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大草蛉嗅觉相关蛋白基因的鉴定及功能研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
英文缩略表第18-19页
第一章 引言第19-37页
    1.1 昆虫的触角感器第20-23页
        1.1.1 昆虫触角的类型第20-21页
        1.1.2 昆虫触角嗅觉感受器的种类、形态、结构与功能第21-23页
    1.2 昆虫触角气味认知的分子机制第23-24页
    1.3 昆虫气味结合蛋白OBPs研究概述第24-28页
        1.3.1 气味结合蛋白OBPs种类第24-25页
        1.3.2 气味结合蛋白OBPs的表达特征第25-26页
        1.3.3 气味结合蛋白OBPs的结合特性第26页
        1.3.4 气味结合蛋白OBPs的三维结构第26-27页
        1.3.5 气味结合蛋白OBPs的生理功能第27-28页
    1.4 昆虫化学感受蛋白CSPs研究概述第28-30页
        1.4.1 化学感受蛋白CSPs的基因结构及进化特点第28页
        1.4.2 昆虫化学感受蛋白CSPs的表达分布第28-29页
        1.4.3 昆虫化学感受蛋白CSPs的结构特点第29页
        1.4.4 昆虫化学感受蛋白CSPs的生理功能第29-30页
    1.5 昆虫嗅觉受体ORs研究概述第30-32页
        1.5.1 昆虫嗅觉受体ORs的表达分布第30页
        1.5.2 昆虫嗅觉受体ORs的结构特点第30-31页
        1.5.3 昆虫嗅觉受体ORs的功能研究第31-32页
    1.6 离子型受体IRs第32-33页
    1.7 昆虫感觉神经元膜蛋白SNMPs研究概述第33-34页
    1.8 研究思路第34-37页
        1.8.1 立题依据第34-35页
        1.8.2 技术路线第35-37页
第二章 大草蛉触角感器的扫描电镜观察第37-42页
    2.1 材料与方法第37-38页
        2.1.1 供试昆虫第37页
        2.1.2 样品的制备与观察第37-38页
        2.1.3 触角感器的鉴定与命名第38页
    2.2 结果与分析第38-39页
        2.2.1 毛形感器(sensilla trichodea, ST)第38-39页
        2.2.2 刺形感器(sensilla chaetica, SC)第39页
        2.2.3 锥形感器(sensilla basiconica, SB)第39页
        2.2.4 B?hm氏鬃毛 (B?hm bristles, BB)第39页
    2.3 讨论第39-42页
第三章 基于Illumina RNA Denovo高通量测序的大草蛉嗅觉相关基因的发掘第42-67页
    3.1 材料与方法第42-54页
        3.1.1 触角cDNA文库构建和Solexa TruSeq RNA测序第42-43页
        3.1.2 大草蛉触角转录组生物信息学分析第43-44页
        3.1.3 大草蛉嗅觉相关基因的鉴定第44页
        3.1.4 生物信息学分析第44页
        3.1.5 大草蛉嗅觉基因的表达谱研究(RT-PCR和qRT-PCR)第44-54页
    3.2 结果与分析第54-59页
        3.2.1 序列组装第54-55页
        3.2.2 同源比对第55页
        3.2.3 大草蛉触角unigenes的Gene Ontology (GO)功能分类第55-56页
        3.2.4 大草蛉气味结合蛋白OBPs基因的鉴定及组织表达谱分析第56-57页
        3.2.5 大草蛉气味结合蛋白CSPs基因的鉴定及组织表达谱分析第57页
        3.2.6 大草蛉气味受体基因ORs的鉴定及组织表达谱分析第57页
        3.2.7 大草蛉离子型受体基因IRs的鉴定及组织表达谱分析第57-58页
        3.2.8 大草蛉味觉受体基因GRs的鉴定及组织表达谱分析第58页
        3.2.9 大草蛉感觉神经元膜蛋白基因SNMPs的鉴定及组织表达谱分析第58-59页
    3.3 讨论第59-67页
第四章 大草蛉气味结合蛋白和化学感受蛋白的研究第67-95页
    4.1 材料与方法第68-75页
        4.1.1 主要试剂第68页
        4.1.2 气味化合物标样第68页
        4.1.3 昆虫饲养和材料准备第68页
        4.1.4 大草蛉各组织总RNA的提取第68页
        4.1.5 cDNA的合成第68-69页
        4.1.6 大草蛉OBPs基因和CSPs基因的编码区序列克隆第69-70页
        4.1.7 序列分析和进化树构建第70页
        4.1.8 大草蛉OBPs基因和CSPs基因的表达谱分析第70-71页
        4.1.9 大草蛉CpalCSP1蛋白和CpalCSP3蛋白的原核表达第71-72页
        4.1.10 目的蛋白的Western blot检测第72页
        4.1.11 目的蛋白的纯化第72-73页
        4.1.12 荧光竞争结合实验第73页
        4.1.13 大草蛉CpalCSP1蛋白的三维结构预测第73-75页
    4.2 结果与分析第75-91页
        4.2.1 序列分析第75-76页
        4.2.2 序列比对及进化树构建第76-83页
        4.2.3 大草蛉OBPs基因的组织表达谱分析第83-84页
        4.2.4 大草蛉CSPs基因的组织表达谱分析第84-85页
        4.2.5 大草蛉CpalCSP1和CpalCSP3蛋白的原核表达第85-86页
        4.2.6 荧光竞争结合实验第86-90页
        4.2.7 大草蛉化学感受蛋白CpalCSP1的三维结构预测第90-91页
    4.3 讨论第91-95页
第五章 大草蛉成虫触角电位研究第95-100页
    5.1 材料与方法第95-96页
        5.1.1 供试昆虫第95页
        5.1.2 样品的制备第95页
        5.1.3 触角电位(EAG)测定第95-96页
        5.1.4 数据分析第96页
    5.2 结果与分析第96-97页
    5.3 讨论第97-100页
第六章 大草蛉感觉神经元膜蛋白基因的研究第100-116页
    6.1 材料和方法第100-104页
        6.1.1 主要试剂第100-101页
        6.1.2 昆虫饲养和材料准备第101页
        6.1.3 RNA提取第101页
        6.1.4 第一链cDNA的合成第101-102页
        6.1.5 大草蛉SNMP基因片段的克隆第102页
        6.1.6 大草蛉SNMP全长基因的克隆第102-103页
        6.1.7 生物信息学分析第103页
        6.1.8 大草蛉SNMP基因的表达谱研究第103-104页
    6.2 结果与分析第104-113页
        6.2.1 大草蛉SNMP基因的序列分析第104页
        6.2.2 大草蛉SNMP蛋白序列比对及进化树构建第104-111页
        6.2.3 大草蛉SNMP基因在不同组织间的表达谱研究第111页
        6.2.4 大草蛉SNMP基因在不同发育龄期个体之间的表达谱研究第111页
        6.2.5 大草蛉SNMP基因在不同发育阶段成虫触角之间的表达谱研究第111页
        6.2.6 大草蛉雌、雄成虫交配对SNMP基因表达量的影响第111-113页
    6.3 讨论第113-116页
第七章 全文结论与展望第116-121页
    7.1 大草蛉触角扫描电镜观察第116页
    7.2 基于大草蛉触角转录组测序基础上嗅觉相关基因的鉴定第116-117页
    7.3 大草蛉气味结合蛋白和化学感受蛋白的研究第117-118页
    7.4 大草蛉成虫触角电生理反应研究第118-119页
    7.5 大草蛉感觉神经元膜蛋白基因的研究第119页
    7.6 本研究存在的不足及展望第119-121页
参考文献第121-137页
致谢第137-138页
作者简历第138-139页

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