缩略词 | 第8-9页 |
第一部分 玉米 Mu 转座子插入侧翼序列的分离 | 第9-37页 |
摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-17页 |
1.1 玉米基因组学研究 | 第11页 |
1.2 玉米突变体创制方法 | 第11-12页 |
1.3 Mu 转座子概述 | 第12-14页 |
1.3.1 Mu 因子的发现 | 第12-13页 |
1.3.2 Mu 因子的种类及结构特点 | 第13页 |
1.3.3 Mu 因子转座插入特点 | 第13页 |
1.3.4 Mu 因子的应用 | 第13-14页 |
1.3.5 Mu 因子的调控 | 第14页 |
1.4 Mu 插入侧翼序列的分离方法 | 第14-15页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-23页 |
2.1 植物材料及突变体创制 | 第17页 |
2.2 玉米基因组总 DNA 的提取 | 第17-18页 |
2.3 突变材料的 MuDR 检测 | 第18页 |
2.4 MuTAIL-PCR 方法体系构建及优化 | 第18-22页 |
2.4.1 MuTAIL-PCR 的引物设计 | 第18页 |
2.4.2 MuTAIL-PCR 的流程和体系的优化 | 第18-20页 |
2.4.3 MuTAIL-PCR 的扩增结果检测、回收和测序 | 第20-21页 |
2.4.4 MuDR 插入位点的真实性验证 | 第21页 |
2.4.5 MuTAIL-PCR 的有效性评价 | 第21-22页 |
2.5 Mu- illumina 方法分离 Mu 侧翼序列 | 第22-23页 |
3 结果和分析 | 第23-30页 |
3.1 W22::Mu 和突变体衍生后代群体中的 MuDR 检测 | 第23页 |
3.2 MuTAIL-PCR 体系的优化 | 第23-24页 |
3.2.1 添加甘油和二甲基亚砜(DMSO)对 PCR 产物的影响 | 第23-24页 |
3.2.2 最佳退火温度对 PCR 产物的影响 | 第24页 |
3.3 MuDR 插入侧翼序列的检出效率 | 第24-26页 |
3.4 MuDR 插入侧翼序列的真实性 | 第26-27页 |
3.5 MuTAIL-PCR 分离插入侧翼序列功能 | 第27-28页 |
3.6 Mu-illumina 测序结果 | 第28-30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
4.1 Mu 转座子诱变创制突变体 | 第30页 |
4.2 改良 MuTAIL-PCR 特异性扩增 MuDR 的侧翼序列 | 第30页 |
4.3 改良的 MuTAILPCR 扩增的有效性 | 第30-31页 |
4.4 MuTAIL-PCR 反应体系的优化 | 第31页 |
4.5 Mu-illumina 测序方法的探讨 | 第31-32页 |
5 结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-37页 |
第二部分 玉米白化突变基因定位初探 | 第37-61页 |
摘要 | 第37-38页 |
Abstract | 第38-39页 |
1 引言 | 第39-46页 |
1.1 叶绿素突变及其研究进展 | 第39页 |
1.2 叶绿素的合成 | 第39-41页 |
1.3 叶绿素突变体的遗传方式 | 第41页 |
1.4 叶绿素突变的分子机制 | 第41-43页 |
1.4.1 叶绿素合成过程中的基因突变及血红素的反馈调节 | 第41-42页 |
1.4.2 叶绿素与叶绿体发育和结构的变异 | 第42页 |
1.4.3 核质信号传导途径 | 第42页 |
1.4.4 环境因子的影响 | 第42-43页 |
1.5 叶色突变体应用前景 | 第43页 |
1.6 分子标记与基因定位 | 第43-44页 |
1.6.1 分子标记种类 | 第43-44页 |
1.7 质量性状的基因定位 | 第44-45页 |
1.7.1 近等基因系法 | 第44页 |
1.7.2 分离体分组混合分析法 | 第44页 |
1.7.3 SSR-BSA | 第44-45页 |
1.8 本研究的目的和意义 | 第45-46页 |
2 材料与方法 | 第46-48页 |
2.1 实验材料 | 第46页 |
2.2 突变体叶肉细胞的观察 | 第46页 |
2.2.1 叶片叶肉细胞的观察 | 第46页 |
2.2.2 叶绿体超微结构的观察 | 第46页 |
2.3 叶绿素荧光参数的测量 | 第46-47页 |
2.4 叶绿体色素含量测定 | 第47页 |
2.5 BSA-SSR 分析 | 第47-48页 |
2.5.1 突变基因的定位 | 第47页 |
2.5.2 PCR 扩增 | 第47页 |
2.5.3 电泳 | 第47-48页 |
3 结果与分析 | 第48-54页 |
3.1 突变体的表型特征及遗传分析 | 第48页 |
3.2 突变体叶肉细胞的观察 | 第48-49页 |
3.3 叶绿素及类胡萝卜素含量 | 第49-50页 |
3.4 叶绿素荧光参数分析 | 第50页 |
3.5 白化突变基因的定位 | 第50-54页 |
3.5.1 多态性引物的筛选及 BSA 分析 | 第50-51页 |
3.5.2 两个目标区域内的相关基因及其功能 | 第51-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
4.1 玉米白化突变体研究 | 第54页 |
4.2 玉米白化突变体的基因定位 | 第54-55页 |
4.3 玉米白化突变体的应用 | 第55-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
附录 | 第61-68页 |
附录 A | 第61页 |
附录 B | 第61-62页 |
附录 C | 第62-63页 |
附录 D | 第63-64页 |
附录 E | 第64-65页 |
附录 F | 第65-68页 |
在读期间发表的学术论文 | 第68-69页 |
作者简介 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |