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牛奶中青霉素类药物多残留免疫检测方法研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 引言第9-17页
    1.1 青霉素类药物简介第9-10页
    1.2 药理作用、药动学及耐药性第10-11页
        1.2.1 药理作用第10页
        1.2.2 药动学第10页
        1.2.3 耐药性第10-11页
    1.3 应用及残留危害第11-12页
    1.4 国内外残留检测研究进展第12-13页
    1.5 人工抗原的制备方法第13-15页
    1.6 样品提取方法第15-16页
    1.7 研究目的和意义第16-17页
2 材料与方法第17-31页
    2.1 试验材料第17-19页
        2.1.1 合成抗原所用试剂第17页
        2.1.2 免疫用试剂第17页
        2.1.3 ELISA 检测用试剂及溶液第17-18页
        2.1.4 单克隆抗体制备用试剂及溶液第18-19页
    2.2 仪器与设备第19页
    2.3 试验动物和细胞第19页
    2.4 通用半抗原的制备第19-20页
        2.4.1 半抗原 1(PAPA)的合成第19-20页
        2.4.2 半抗原 2(HAHA)的合成第20页
    2.5 通用完全抗原的制备第20-22页
        2.5.1 免疫抗原的制备第20-21页
        2.5.2 包被抗原的制备第21-22页
    2.6 完全抗原的鉴定第22页
        2.6.1 偶联物浓度测定第22页
        2.6.2 偶联物的鉴定第22页
    2.7 动物免疫第22-23页
        2.7.1 免疫程序第22页
        2.7.2 血清效价测定第22-23页
    2.8 杂交瘤细胞的制备第23-25页
        2.8.1 饲养细胞悬液的制备第23页
        2.8.2 SP2/0 骨髓瘤细胞悬液的制备第23-24页
        2.8.3 脾细胞悬液的制备第24页
        2.8.4 细胞融合第24-25页
    2.9 杂交瘤细胞的筛选与克隆第25-26页
        2.9.1 杂交瘤细胞的筛选第25页
        2.9.2 阳性杂交瘤细胞的克隆化第25-26页
    2.10 杂交瘤细胞的冻存与复苏第26页
        2.10.1 细胞的冻存第26页
        2.10.2 细胞的复苏第26页
    2.11 单克隆抗体的制备与纯化第26-27页
        2.11.1 单克隆抗体的制备第26-27页
        2.11.2 单克隆抗体的纯化第27页
    2.12 单克隆抗体性质的鉴定第27-28页
        2.12.1 抗体浓度测定第27页
        2.12.2 抗体特异性鉴定第27-28页
    2.13 ELISA 检测方法的建立第28-29页
        2.13.1 ELISA 操作程序第28页
        2.13.2 间接竞争 ELISA 操作程序第28页
        2.13.3 抗原和抗体工作浓度的确定第28页
        2.13.4 间接竞争 ELISA 法相关参数的测定和计算第28-29页
    2.14 添加回收试验第29-31页
        2.14.1 样品提取第29页
        2.14.2 标准曲线的绘制第29-30页
        2.14.3 添加回收率的测定第30页
        2.14.4 回收率的计算第30-31页
3 结果与分析第31-43页
    3.1 半抗原的鉴定第31页
    3.2 抗原鉴定第31-33页
        3.2.1 偶联物浓度的测定第31页
        3.2.2 紫外分光光度法鉴定第31-33页
    3.3 ELISA 检测方法的建立第33-35页
        3.3.1 包被抗原和血清的工作浓度第33页
        3.3.2 血清特异性第33-35页
    3.4 杂交瘤细胞株的建立第35-36页
    3.5 单克隆抗体的制备与鉴定第36-40页
        3.5.1 两株细胞上清效价及抑制的测定第36-37页
        3.5.2 腹水的制备第37-40页
    3.6 样品基质干扰第40页
    3.7 标准曲线第40-42页
    3.8 添加回收率第42-43页
4 讨论第43-47页
    4.1 残留分析方法第43页
    4.2 半抗原与人工抗原第43-44页
    4.3 动物免疫第44页
    4.4 单克隆抗体第44-45页
    4.5 交叉反应性第45页
    4.6 ELISA 方法第45-46页
    4.7 添加回收试验第46-47页
5 结论第47-48页
参考文献第48-54页
作者简介第54-55页
致谢第55-56页

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