| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第13-17页 |
| 1.1 课题来源、研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| 1.2 国内外研究概况 | 第14-15页 |
| 1.3 论文的主要研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-33页 |
| 2.1 材料 | 第17-21页 |
| 2.1.1 组织标本 | 第17页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第17页 |
| 2.1.3 试剂 | 第17-21页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-33页 |
| 2.2.1 Western Blot | 第21-24页 |
| 2.2.2 病理切片的免疫组化 | 第24-27页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第27页 |
| 2.2.4 质粒 | 第27页 |
| 2.2.5 全长质粒构建 | 第27-30页 |
| 2.2.6 利用脂质体Lipofectamine 2000 瞬时转染HepG2细胞 | 第30页 |
| 2.2.7 流式细胞仪(FCM)检测细胞周期分布 | 第30-31页 |
| 2.2.8 CCK-8 (cell counting kit-8)法检测细胞增殖活性 | 第31页 |
| 2.2.9 细胞免疫荧光 | 第31-32页 |
| 2.2.10 核浆分离 | 第32页 |
| 2.2.11 统计学分析 | 第32-33页 |
| 第三章 结果 | 第33-44页 |
| 3.1 p27~(kip1)在HCC细胞系中具有O-GlcNAc修饰 | 第33-35页 |
| 3.1.1 免疫共沉淀及免疫印迹方法检测p27~(kip1)具有O-GlcNAc糖基化修饰 | 第33页 |
| 3.1.2 OGA抑制剂处理HepG2细胞，分析糖基化水平变化 | 第33-34页 |
| 3.1.3 OGA-shRNA对全细胞蛋白及p27~(kip1) O-GlcNAc化水平的影响 | 第34-35页 |
| 3.2 p27~(kip1) O-GlcNAc糖基化对磷酸化水平的影响 | 第35-36页 |
| 3.2.1 p27~(kip1)糖基化水平影响其Ser10磷酸化水平 | 第35页 |
| 3.2.2 生物信息学方法检测p27~(kip1)潜在糖基化位点 | 第35-36页 |
| 3.2.3 Ser2是影响Ser10磷酸化水平的主要糖基化位点 | 第36页 |
| 3.3 O-GlcNAc糖基化对p27~(kip1)亚细胞定位的影响 | 第36-38页 |
| 3.3.1 免疫荧光检测Ser2糖基化能促进p27~(kip1)的出核 | 第36-37页 |
| 3.3.2 核浆分离，分析Ser2糖基化对p27~(kip1)亚细胞定位影响 | 第37-38页 |
| 3.3.3 p27~(kip1)糖基化位点突变后修饰后p27~(kip1)/CRM1相互作用减弱 | 第38页 |
| 3.4 p27~(kip1)O-GlcNAc糖基化对HepG2细胞株增殖水平的影响 | 第38-40页 |
| 3.4.1 p27~(kip1)发生糖基化修饰后对CyclinE/CDK2复合物抑制作用的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.2 p27~(kip1)发生糖基化修饰后对HepG2细胞增殖的影响 | 第39-40页 |
| 3.5 p27~(kip1)与OGT在HCC组织中的表达 | 第40-44页 |
| 3.5.1 糖基化的p27~(kip1)及OGT在HCC以及对应癌旁新鲜组织中的表达情况 | 第40-41页 |
| 3.5.2 免疫组化检测OGT和p27~(kip1)在HCC及正常石蜡切片组织中的表达情况 | 第41页 |
| 3.5.3 OGT及p27~(kip1)的表达对HCC患者生存率的影响 | 第41-42页 |
| 3.5.4 OGT及p27~(kip1)的表达与HCC临床病理因素的相关性 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 英文缩写词表 | 第50-52页 |
| 综述 | 第52-69页 |
| 综述参考文献 | 第61-69页 |
| 攻读硕士学位期间公开发表的论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
