摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第11-21页 |
1.1 Elongator复合物研究进展 | 第11-14页 |
1.1.1 Elongator复合物的发现与组成 | 第11-12页 |
1.1.2 Elongator复合物的功能 | 第12-14页 |
1.2 酵母咖啡因耐受性的研究 | 第14-15页 |
1.3 酵母菌的氧化应激反应 | 第15-19页 |
1.3.1 活性氧与氧化应激 | 第15-16页 |
1.3.2 酿酒酵母的氧化应激反应 | 第16-19页 |
1.4 研究目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 材料和方法 | 第21-27页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
2.1.2 引物设计 | 第21-22页 |
2.1.3 试剂和培养基 | 第22页 |
2.1.4 试剂盒 | 第22页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-27页 |
2.2.1 大肠杆菌的感受态细胞制备和质粒转化 | 第22页 |
2.2.2 质粒的提取 | 第22页 |
2.2.3 酵母转化 | 第22-23页 |
2.2.4 敏感性试验和功能互补实验 | 第23页 |
2.2.5 生长曲线的绘制 | 第23页 |
2.2.6 酵母菌粗蛋白的提取 | 第23-24页 |
2.2.7 CAT和SOD酶活测定 | 第24-25页 |
2.2.8 RNA的提取 | 第25页 |
2.2.9 基因表达分析 | 第25-27页 |
第三章 Elp3的缺失对酵母菌咖啡因耐受性的影响 | 第27-39页 |
3.1 ELP3的组蛋白乙酰化作用对酵母咖啡因耐受性的影响 | 第27-37页 |
3.1.1 elp△菌株的敏感性实验 | 第27-28页 |
3.1.2 elp3△菌株的生长曲线 | 第28-29页 |
3.1.3 elp3△菌株的功能补偿实验 | 第29-30页 |
3.1.4 组蛋白乙酰化位点突变兼ELP3缺失菌株的功能补偿实验 | 第30-33页 |
3.1.5 组蛋白乙酰化位点突变兼ELP3缺失菌株的生长曲线 | 第33-35页 |
3.1.6 HSP26、SSA3、HSP82基因表达分析结果 | 第35-37页 |
3.2 Elp3的tRNA修饰作用在酵母咖啡因耐受性的影响 | 第37-39页 |
第四章 Elp3的缺失对酵母菌氧化应激反应的影响 | 第39-55页 |
4.1 ELP3的组蛋白乙酰化作用对酵母氧化应激反应的影响 | 第39-52页 |
4.1.1 elp△菌株的敏感性实验 | 第39-40页 |
4.1.2 elp3△菌株的生长曲线 | 第40-41页 |
4.1.3 elp3△菌株的功能补偿实验 | 第41-42页 |
4.1.4 组蛋白乙酰化位点突变兼ELP3缺失菌株的功能补偿实验 | 第42-45页 |
4.1.5 组蛋白乙酰化位点突变兼ELP3缺失菌株的生长曲线 | 第45-47页 |
4.1.6 H_2O_2对elp3△菌株的胞质蛋白浓度、CAT和SOD活力的影响 | 第47-49页 |
4.1.7 HSP26、SSA3、HSP82基因表达分析结果 | 第49-52页 |
4.2 Elp3的tRNA修饰作用对酵母氧化应激反应的影响 | 第52-55页 |
第五章 讨论 | 第55-63页 |
5.1 Elongator复合物的功能完整性 | 第55页 |
5.2 Elp3及其两保守结构域与酿酒酵母的咖啡因耐受性 | 第55-57页 |
5.3 Elp3及其两保守结构域缺失对酿酒酵母氧化应激反应的影响 | 第57-63页 |
第六章 结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
附录 | 第73-77页 |
致谢 | 第77-79页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第79-80页 |