第55-56页 |
| 4.2.2 主要实验仪器 | 第56页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第56-61页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第61-66页 |
| 4.3.1 SDS-PAGE结果 | 第61-62页 |
| 4.3.2 修饰失活动力学 | 第62页 |
| 4.3.3 脂肪酶酪氨酸脱乙酰化结果 | 第62-63页 |
| 4.3.4 修饰PcL蛋白质谱分析 | 第63-65页 |
| 4.3.5 圆二色谱结果 | 第65-66页 |
| 4.4 本章小结 | 第66-67页 |
| 第五章 PcL对手性伯醇立体识别机理解析 | 第67-73页 |
| 5.1 引言 | 第67页 |
| 5.2 实验试剂与方法 | 第67-68页 |
| 5.2.1 主要实验仪器 | 第67页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第67-68页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第68-72页 |
| 5.3.1 底物-酶分子对接结果 | 第68-70页 |
| 5.3.2 Tyr~(29)-PcL复合物氢键形成条件考察结果 | 第70-72页 |
| 5.4 本章小结 | 第72-73页 |
| 第六章 结论与展望 | 第73-75页 |
| 6.1 结论 | 第73-74页 |
| 6.1.1 手性醇及对应酯的动力学拆分 | 第73页 |
| 6.1.2 PcL的化学修饰及结构表征 | 第73-74页 |
| 6.1.3 脂肪酶的分子动力学模拟 | 第74页 |
| 6.2 展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 附录 | 第83-95页 |
| 作者简历 | 第95页 |