摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 引言 | 第9-17页 |
1.1 青霉素类药物简介 | 第9-10页 |
1.2 药理作用、药动学及耐药性 | 第10-11页 |
1.2.1 药理作用 | 第10页 |
1.2.2 药动学 | 第10页 |
1.2.3 耐药性 | 第10-11页 |
1.3 应用及残留危害 | 第11-12页 |
1.4 国内外残留检测研究进展 | 第12-13页 |
1.5 人工抗原的制备方法 | 第13-15页 |
1.6 样品提取方法 | 第15-16页 |
1.7 研究目的和意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-31页 |
2.1 试验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 合成抗原所用试剂 | 第17页 |
2.1.2 免疫用试剂 | 第17页 |
2.1.3 ELISA 检测用试剂及溶液 | 第17-18页 |
2.1.4 单克隆抗体制备用试剂及溶液 | 第18-19页 |
2.2 仪器与设备 | 第19页 |
2.3 试验动物和细胞 | 第19页 |
2.4 通用半抗原的制备 | 第19-20页 |
2.4.1 半抗原 1(PAPA)的合成 | 第19-20页 |
2.4.2 半抗原 2(HAHA)的合成 | 第20页 |
2.5 通用完全抗原的制备 | 第20-22页 |
2.5.1 免疫抗原的制备 | 第20-21页 |
2.5.2 包被抗原的制备 | 第21-22页 |
2.6 完全抗原的鉴定 | 第22页 |
2.6.1 偶联物浓度测定 | 第22页 |
2.6.2 偶联物的鉴定 | 第22页 |
2.7 动物免疫 | 第22-23页 |
2.7.1 免疫程序 | 第22页 |
2.7.2 血清效价测定 | 第22-23页 |
2.8 杂交瘤细胞的制备 | 第23-25页 |
2.8.1 饲养细胞悬液的制备 | 第23页 |
2.8.2 SP2/0 骨髓瘤细胞悬液的制备 | 第23-24页 |
2.8.3 脾细胞悬液的制备 | 第24页 |
2.8.4 细胞融合 | 第24-25页 |
2.9 杂交瘤细胞的筛选与克隆 | 第25-26页 |
2.9.1 杂交瘤细胞的筛选 | 第25页 |
2.9.2 阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第25-26页 |
2.10 杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第26页 |
2.10.1 细胞的冻存 | 第26页 |
2.10.2 细胞的复苏 | 第26页 |
2.11 单克隆抗体的制备与纯化 | 第26-27页 |
2.11.1 单克隆抗体的制备 | 第26-27页 |
2.11.2 单克隆抗体的纯化 | 第27页 |
2.12 单克隆抗体性质的鉴定 | 第27-28页 |
2.12.1 抗体浓度测定 | 第27页 |
2.12.2 抗体特异性鉴定 | 第27-28页 |
2.13 ELISA 检测方法的建立 | 第28-29页 |
2.13.1 ELISA 操作程序 | 第28页 |
2.13.2 间接竞争 ELISA 操作程序 | 第28页 |
2.13.3 抗原和抗体工作浓度的确定 | 第28页 |
2.13.4 间接竞争 ELISA 法相关参数的测定和计算 | 第28-29页 |
2.14 添加回收试验 | 第29-31页 |
2.14.1 样品提取 | 第29页 |
2.14.2 标准曲线的绘制 | 第29-30页 |
2.14.3 添加回收率的测定 | 第30页 |
2.14.4 回收率的计算 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-43页 |
3.1 半抗原的鉴定 | 第31页 |
3.2 抗原鉴定 | 第31-33页 |
3.2.1 偶联物浓度的测定 | 第31页 |
3.2.2 紫外分光光度法鉴定 | 第31-33页 |
3.3 ELISA 检测方法的建立 | 第33-35页 |
3.3.1 包被抗原和血清的工作浓度 | 第33页 |
3.3.2 血清特异性 | 第33-35页 |
3.4 杂交瘤细胞株的建立 | 第35-36页 |
3.5 单克隆抗体的制备与鉴定 | 第36-40页 |
3.5.1 两株细胞上清效价及抑制的测定 | 第36-37页 |
3.5.2 腹水的制备 | 第37-40页 |
3.6 样品基质干扰 | 第40页 |
3.7 标准曲线 | 第40-42页 |
3.8 添加回收率 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
4.1 残留分析方法 | 第43页 |
4.2 半抗原与人工抗原 | 第43-44页 |
4.3 动物免疫 | 第44页 |
4.4 单克隆抗体 | 第44-45页 |
4.5 交叉反应性 | 第45页 |
4.6 ELISA 方法 | 第45-46页 |
4.7 添加回收试验 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
作者简介 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |